首页 > 文献资料
-
安石榴苷对糖尿病小鼠脂质代谢及氧化应激的影响
目的 观察安石榴苷对糖尿病小鼠脂质代谢及氧化应激的影响.方法 将链脲菌素(streptozotocin,STZ)诱导成功的糖尿病小鼠分为模型组、安石榴苷高剂量组和低剂量组,同时设立正常对照组.给药前及灌胃5周期间分别检测小鼠体重及空腹血糖,灌胃5周后检测血脂和血清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutataione,GSH)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、过氧化氢酶(cata-lase,CAT)的含量变化.结果 与模型组比较,安石榴苷组小鼠体重和空腹血糖均有所下降.安石榴苷低、高剂量组的TC、TG、FFA均显著下降(P<0.01), LDL-C水平明显下降(P<0.01),HDL-C显著升高(P<0.01),MDA、NO水平均显著降低(P<0.01),安石榴苷组的SOD、GSH水平显著升高(P<0.01),CAT水平无变化.结论 安石榴苷能降低糖尿病小鼠体重和空腹血糖水平,能明显改善糖尿病小鼠脂质代谢紊乱及氧化应激状态.
-
安石榴苷在Caco-2细胞的摄取特性研究
目的 研究安石榴苷在Caco-2细胞的摄取特性.方法 采用Caco-2细胞单层模型研究安石榴苷在不同时间、浓度、pH 值、温度、P-糖蛋白抑制剂条件下对细胞摄取的影响.采用高效液相色谱法测定安石榴苷在细胞中的含量.结果 安石榴苷在0.024 8~0.992μg范围内呈良好线性关系(r=0.997 9).安石榴苷在Caco-2细胞上的摄取呈现一定的时间、浓度和pH值依赖性,且P-糖蛋白抑制剂能显著增加安石榴苷的摄取量.结论 该方法操作简单、灵敏,安石榴苷在Caco-2细胞上的摄取主要是被动转运,P-糖蛋白参与安石榴苷的转运过程.
-
RP-HPLC法同时测定石榴皮提取物阴道泡腾片中安石榴苷和鞣花酸
目的 建立RP-HPLC法同时测定石榴皮提取物阴道泡腾片中安石榴苷和鞣花酸的方法.方法 色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.2％三氟乙酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长280 nm.结果 安石榴苷在0.098～0.610 mg/mL (r=0.999 1)、鞣花酸在0.011～0.060 mg/mL (r=0.999 8)有良好的线性关系;平均回收率分别为102.0％、100.4％(n=9),RSD均小于1.5％.结论 本方法简便、准确、专属性强,为石榴皮提取物阴道泡腾片的质量控制建立了方法.
-
高效液相色谱法测定大鼠血浆中安石榴苷的含量及其药动学研究
目的 建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中安石榴苷的含量,并用于药代动力学研究.方法 血浆样品采用色谱甲醇处理,以大黄素作为内标,Agilent XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇(A)-0.1％三氟乙酸水溶液(B)梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃.采用大鼠单剂量静注13 mg/kg的安石榴苷,HPLC法测定安石榴苷的血药浓度,并采用DAS 2.0软件计算药代动力学参数.结果 方法学实验结果表明内源性杂质不干扰安石榴苷和内标的测定,线性范围0.02 016～ 1.00 800 mg/ml.方法精密度、准确度、稳定性和回收率均符合生物样品测定的要求.结论 本方法操作简便、灵敏、专属性强,方法学考证符合生物样品测定的要求,并成功用于安石榴苷在大鼠体内的药代动力学研究.
-
安石榴苷对钛颗粒诱导破骨细胞活化的作用
背景：有关安石榴苷对破骨细胞形成分化方面的研究很少，对磨损颗粒引起骨吸收类疾病影响的研究更少。目的：建立钛颗粒诱导的小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化模型，观察不同浓度安石榴苷对破骨细胞增殖分化的影响。方法：将小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7分5组培养，分别加入培养基(空白组)、含0.1 g/L钛颗粒悬液的培养基、含0.1 g/L钛颗粒悬液+25μmol/L安石榴苷的培养基、含0.1 g/L钛颗粒悬液+50μmol/L安石榴苷的培养基、含0.1 g/L钛颗粒悬液+100μmol/L安石榴苷的培养基。CCK-8法检测培养1，3，5 d的细胞增殖活性；培养5 d后，抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测成熟破骨细胞数量，Western blot法检测IκBα及核转录因子κB p65磷酸化水平，RT-PCR测量活化T细胞核因子c1、抗酒石酸酸性磷酸酶和基质金属蛋白酶9 mRNA的表达。结果与结论：与空白组比较，钛颗粒和不同浓度安石榴苷对RAW264.7细胞的增殖能力均无影响(P>0.05)。与空白组比较，钛颗粒组成熟破骨细胞数量、IκBα及核转录因子κB p65磷酸化水平、活化T细胞核因子c1mRNA、抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA和基质金属蛋白酶9 mRNA表达显著升高(P<0.05，P<0.01)，安石榴苷呈浓度依赖性降低上述指标表达。结果表明安石榴苷可抑制破骨细胞的形成与活化。
-
安石榴苷的生物活性及其与多种慢性疾病关系的研究进展
慢性疾病严重危害着人类健康。石榴提取物可从各方面对慢性疾病起到一定的作用，但目前尚无统一的结论。安石榴苷作为石榴中含量丰富的多酚类化合物，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗感染、调节免疫、调节脂质代谢和预防心血管疾病等广泛的作用，对于慢性疾病的防治有重要意义。本文就安石榴苷的理化性质、检测方法、生物活性及其对几种慢性疾病的影响进行综述，为安石榴苷的临床应用提供依据。
-
安石榴苷对中波紫外线诱导HaCaT细胞光损伤的预防作用研究
目的 探讨安石榴苷对中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞损伤的保护机制.方法 培养的HaCaT细胞分为空白对照组、安石榴苷组、UVB组、安石榴苷+UVB组.噻唑蓝(MTF)法检测细胞增殖能力,Hoechst/碘化丙锭(PI)染色和流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法测定金属基质蛋白酶1(MMP1)及其组织抑制因子1 (TIMP1) mRNA表达水平,Western印迹检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白P38、JNK、ERK的磷酸化水平变化.结果 MTT试验示,10～ 40μmol/L安石榴苷对UVB诱导的HaCaT细胞损伤有较佳的预保护作用.UVB组HaCaT细胞强Hoechst和强PI双染细胞较空白对照组增多,安石榴苷+UVB组较UVB组减少.流式细胞仪分析,UVB组凋亡细胞百分率(9.82％±0.11％)高于空白对照(1.24％±0.91％,P＜0.01),而安石榴苷(10、20、40 μmol/L)+UVB组凋亡细胞百分率(分别为6.38％±0.14％、5.24％±0.17％、3.77％±0.11％)较UVB组低,差异有统计学意义(均P＜ 0.01).UVB组MMP1 mRNA相对表达量(12.376±0.602)高于空白对照组(1.007±0.147,P＜ 0.01),而TIMP1 mRNA相对表达量(0.103±0.006)低于空白对照组(1.006±0.139,P＜ 0.01),安石榴苷组MMP1及TIMP1 mRNA与空白对照组比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).安石榴苷预处理的HaCaT细胞经30 mJ/cm2 UVB照射后MMP1 mRNA相对表达量较UVB组降低(均P＜ 0.01),而TIMP1 mRNA较UVB组升高(均P＜0.01).Western印迹示,经UVB照射后,HaCaT细胞p-ERK、p-JNK及p-p38表达升高(均P＜ 0.01).安石榴苷组HaCaT细胞p-ERK、p-JNK及p-p38表达没有明显改变(P＞0.05),而安石榴苷+ UVB组有不同程度下降(均P＜0.01).结论 安石榴苷对UVB引起HaCaT细胞损伤有一定的预防作用.
-
安石榴苷在MDCK细胞单层模型上的转运机制研究
目的:采用MDCK细胞单层模型考察安石榴苷跨膜转运特性.方法:CCK8法筛选安石榴苷对MDCK细胞作用的安全浓度,Millicell-ERS测量细胞单层的TEER值确定细胞单层的完整性及致密性,考察给药浓度、方向、时间、温度、维拉帕米和ED-TA-Na2不同条件下安石榴苷的转运情况,采用HPLC法测定安石榴苷浓度,并计算表观渗透系数(Papp)和外排率(ER).结果:安石榴苷在MDCK模型上累积转运量具有时间和浓度依赖性,在100～300μg·ml-1浓度范围内测得的顶侧(AP)到基底侧(BL)的Papp值为(6.13±0.12)×10-7 cm·s-1、(6.96±0.26)×10-7 cm·s-1、(5.94±01.0)×10-7 cm·s-1,未随浓度升高而增大,4℃时转运量降低,P-gp抑制药维拉帕米可以促进APB-L方向的转运,加入EDTA-Na2后Papp(AP-BL)显著增大.结论:安石榴苷以被动转运为主兼有主动转运参与,是P-糖蛋白(P-gp)的底物受到P-gp的外排作用,同时有细胞旁路转运途径.
-
优化石榴皮中安石榴苷的分离与纯化工艺
目的：：研究石榴皮中安石榴苷的提取、分离纯化和定量方法。方法：采用20倍量50%乙醇常温超声波辅助法提取制备石榴皮粗提物,并采用HPLC法对粗提物中安石榴苷的含量进行测定。通过静态吸附和解吸性能的研究,优选D101、A8-8、NKA-9、HPD-100和HPD-500中对石榴皮多酚富集纯化效果佳的大孔吸附树脂,并优化大孔吸附树脂富集纯化石榴皮多酚的工艺条件,得到安石榴苷。通过反相MCI GEL CHP20P色谱柱对安石榴苷进一步分离纯化。结果：5种树脂中,HPD-500型树脂对石榴皮中安石榴苷有较好的吸附和分离性能。优工艺条件为：上样液质量浓度15 mg·ml-1,上样量2BV, pH为2,乙醇洗脱剂体积分数30%,洗脱剂体积8BV,可使安石榴苷含量从10.3%提高至30.7%。反相树脂MCI GEL CHP20P 色谱柱对30%乙醇洗脱部份进一步分离纯化,纯化后安石榴苷的含量可提高至61.2%。结论：富集纯化石榴皮安石榴苷的优大孔吸附树脂为HPD-500型树脂；反相MCI GEL CHP20P色谱柱进一步纯化可显著提高安石榴苷纯化物的含量；工艺的重复性和稳定性良好。
-
石榴皮炮制前后总鞣质及鞣花酸、安石榴苷含量变化研究
目的:比较石榴皮炮制前后总鞣质、鞣花酸、安石榴苷的含量变化,拟阐明炮制对石榴皮中鞣质类成分的影响.方法:采用紫外可见分光光度计法测定鞣质的含量,高效液相色谱法测定鞣花酸、安石榴苷的含量,对石榴皮生品、炒黄品和炒炭品进行比较.结果:不同批次石榴皮炮制前后鞣质的平均含量分别为:生品15.03％、炒黄品17.54％、炒炭品11.07％;鞣花酸的平均含量分别为:生品4.33％、炒黄品4.20％、炒炭品4.48％;安石榴苷的平均含量分别为:生品38.76％、炒黄品50.23％、炒炭品16.45％.结论:炮制对石榴皮中鞣质类成分的含量有显著影响.
-
RP-HPLC法同时测定石榴皮中4种多酚类成分的含量
目的:建立同时检测石榴皮中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法.色谱柱为Arcus EP-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1％三氟乙酸(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm(没食子酸)、377 nm(石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸).结果:没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的进样量分别在0.020～0.320、0.038～0.608、0.074～1.184、0.039～0.624 μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.999 7、0.997 1、0.997 8、0.999 4);平均加样回收率分别为93.22％、95.35％、98.00％、99.84％,RSD分别为2.75％、2.28％、2.11％、1.82％(n均为6).结论:本方法精密、可靠,可作为检测石榴皮中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸4种有效成分的方法.
-
安石榴苷对慢性支气管炎大鼠抗氧化能力的影响
目的:研究安石榴苷对慢性支气管炎大鼠抗氧化能力的影响及其作用机制.方法:采用混合烟雾吸入法建立烟熏致大鼠慢性支气管炎模型,将大鼠随机分为:空白对照组、模型组、不同浓度安石榴苷(10、20及40mg/kg)处理组.处理结束后测定各组大鼠肺组织及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)的含量.ELISA法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-8,IL-1β、IL-6的含量.Westernblot法检测PPARγ、PGC-1α、Nrf2、γ-GCS的表达.结果:模型组大鼠肺组织及血清中的SOD、CAT、GSH-Px活性均显著低于对照组,MDA含量显著高于对照组.与模型组相比较,20、40mg/kg安石榴苷可显著增加大鼠肺组织及血清中的SOD、CAT、GSH-Px的活性,抑制MDA的产生.ELISA结果表明20、40mg/kg安石榴苷可显著抑制TNF-α、IL-8、IL-1β、IL-6的产生.Western blot结果表明安石榴苷可显著促进PPARγ、PGC-1α、Nrf2、～γ-GCS的表达.结论:安石榴苷通过活化PPARγ/PGC-1α和Nrf2/γ-GCS信号通路,进而提高慢性支气管炎大鼠的抗氧化能力,缓解炎性反应.
关键词： 安石榴苷 支气管炎 抗氧化 PPARγ/PGC-1α Nrf2/γ-GCS -
安石榴苷减轻心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制研究
目的 探讨安石榴甙(PUN)预先处理对心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用及其机制.方法 选取成年雄性SD大鼠,PUN 30 mg/(kg·d)生理盐水灌胃7d后,建立心肌缺血再灌注(MI/R)模型.采用右侧颈总动脉插管检测心脏功能,用伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑(TTC)双染检测心梗面积,测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性反映心肌损伤,原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,比色法检测心肌丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,蛋白免疫印迹检测磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)表达及磷酸化.结果 PUN预先处理可改善MI/R后的心脏功能,减少心梗面积和心肌细胞凋亡,降低CK-MB和LDH的活性,降低心肌氧化应激,增加AMPK磷酸化(均P＜0.05或P＜0.01),而使用AMPK抑制剂(compound c)可阻断PUN对MI/R的保护作用(P＜0.05或P＜0.01).结论 PUN预先处理可减轻MI/RI,其机制可能与其激活AMPK有关.
关键词： 安石榴苷 心肌缺血/再灌注损伤 氧化应激 细胞凋亡 磷酸腺苷活化蛋白激酶 -
安石榴苷对小鼠巨噬细胞生长因子及M1/M2型极化的影响
目的 探讨安石榴苷(punicalagin,PUN)对小鼠巨噬细胞中生长因子及M1/M2极化的影响.方法 将RAW264.7细胞或小鼠原代腹腔巨噬细胞随机分为正常对照组、LPS(脂多糖,10μg/mL)组、PUN(50μmol/L)组、LPS+PUN组.药物作用4、12 h后,采用qRT-PCR检测细胞中生长因子(VEGF、PDGFa、PDGFb等)mRNA的变化,以及M1/M2型相关炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、M1/M2标志物诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)mRNA表达的动态变化,采用Western blot法检测蛋白表达变化,采用ELISA检测细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10的含量.结果 在LPS刺激的RAW264.7细胞中,与对照组比较,PUN(50μmol/L)对上述生长因子并无正性调控作用,差异无统计学意义(P>0.05).LPS刺激后,与对照组比较,M1巨噬细胞标志物iNOS、IL-6、IL-1β、TNF-α等的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),表明模型建立成功.与LPS组比较,PUN干预组在RAW264.7细胞或小鼠原代腹腔巨噬细胞中,M1型巨噬细胞标志物iNOS、IL-6等的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05),而M2型巨噬细胞标志物Arg-1和IL-10的表达水平上升,差异有统计学意义(P<0.05),Arg-1的蛋白表达量无统计学差异(P>0.05).结论 PUN对于炎性巨噬细胞中部分生长因子并无正性调控作用,但可促进巨噬细胞从M1型向M2型转化.
-
石榴皮安石榴苷提取物对人前列腺癌PC-3细胞的增殖及凋亡的影响
目的 探讨石榴皮安石榴苷提取物(PUN)对人前列腺癌PC-3细胞的增殖及细胞凋亡的影响.方法 采用细胞形态学观察与四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定PUN、石榴皮多酚提取物(PPP)与氟他胺(FLU)对PC-3细胞增殖的影响.应用流式细胞仪检测石榴皮中的PUN作用48 h后诱导PC-3细胞的凋亡情况.结果 PUN与PPP对人前列腺癌PC-3细胞增殖均有明显的抑制作用,且均呈剂量与时间依赖性;PUN对PC-3细胞的抑制作用优于PPP(P<0.05),而与FLU的抑制作用比较差异无统计学意义(P>0.05);PUN与PPP可明显诱导PC-3细胞凋亡,且均呈剂量依赖性,PUN与PPP在质量浓度为400、800μg/mL时,PUN组细胞的早期凋亡率要优于PPP组,差异有统计学意义(P<0.05);PUN与FLU在质量浓度为200、800μg/mL时细胞的早期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05).结论 PUN在体外可抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡.随着安石榴苷含量的提高,石榴皮多酚提取物对人前列腺癌PC-3细胞的体外抑制作用也会增强.
-
石榴皮多酚中安石榴苷的大鼠在体胃吸收动力学研究
目的：研究石榴皮多酚中安石榴苷的大鼠在体胃吸收动力学特性。方法采用大鼠在体原位胃灌注模型，分别考察石榴皮多酚中安石榴苷的在体胃吸收情况，采用 HPLC 法测定胃灌注液中药量的变化，并计算胃内药物吸收率。结果石榴皮多酚精制物低浓度（190．55μg／mL）、高 浓度（527．40μg／mL）及 安 石 榴 苷 低 浓度（80．03μg／mL）、高浓度（221．50μg／mL）在体胃每小时平均吸收率分别为（11．68±5．15）％、（11．82±2．41）％、（11．80±1．24）％、（13．02±4．22）％（n ＝3）。结论安石榴苷在胃部吸收较差，石榴皮多酚精制物中的其他成分对安石榴苷的胃吸收无影响。
-
安石榴苷平衡溶解度与油水分配系数的测定
目的 考察安石榴苷在不同pH值磷酸盐缓冲液中的平衡溶解度(S)和油水分配系数(PO/W),为其制剂开发提供参考.方法 采用摇瓶-紫外分光光度法测定安石榴苷在不同温度(25℃、37℃)、pH为1.2、2.5、5.0、5.8、6.8、7.4、7.8～8.0的磷酸盐缓冲液中的S值和在正辛醇-缓冲液中的PO/W值.结果 在pH为1.2～8.0条件下,安石榴苷在25℃时的S值和lgPO/W分别为775.00～2 789.00 mg/mL和-3.07～-3.85,在37℃时的S值和lgPO/W分别为1 006.00～2 684.00 mg/mL和-1.32～-3.81;在pH 1.2～8.0范围,均有lgPO/W＜0,pH为1.2时,安石榴苷的S值较低.结论 安石榴苷水溶性较好,亲脂性差,在胃内的溶解性不好,表明透膜性差是影响胃肠道吸收的限速因素.
