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胃腺癌p16与Rb蛋白的表达及相关性研究
目的 探讨p16、Rb蛋白与胃腺癌发生发展的关系,分析p16与Rb蛋白的表达及其相关性.方法 应用免疫组化SP法检测102例胃腺癌中p16与Rb蛋白的表达情况.结果 在31例Rb蛋白阳性标本中,24例显示p16蛋白表达缺失或低表达,在23例Rb蛋白阴性标本中有19例显示p16蛋白阳性或强阳性.结论 p16蛋白表达缺失及Rb蛋白表达阳性在胃腺癌发生和发展中发挥重要作用.p16与Rb蛋白阳性表达的相互抑制,是胃腺癌的特征之一.
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脑胶质瘤中pRb表达与CDK4、MTS基因异常的相关性研究
目的 探讨脑胶质瘤中CDK4、MTS基因异常及pRb表达改变与脑胶质瘤发生发展的相关性。方法 应用PCR-SSCP、分子杂交及免疫组化技术检测68例不同病理分级脑胶质瘤。结果 p16基因表达阴性或pRb无表达或CDK4扩增多为单独发生，其中III-IV级肿瘤中pRb、p16蛋白失表达或p15基因缺失或CDK4基因扩增的综合发生率为89%(42/47)。结论 脑胶质瘤中细胞生长周期“关卡”蛋白p16、pRb、或CDK4单因素的异常比交错并发的改变更为常见，p16、pRb失活或CDK4扩增的任一改变，即可能破坏细胞增殖的正常调控，促发脑胶质瘤细胞的癌性增殖或恶性演变。
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喉鳞状细胞癌中MDM2、Rb蛋白表达意义研究
目的：：探讨MDM2、Rb蛋白表达在喉鳞状细胞癌中的诊治价值。方法：采用免疫组化法对鳞状细胞癌组、癌前病变组、声带息肉组、癌周正常组患者MDM2、Rb蛋白表达进行检测,分析其与肿瘤变化的关系。结果：喉鳞状细胞癌组、癌前病变组、声带息肉组、癌周正常组MDM2检测结果逐渐下降,鳞状细胞癌组高,且组间比较差异有统计学意义,P<0.05；四组Rb检测结果逐渐升高,鳞状细胞小,P<0.05；MDM2与Rb蛋白表达在喉鳞状癌患者中呈负相关性(Rs=-0.563,P<0.05)。结论：MDM2、Rb蛋白表达可以作为预测早期喉鳞状细胞癌的依据。
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p16/Rb蛋白表达及核因子-κB活性在肝细胞肝癌中的意义
目的探讨p16和Rb蛋白(pRb)以及核因子-κB(NF-κB)活性在肝细胞肝癌(HCC)发生中的相互关系及作用.方法以Western印迹检测35例HCC及癌旁组织(距肿瘤至少3 cm)中p16蛋白和pRb表达;以凝胶电泳迁移实验(EMSA)和竞争实验检测组织中NF-κB转录活性.结果HCC及癌旁组织p16蛋白表达率分别为37%(13/35)和48%(17/35);pRb表达率分别为34%(12/35)和74%(26/35),两组间差异有显著性(P<0.01);NF-κB有结合活性者分别为77%( 27/35)和86%(30/35).p16蛋白和pRb均表达的HCC中NF-κB有转录活性者占40%(4/10),两者均无表达的HCC中NF-κB有转录活性者占90%(18/20),两组间差异有显著性(P<0.01);p16和pRb均表达的癌旁组织中核因子-κB有转录活性者占76%(13/17),两者均无表达的癌旁组织中NF-κB有转录活性者占89%(8/9),差异无显著意义(P>0.05).结论 p16功能缺失在HCC发生过程中是早期事件,Rb功能缺失出现较晚;p16蛋白和Rb蛋白表达呈正相关关系;p16或Rb蛋白表达缺失,除影响细胞周期,还通过影响NF-κB活性而抑制肝细胞凋亡,在HCC发生发展中发挥重要作用.
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人脑胶质瘤与SV40的关系及其p53、RB蛋白的表达
目的:探讨人脑胶质瘤与猴病毒40(SV40)的关系及其p53和RB蛋白的表达.方法:采用核酸原位杂交和免疫组织化学技术对256例人脑胶质瘤和11例正常脑组织进行了SV40 DNA和抑癌基因产物p53、RB蛋白检测.结果:胶质瘤SV40阳性104例,阳性率40.6%,正常脑组织均未检测出SV40 DNA,未发现SV40感染与胶质瘤病理分级存在明显相关(P ＞0.05);SV40阳性胶质瘤p53、RB蛋白表达阳性率显著高于SV40阴性胶质瘤(P＜ 0.01);p53、RB蛋白表达阳性率分别与胶质瘤病理分级呈正相关(Pearson列联系数分别为P＝0.45和P＝0.49,P＜ 0.01).结论:我国人脑胶质瘤组织中存在着SV40感染现象;p53、RB蛋白过表达以及SV40感染可能在胶质瘤发生发展中起重要作用,其内在联系有待研究.
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Rb、p16、CyclinD1基因蛋白在大肠癌中的表达及临床意义
目的:探讨抑癌基因Rb、p16和癌基因CyclinD1在大肠癌中的表达及临床意义.方法:采用流式细胞分析技术(Flow cytometry,FCM),定量研究在大肠癌与正常粘膜中Rb、p16、CyclinD1的表达情况,所有数据换算成荧光指数(Fluorescence Index,FI)值后,利用SAS软件包进行统计分析.结果:1)30例大肠癌组织与正常粘膜中Rb、p16、CyclinD1 FI(x+s)值经t检验,均P＜0.01;2)以Rb表达阳性、阴性进行分组,在Rb阳性下,p16与组织学分级呈负相关,CyclinD1与组织学分级呈正相关,p16与淋巴转移呈负相关,均P＜0.01.在Rb阴性下,Rb与淋巴转移呈负相关,p16与淋巴转移呈正相关,而CyclinD1与淋巴转移呈负相关,均P＜0.01.结论:1)Rb、p16、CyclinD1在大肠癌、正常粘膜组织中的表达存在显著差异;2)在Rb阳性下,p16失活、缺失或突变会导致组织的恶性程度增加且易发生淋巴转移,CyclinD1的激活会导致组织的恶性程度增加;3)在Rb阴性下,各种结果显示:负反馈机制在其中可能起作用.
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HPV感染、 Rb及Mcl-1蛋白表达与非小细胞肺癌的相关性研究
目的探讨人乳头瘤病毒( Human papillomavirus, HPV)感染, Rb蛋白和Mcl-1蛋白表达的变化同非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer, NSCLC)的相关性。方法分别应用PCR、免疫组化方法(IHC)检测NSCLC组(79例)和肺良性病变组(11例)中HPV DNA表达和Rb蛋白、 Mcl-1蛋白的表达。结果在NSCLC组织中, HPV DNA的PCR检测阳性检出率为46.8%,肺良性病变组阳性检出率为9.1%( P<0.05), HPV阳性表达与组织学类型、分化程度及吸烟相关。 NSCLC中HPV阳性组Rb蛋白表达阳性率(37.8%)显著低于阴性组(61.9%)(P<0.05)。 NSCLC中HPV阳性组和阴性组Mcl-1蛋白表达阳性率分别为59.5%和35.7%(P<0.05)。肺良性病变组中Rb蛋白表达阳性率为72.7%而Mcl-1蛋白未表达。结论 NSCLC的发生发展可能与HPV感染后通过抑制Rb蛋白通路同时促进Mcl-1蛋白通路表达有关。
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p16、Rb、cyclinD1蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及意义
目的 检测细胞周期相关蛋白p16、Rb和cyclinD1在子宫内膜腺癌组织中表达.探讨其在子宫内膜腺癌中的临床病理意义及相关性.方法 应用免疫组织化学SP法检测60例子宫内膜腺癌组织和20例子宫内膜单纯性增生及20不典型性增生中p16、Rb和cyclinD1蛋白的表达状况.结果 p16在子宫内膜腺癌和不典型性增生中及子宫内膜单纯性增生中表达率分别为(46.7%,60.0%,75.0%).Rb在三者中表达率分别为(58.3%,75.0%,85.0%).cyclinD1在三者中表达率分剐为:(55.0%,45.0%,20.0%).p16与Rb表达呈负相关(P＜0.05),cyclinD1与Rb表达呈正相关(P＜0.05).p16与cyclinD1表达无相关性.结论 子宫内膜腺癌发生机制涉及p16、Rb和cyclinD1调节环路中多个基因的异常.p16、Rb低表达和cyclinD1过度表达可能起在子宫内膜腺癌发生中起协同作用.
关键词： 子宫内膜腺癌 p16蛋白 Rb蛋白 CyclinD1蛋白 免疫组织化学 -
乳腺癌cyclin D1、Rb蛋白表达的意义
目的:探讨cyclin D1蛋白和Rb蛋白的表达状况与乳腺癌发生发展的关系.方法:采用S-P免疫组化法检测52例乳腺癌和20例良性乳腺病变组织中cyclin D1蛋白和Rb蛋白的表达.结果:乳腺癌中cyclin D1过表达率为34.60%(18/52),显著高于良性乳腺病变组织的10.00%(2/20),P＜0.05,cyclin D1过表达出现于导管内癌中并持续于浸润、转移等进展过程中,与患者年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移及组织学分级均无相关性.乳腺癌中Rb蛋白阴性表达率为76.91%(40/52),显著高于良性乳腺病变组织的15.00%,P＜0.05;Rb蛋白阴性表达与乳腺癌临床病理特征间无相关性,Rb蛋白表达阴性者中,cyclin D1过表达率为20.00%,而Rb蛋白表达阳性者中,其cyclin D1过表达率为83.33%,两者比较有显著差异(P＜0.05).结论:cyclin D1蛋白和Rb蛋白与乳腺癌发生、发展密切相关;cyclin D1、P16及Rb通路失活可能与乳腺癌的发生密切相关.
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D114对K562细胞增殖的影响及Rb蛋白在Notch活化的K562细胞中的表达
目的 本实验旨在探讨D114基因对白血病细胞株K562生长的影响及Rb蛋白在Notch活化的K562细胞中的表达.方法 实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCEA.1-D114).转染48 h后,免疫印迹法检测各组蛋白D114、Rb的表达水平；用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞的增殖；转染48 h后,比色法检测各组细胞的caspase-3、caspase-8的活性.结果 在各组K562细胞中均检测到D114及Rb蛋白的表达,实验组的叫14及Rb蛋白表达比两个对照组显著增多(P＜0 05)；实验组较对照组cASpase-3、caspase-8的活性增高明显.结论 Notch活化的K562细胞中Rb蛋白高表达,通过提高caspase-3、caspase-8的活性,诱导增殖速度减慢.
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cyclinD1蛋白和Rb蛋白表达状况与乳腺癌发生发展的关系
目的：探讨细胞周期素（ cyclin） D1蛋白和Rb蛋白表达状况在乳腺癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法选取攀枝花学院附属医院普外科120例乳腺癌和58例良性乳腺组织，应用免疫组织化学染色方法（ S-P法）检测cyclinD1蛋白和Rb蛋白的表达。结果乳腺癌中cy-clinD1蛋白阳性表达率显著高于良性乳腺组织（P＜0.05）；而Rb蛋白在乳腺癌中的阳性表达率明显低于良性乳腺组织（P＜0.05）；乳腺癌中cyclinD1蛋白和Rb蛋白阳性表达与其组织学分级、病理分级有关（ P＜0.05）；组织学分级越高，cyclinD1蛋白阳性表达越高，而 Rb蛋白阳性表达越低；病理分级越高，cyclinD1蛋白和Rb蛋白阳性表达均越低；Rb蛋白表达阳性组的cyclinD1蛋白阳性表达率显著高于Rb蛋白表达阴性组（ P＜0.05）。结论cyclinD1蛋白和Rb蛋白的异常表达均在乳腺癌的发生过程中起到重要的作用，cyclinD1蛋白的表达与Rb蛋白的表达有关，二者参与了乳腺癌发生、发展过程。
关键词： CyclinD1蛋白 Rb蛋白 乳腺癌 免疫组织化学 -
Rb蛋白干涉增强人胃癌细胞SGC-7901对化疗药物顺铂敏感性的研究
目的:研究通过RNAi技术特异性降低人胃癌细胞SGC-7901中的细胞周期调节蛋白Rb表达量,观察对化疗药物顺铂(eisplatin,CDDP)敏感性的变化,并探讨其潜在机制.方法:化学合成针对Rb的干涉序列和对照序列,转染SGC-7901细胞.采用Western blot和RT-PCR的方法检测干涉效率.通过流式细胞术检测干涉Rb对细胞周期的影响.干涉组和对照组细胞分别在10%和无血清的1640培养基中培养,并给予20μM顺铂或对照处理不同时间,采用Western blot检测Caspase-3的活化,通过MTT检测细胞的存活率.结果:设计的干涉序列可以高效抑制Rb的表达,从而促进细胞进入G1期,当细胞在10%的培养基条件下培养时,与对照组相比,Rb干涉的细胞凋亡率明显增加;而当细胞在无血清条件下培养时,干涉和对照组细胞凋亡率无明显差别.结论:干涉Rb可能通过促进细胞进入G1期而增强肿瘤细胞对化疗药物顺铂的敏感性.
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细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其意义
目的 探讨细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系.方法 应用免疫组化S-P法对70例大肠癌组织及距癌灶3 cm以外的癌旁组织、10 cm以外的正常组织中CyclinDl、CDK4、p16和Pb进行检测.结果 CyclinD1和CDK4在大肠癌中过度表达,分别为36/70(51.4%)和28/70(40.0%),并与肿瘤的分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,其CyclinD1和CDK4的阳性率分别为70.0%和60.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率分别为44.0%和32.0%,两者相比差异有显著性(P＜0.05),p16在大肠癌中为低表达33/70(47.1%),癌旁组织和正常组织中p16的表达分别为57.1%和71.4%,Rb在大肠癌、癌旁及正常组织中的表达分别为65.7%、78.6%和85.7%.CyclinD1与CDK4呈正相关关系(P＜0.05).CyclinD1与p16、p16与Rb是负相关关系(P＜0.05、P＜0.05).结论 CyclinD1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;p16的表达可能受Rb蛋白的负调控;CyclinD1的过度表达和p16的低表达在大肠癌发生中起协同作用;
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胃癌中p16、Rb基因蛋白的表达及意义
目的探讨p16、Rb基因蛋白的表达与胃癌的发生及临床病理参数的关系.方法采用S-P免疫组化方法检测了80例胃癌及28例癌旁正常胃粘膜组织中p16和Rb蛋白的表达.结果胃癌中p16、Rb蛋白表达阳性率(分别为58.8%和55.0%)显著低于癌旁正常胃粘膜(100%)(P＜0.01),Rb蛋白中度阳性或强阳性胃癌p16蛋白中度阳性或强阳性表达率明显低于Rb蛋白阴性或弱阳性胃癌(P＜0.01).p16蛋白在胃癌中的表达与肿瘤细胞分化程度、Lauren分型和淋巴结转移密切相关.结论 p16、Rb蛋白表达的缺失与胃癌的发生密切相关,p16蛋白的表达可用于判断胃癌患者的预后,p16和Rb蛋白的表达相互抑制,呈明显的负相关.
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Rb蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义
目的分析Rb蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系.方法应用免疫组化SABC法,检测44例结直肠癌癌中心、癌旁(距肿瘤边缘1cm)、切缘(距肿瘤边缘3cm以上)Rb蛋白表达情况,并分析Rb蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系.结果44例结直肠癌癌中心Rb蛋白表达为61.36%(27/44),癌旁粘膜为90.91%(40/44),切缘为97.73%(43/44);Rb蛋白表达与年龄、性别、肿瘤部位、大小及分化程度无显著相关,而与肿瘤临床分期及淋巴结转移显著相关.结论Rb蛋白的表达与结直肠癌的部分临床病理特征密切相关,可能是判断结直肠癌预后的一项重要指标.
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HPV16E7蛋白和Rb 蛋白在人喉鳞状细胞癌中的表达及相关性研究
目的:探讨HPV16E7蛋白和Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用免疫组织化学方法检测78例喉鳞癌、26例喉癌前病变、24例声带息肉和10例癌周正常喉组织标本中HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中HPV16E7蛋白的阳性表达率分别为0(0/10)、4.1%(1/24)、27.0%(7/26)和43.6%(34/78),Rb蛋白的阳性表达率分别为80.0%(8/10)、79.2%(19/24)、61.5%(16/26)和50.0%(39/78);HPV16E7蛋白和Rb蛋白的阳性表达率在癌周正常喉组织、声带息肉与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05),HPV16E7蛋白表达呈明显升高趋势,而Rb蛋白表达呈明显下降趋势.HPV16E7蛋白的阳性表达率,喉鳞癌病理Ⅲ级明显高于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05);而Rb蛋白的表达正相反,肿瘤病理Ⅲ级明显低于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05).结论:HPV16E7蛋白的表达升高和Rb蛋白的表达下降可能会导致人喉鳞癌的发生和发展;检测HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达可用于喉鳞癌恶性程度的评定.
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HPV16、HPV16 E7蛋白与Rb蛋白在喉癌发生中的作用
目的 观察HPV16及其早期区基因E7表达蛋白与Rb蛋白在喉癌发生中的相关性,为探索喉癌的病因学提供依据.方法 用免疫组织化学方法检测82例喉鳞癌、39例非癌组织标本中HPV16、HPV16 E7以及Rb的蛋白表达.结果 HPV16 E7和Rb蛋白表达的阳性率在非癌及癌组织中有非常显著的差异(P＜0.01),HPV16的阳性率在非癌及癌组织中有显著性差异(P＜0.05).喉癌组织中,Rb蛋白在HPV16和HPV16 E7阳性及阴性组中的阳性率显著不同(P＜0.01),而在非癌组织中则无此现象(P＞0.05).结论 喉癌组织中HPV16 E7的高表达导致的pRb功能失活是引起喉癌的主要原因之一.
关键词： 喉肿瘤 鳞状细胞 HPV16蛋白 HPV16 E7蛋白 Rb蛋白 -
胃癌前病变及胃癌组织中抑癌基因P16、Rb及周期素D1蛋白表达的研究
目的:研究抑癌基因P16、周期素D1(Cyclin D1)、视网膜母细胞瘤(Rb)蛋白在胃癌前病变(不典型增生和肠化)及胃癌组织中的表达.方法:采用免疫组化法检测10例正常胃黏膜,15例胃不典型增生,15例胃黏膜肠化生,30例胃癌组织中P16、Cyclin D1、Rb蛋白的表达,并结合胃癌临床资料进行分析.结果:P16蛋白阳性表达,正常胃黏膜90%,不典型增生86.67%,肠化86.67%,胃癌36.67%,胃癌组与正常对照组及胃癌前病变组(不典型增生及肠化)间差异均有极显著意义(P＜0.01).Cyclin D1蛋白阳性表达,正常胃黏膜10%,不典型增生20%,肠化20%,胃癌53.33%,胃癌组阳性率与其他3组相比差异有显著性(P＜0.05).Rb蛋白在正常胃黏膜、肠上皮化生、不典型增生及胃癌组织中阳性率分别为90%、80%、80%、50%,其中胃癌组阳性率与正常胃黏膜组相比差异有显著性(P＜0.05).P16、Cyclin D1蛋白与胃癌分化程度、淋巴结转移与否、远处转移与否呈一定的相关性.结论:P16、Cyclin D1、Rb基因在胃癌的发生中起一定的作用;P16、Cyclin D1、Rb蛋白的检测在胃癌的早期诊断中具有一定的价值,并有助于胃癌的预后判断.
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RB蛋白表达状况对乳腺癌细胞凋亡和周期变化的影响
目的:研究RB蛋白表达状况对乳腺癌细胞凋亡及其周期变化的影响.方法:以乳腺癌细胞株MCF-7/S为研究对象,采用免疫细胞化学法检测多柔比星(ADR)作用前后RB蛋白的表达状态;应用流式细胞术进行细胞凋亡和细胞周期分析.结果:加ADR前MCF-7/S细胞的细胞核磷酸化RB蛋白为阳性,去磷酸化RB蛋白为阴性.经不同浓度ADR处理后,随着ADR浓度的增加,MCF-7/S细胞去磷酸化RB蛋白表达量逐渐增高.流式细胞术分析结果表明,经0.25、2.0和5.0μg/ml ADR作用24 h后,MCF-7/S细胞凋亡率分别为17.1%、18.4%和25.9%.细胞周期分析表明,MCF-7/S细胞主要积聚于G1期.结论:去磷酸化RB蛋白表达与MCF-7/S细胞凋亡率呈正相关(r=0.998,P＜0.05),同时MCF-7/S积聚于G1期.
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胃癌组织中P16、Cyclin D1、Rb表达及其生物学行为的研究
目的研究P16、Cyclin、D1Rb基因在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系.方法采用免疫组化方法检测10例正常胃黏膜、30例胃癌组织中P16、Cyclin D1、Rb蛋白的表达,并结合其临床资料进行分析.结果P16、Cyclin D1、Rb蛋白阳性表达,正常胃粘膜分别为90%、10%、90%;胃癌分别为36.67%、53.33%、50%,胃癌纽与正常对照组间差异均有显著性(P＜0.05),P16、Cyclin D1蛋白与胃癌分化程度、淋巴结转移与否、远处转移与否呈一定的相关性.结论P16、Cyclin D1、Rb基因与胃癌发生有关,P16、Cyclinp蛋白检测有助于胃癌预后的判断.
关键词： 胃癌 p16蛋白 Cyclin D1蛋白 Rb蛋白
