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细辛医药相关中国发明专利分析
细辛是一种常用中药材,主要药用部位为根和根茎,自古便被列为上品,有诸多药用功效,中国药典规定品种为北细辛、汉城细辛和华细辛。对细辛相关发明专利进行分析,有助于了解其发明专利申请现状及发展趋势,进而推进该药物的产品研发和产业化发展,促进科技成果转化。本文使用《孔明专利信息搜索平台》进行专利检索,并利用Python、R语言等工具对检索结果进行收集、筛选、整理、统计、挖掘和分析,深入剖析国内的细辛相关医药发明专利申请的现状与发展趋势,为细辛的开发提供参考。细辛的发明专利申请热度逐年提高;细辛相关发明专利申请主要来自于中、韩、日、俄、美等国家和地区,涉及的主要临床应用为感冒、咳喘、头痛、风湿痹痛、抗菌消炎、心血管系统等疾病;细辛多与活血祛瘀药、解表药和补虚类药配伍。
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华细辛苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与生物信息学分析
目的:克隆华细辛Asarum sieboldii苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因(AsPAL),并进行序列特征分析.方法:通过同源克隆的原理,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)相结合的方法,以华细辛叶片总RNA为模板,获得了该基因的cDNA全长,并通过DNAMAN软件和ExPASy在线分析等对其进行了生物信息学分析.结果:获得AsPAL全长cDNA,Genbank登录号为KY428932,序列分析表明,所克隆的cDNA含有1个2 157 bp的完整开放阅读框,编码718个氨基酸,预测蛋白质相对分子质量为78 758 Da,理论等电点为6.24,没有跨膜区,含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYVAG,不含信号肽;氨基酸序列多重比较发现,AsPAL与土肉桂、葡萄、当归和杏的同源性达到80%以上.结论:获得了AsPAL cDNA全长序列,对其进行初步生物信息学分析,为进一步探究AsPAL的功能和华细辛甲基丁香酚生物合成的调控机制奠定了必要的基础.
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《伤寒论》中细辛的功效
细辛为马兜铃科多年生草本植物北细辛(或华细辛)的全草之须根,因其根细而辛辣,故以此得名.北细辛和汉城细辛主要产地为东北三省,故统称北细辛,又名辽北细辛,临床用药多以此为主;华细辛主产于陕西.细辛早载于<神农本草经>,属常用中药之一,有小毒,具有解表散寒、温肺化饮、祛风止痛、温通鼻窍等功效.张仲景<伤寒杂病论>中用细辛的方剂共有17个.本文将细辛的功效、用量和用法分述于下.
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不同来源细辛属药材中马兜铃酸A的定量分析
细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum hetrolropoides Fr.Schmidt vat.mandshuricum (Maxim.)Kitag、汉城细辛A.sieboldii Miq.var.seoulense Nakai或华细辛A.sieboldii Miq.的根及根茎[1].
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细辛的内服用量与毒性
中药细辛,为马兜铃科多年生草本植物北细辛Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.)Kitag.、汉城细辛A.sieboldii Miq.vat.seoulense Nakai或华细辛A.sieboldii Miq.的全草.对其用量与毒性的认识,是历代医药学家争论不已的问题,今笔者不揣浅陋,也就此谈谈自己的管窥之见.
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高效液相色谱法测定华细辛中马兜铃酸A含量
目的测定华细辛中马兜铃酸A的含量.方法建立高效液相色谱方法,采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5 μm),以乙腈-1%冰醋酸水溶液(39:61)为流动相,流速为0.8 mL·min-1,检测波长为317 nm,分别测定20个华细辛样品中马兜铃酸A的含量.结果高效液相色谱法的回收率为98.9%,RSD为2.1%,标准曲线回归方程为y=2.40x+0.267,在5.2~68 ng内呈良好线性关系.结论华细辛中马兜铃酸A含量在6.8~45.4 μg·g-1.
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细辛的分类品种与伪品特征
细辛史载于 《神农本草经》,列为上品.历代本草皆有记载.《名医别录》记载:"细辛生华阴山谷".陶弘景日:"今用东阳临海者,形段乃好,而辛烈不及华阴高丽者."高丽产品即为北细辛、汉城细辛,习称"辽细辛".苏颂日:"今处处有之,然它处所出者,不及华阴者为真."《本草纲目》也称:"华州真细辛",可见当时是以辽细辛、华细辛作药用,与现在应用基本一致.现在的细辛来源为北细辛、华细辛、汉城细辛三种,本文中,笔者将就这三种细辛的特点进行分析整理.
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基于转录组分析华细辛甲基丁香酚生物合成途径的相关基因
目的 获得华细辛Asarum sieboldii转录组数据库和差异表达基因,识别华细辛甲基丁香酚生物合成相关基因.方法 以华细辛地下部分(根)和地上部分(叶片)2个样本作为供试材料,采用Illumina Hiseq 4000进行转录组测序,并从头拼接,对Unigene进行功能注释和差异性分析.结果 共获得12.25 Gb数据,拼接得到129 003个Unigene,可归类于52个GO分类,涉及363条KEGG代谢通路.分析发现,共有439个差异表达基因,其中上调基因占38.3%,下调基因占61.7%,差异较大;136个Unigene与苯丙素类次生代谢途径相关,其中44个Unigene参与甲基丁香酚的生物合成过程.结论 本研究得到大量华细辛转录本信息,所发掘的与甲基丁香酚生物合成相关的Unigene为相关基因的分离、功能验证及其表达调控机制的阐明提供了重要依据.
关键词: 华细辛 转录组 苯丙素类生物合成途径 甲基丁香酚 Unigene -
华细辛AFLP反应体系的建立和优化
目的 建立优化的华细辛Asarum sieboldii AFLP反应体系,为华细辛遗传多样性的研究提供技术支持.方法 以华细辛叶片为材料,对基因组DNA提取、酶切连接、PCR扩增等操作过程中各关键因素进行分析,筛选适条件,建立完善的AFLP反应体系.结果 建立了优化的华细辛AFLP分析体系:在基因组DNA提取时,提取液中添加巯基乙醇、样品温浴时间为30 min;Trul Ⅰ和PstⅠ的酶切时间分别为3 h;在扩增反应中,Mg2+终浓度为1.5 mmol/L、Taq DNA聚合酶用量为0.2 μL.结论 本反应体系可获得良好的AFLP分析结果,可用于华细辛遗传多样性研究.
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甘肃细辛的植物资源调查兼论细辛的产区变迁
细辛为常用中药材,古今药用品种较混杂,本草记载的正品细辛主产于陕西及辽宁,前者来源于马兜铃科华细辛Asarum Sieboldii Miq.药用历史悠久,品质优良;后者为同属辽细辛A.heterotropoides Fr.Schm var.mandshuricum(Maxim)Kitag和汉城细辛A.sieboldii Miq var.Seoulense(Nakai)C.YCheng et.C.S.Yang为现代细辛的重要产区和植物来源;这是目前有关细辛考证较为一致的结论[1,2],上述品种为<中国药典>所收载[3].
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浅谈关于细辛在临床应用中的剂量问题
本人就细辛在临床应用中的剂量问题,发表一下自己的体会,以供同仁和智者们给予批评和指正.细辛属马兜铃科植物华细辛和北细辛的干燥全草,首载于<神农本草经>,为常用药.辛、温、归肺肾经,具祛风、散寒、止痛、温肺化饮、宣通鼻巧作用,反藜芦.主要用于头痛、牙痛、痹痛以及外感风寒表证,寒饮伏肺、咳嗽气喘、痰多清稀者.
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可逆高效液相色谱法测定细辛药材及其制剂中马兜铃酸的含量
细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.)Kitag.、汉城细辛Asarum sieboldii Miq.var.seoulense Nakai或华细辛Asarum sieboldii Miq.的干燥全草.临床应用于治疗风寒湿痹等症[1].
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北细辛汉城细辛及华细辛中总马兜铃酸含量测定
目的:测定北细辛、汉城细辛和华细辛中总马兜铃酸的含量,为其临床安全用药提供实验依据.方法:以马兜铃酸A为对照,采用紫外分光光度法,检测波长为390 nm.结果:马兜铃酸A浓度在3.0~30.0μg·mL-1范围内与吸收度呈良好线性关系,Y=19.844X+0.0272(r=0.9996),平均回收率为97.84%,RSD为0.97%.三种细辛中总马兜铃酸的含量为0.17%~0.35%,以汉城细辛低,华细辛高.结论:本方法操作简便,重复性好,精密度高,可用于细辛中总马兜铃酸的含量测定.
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细辛药用部位的探讨
据载[中国药典(1990年版一部)注释选编]:"细辛的药用部位,历代本草均记载为根,东北地区于伪满时期改用带根全草.”细辛,始载于<神农本草经>,列为上品,历代本草均有记载.<名医别录>记载:"细辛生华阴山谷,二月、八月采根阴干.”<吴普本草>记载:"细辛、如葵叶,赤色,一根一叶相连,三月、八月采根.”当今所用细辛为马兜铃科植物北细辛、汉城细辛、华细辛三种,药用为带根全草.<中国药典>(95版一部)规定细辛"含挥发油不少于2.0%(ml/g)”,作者通过实验说明细辛根、叶中挥发油含量相差悬殊.全草入药的细辛在加工成饮片时,应注意根、叶的比例,以确保临床疗效.
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北细辛中不含马兜铃酸的薄层色谱法鉴别
细辛为马兜铃科细辛属植物北细辛Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.) Kitag、汉城细辛sarum sieboldii Miq. var. Seoulense Nakai或华细辛Asarum sieboldii Miq.的干燥全草.
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细辛临床运用方法的探讨
细辛是一味常用于治疗风寒感冒、头痛、牙痛、鼻塞流涕、鼻鼽、鼻渊、风湿痹痛、痰饮喘咳的中药,入药历史悠久,首载于《神农本草经》.《中国药典》数版亦有详鉴.《中国药典》2010年版一部细辛项下收载:本品为马兜铃科植物北细辛、汉城细辛或华细辛的干燥根和根茎.含挥发油不得少于2.0%(ml/g).规定剂量1~3g.散剂每次服0.5~1g.
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北细辛、华细辛驯化栽培技术要点
目的:驯化栽培北细辛、华细辛.方法:原山坡地环境下集中播种或移栽.结果:保持了药材质量、增加产量.结论:野生细辛可栽培驯化以增加产量.
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细辛药材不同部位中马兜铃酸A含量的高效液相色谱法测定
目的 高效液相色谱法测定细辛药材不同部位中马兜铃酸A的含量.方法 建立高效液相色谱法,采用C18色谱柱(250mm ×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-2%乙酸水溶液(42: 58),检测为波长320nm,柱温40℃,流速1mL·min-1.结果 马兜铃酸A浓度在0.5040~ 50.40μg·mL-之间呈良好的线性关系,r=0.9999.马兜铃酸A平均回收率为100.6%,RSD为2.88%.细辛药材叶子中马兜铃酸A的含量明显高于根和根茎中的含量,其根和根茎中含有微量的马兜铃酸A.结论 该方法灵敏、快速准确,可用于细辛药材中马兜铃酸A的含量测定.
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马蹄香及其易混品华细辛的薄层鉴别
目的用薄层色谱法鉴别马蹄香及其易混品华细辛.方法对样品分别依次用石油醚、乙醚、甲醇提取;将样品碱化后用氯仿提取;将样品用水蒸气蒸馏提取挥发油.然后将所得各部分制成供试液进行薄层对比实验.结果各部分薄层对比实验结果均显示两者的色谱存在明显差异;在甲醇提取部分,马蹄香色谱中检出马兜铃酸A.结论马蹄香含马兜铃酸A,是区别于华细辛的一个重要特征;其他薄层对比实验结果也为鉴别提供了依据.
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湖北产四种商品细辛的鉴别
对湖北产四种商品细辛的性状及显微特征进行了比较研究,并将其主要区别点列表说明,为湖北地区细辛的生产、销售及临床应用提供参考.