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虎杖苷对脓毒血症肾损伤大鼠的肾小球血管内皮的保护作用
目的 研究虎杖苷对脓毒血症肾损伤大鼠肾小球血管内皮保护作用及磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)和西罗莫司靶点(mTOR)在其过程中的活性.方法 在大鼠尾静脉注射脂多糖建立脓毒血症模型.按照体重将大鼠随机分为4组:假手术组(实施麻醉、置管),模型组(实施麻醉、置管及脓毒血症),对照组(实施麻醉、置管、脓毒血症及应用0.9％ NaC1复苏),实验组(实施麻醉、置管、脓毒血症及应用0.9％ NaCl+虎杖苷10 kU·kg-1).测定心率和肾功能的指标,用酶联免疫吸附法检测每组AMPK和mTOR蛋白活化情况.结果 给药后6h,实验组、对照组、模型组的心率(次/分)分别为88.21±17,102.36±12.83,118.04±16.51;这3组的尿素氮分别为(49.77±9.67),(77.92±12.01),(122.19±12.87)mg·dL-1,与对照组和模型组相比,差异均有统计学意义(均P＜O.05).实验组与模型组的AMPK分别为3.06±1.34,0.77±0.21;这2组的mTOR蛋白活性分别为2.48±1.12,3.95±1.02,与模型组比较,实验组差异均有统计学意义(均P ＜0.05).结论 虎杖苷能够对脓毒血症肾损伤肾小球血管内皮起保护作用,这可能通过AMPK途径抑制mTOR的活性,发挥其保护肾的作用.
关键词： 虎杖苷 脓毒血症 内皮细胞 磷酸腺苷活化蛋白激酶 西罗莫司靶点 -
Sestrin2抗氧化应激作用在缺血再灌注中的研究进展
Sestrin2是一种高保守、应激诱导抑制雷帕霉素靶蛋白的重要蛋白分子.作为P53调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路抗氧化应激作用的一种重要蛋白分子,Sestrin2可以激活磷酸腺苷依赖蛋白激酶蛋白并磷酸化结节性硬化复合物,进而抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,可减轻组织因缺血再灌注导致的损伤.近几年,国内外对Sestrin2蛋白分子的研究已有很大的进展,本文就近几年Sestrin2抗氧化应激作用研究进展以及其可能的临床应用进行综述.
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抑制AMPK激活对脑缺血小鼠行为学和脑梗死体积的影响
目的：探讨抑制磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）激活对脑缺血小鼠行为和脑梗死体积的影响。方法：选取雄性昆明小鼠66只，随机分为假手术组、盐水对照组及药物干预组，每组22只。药物干预组在缺血时腹腔注射AMPK特异性抑制剂Compound C（20 mg/kg），采用线栓法制作大脑中动脉栓塞/再灌注模型，盐水对照组在相同时间给予等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射，假手术组不给予任何药物。再灌注24 h后对小鼠进行神经功能评分，TTC染色观察脑梗死体积，Westem-Blot法检测缺血侧大脑中pAMPK蛋白表达。结果：假手术组无神经功能缺损和脑梗死灶，脑组织有少量pAMPK蛋白表达，包括皮质（0.700±0.197）和海马（0.690±0.228）；脑缺血再灌注损伤后，盐水对照组小鼠神经功能评分（2.63±0.52）分，脑梗死体积（49.57±9.71）%，缺血侧脑组织pAMPK蛋白包括皮质（1.410±0.322）和海马（1.510±0.418），均较假手术组增高（P<0.05）；药物干预组神经功能评分（1.88±0.64）分，脑梗死体积（24.07±7.74）%，缺血侧脑组织中pAMPK蛋白包括皮质（0.930±0.229）和海马（0.960±0.378），均较盐水对照组降低（P<0.05）。结论：小鼠脑缺血再灌注损伤后，缺血侧脑组织中AMPK被激活，抑制AMPK激活具有神经保护作用。
关键词： 脑缺血再灌注损伤 磷酸腺苷活化蛋白激酶 神经保护 -
基于mTOR信号通路探讨中医药干预冠心病研究进展
雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路具有调控细胞生长、自噬、增殖和凋亡等生物学功能,在肿瘤、心脑血管疾病中发挥着重要作用.近年来mTOR信号通路的磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/mTOR和蛋白激酶B(Akt) /mTOR通路日益受到重视.基于2条通路与冠心病关系及中医药的干预作用进行综述.
关键词： 磷酸腺苷活化蛋白激酶 蛋白激酶B 雷帕霉素靶蛋白 冠心病 中医药 -
糖尿病肾病与自噬相关信号通路关系的研究进展
糖尿病肾病(DN)是与糖代谢异常有关的慢性肾脏微血管并发症,是引起慢性肾病和终末期肾衰竭(ESRD)的一个主要因素,同时也是Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病病人的主要死因之一.目前关于DN的具体发病机制尚未清楚.自噬是普遍存在于真核生物体内的一种生命现象,主要通过降解和循环利用细胞内的蛋白质以及去除受损的细胞器来维持细胞内环境稳态,近来越来越多的研究表明自噬在DN的发生发展过程中起到重要作用,本文将从自噬相关信号通路与DN发生发展的角度进行探讨.
关键词： 糖尿病肾病 细胞自噬 磷酸腺苷活化蛋白激酶 雷帕霉素靶蛋白 SIRT1 -
抑制磷酸腺苷活化蛋白激酶活性对小鼠脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响机制研究
目的 探讨抑制磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性对小鼠脑缺血再灌注损伤后神经元的保护作用机制.方法 54只雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组、缺血再灌注治疗组,每组18只.后2组采用线栓法建立小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血再灌注治疗组在插入线栓时腹腔注射AMPK抑制剂Compound C,假手术组及缺血再灌注组相同时间予腹腔注射等量生理盐水.应用HE染色观察3组小鼠缺血再灌注后组织病理学变化;应用免疫组化染色法、TUNEL染色法观察脑缺血再灌注损伤24 h后细胞色素C(CytC)的表达及神经元凋亡情况.结果 与缺血再灌注组比较,缺血再灌注治疗组小鼠皮质及海马CA1区组织病理学损伤减轻,CytC阳性细胞数分别为(28.86±9.65)个/视野、(13.33±2.75)个/视野,差异均有统计学意义(P＜0.05);TUNEL阳性细胞数亦显著减少.结论 抑制AMPK活性能够减轻脑缺血再灌注损伤,推测机制为通过抑制Cyt C表达减少神经元凋亡.
关键词： 脑缺血再灌注 细胞色素C 细胞凋亡 磷酸腺苷活化蛋白激酶 -
抑制AMPK活性对小鼠脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响
目的 探讨抑制磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性对小鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能评分、脑梗死体积及神经元凋亡的影响. 方法 72只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组、缺血再灌注治疗组,每组24只.后两组采用线栓法建立小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,其中缺血再灌注治疗组在插入线栓时腹腔注射AMPK抑制剂Compound C,缺血再灌注组于同等时间给予等量生理盐水腹腔注射.在小鼠脑缺血再灌注损伤后24 h,采用Longa法测定各组大鼠神经功能缺损评分,采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色测量脑梗死体积,采用TUNEL染色法观察神经元凋亡情况. 结果 与缺血再灌注组相比[(2.10±0.24)分;43.10％±11.50％;皮质:(81.00±12.21)个/视野,海马:(56.00±5.29)个/视野]相比,缺血再灌注治疗组神经功能缺损评分[(1.58±0.22)分]、脑梗死体积(24.84％±12.53％)及神经元凋亡数量[皮质:(58.86±9.65)个/视野,海马:(43.33±3.79)个/视野]均明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 抑制AMPK活性能减少小鼠脑缺血再灌注损伤后的神经元凋亡,具有神经保护作用.
关键词： 脑缺血再灌注 磷酸腺苷活化蛋白激酶 神经元凋亡 神经保护 -
二氢山奈酚衍生物调控AMPK/PGC-1α通路抑制棕榈酸诱导的C2C12成肌分化细胞脂质沉积
目的 探讨4种二氢山奈酚衍生物对C2C12成肌分化细胞(C2C12-MD细胞)脂质沉积的影响及相关分子机制.方法 小鼠C2C12成肌细胞分化为肌管后,分成正常对照组、棕榈酸(palmiticacid,PA)处理组,PA+二氢山奈酚衍生物(山奈酚、二氢杨梅素、杨梅素、槲皮素)干预处理组(n=3),采用油红O染色和甘油三酯(triglyceride,TG)测定法评价脂质沉积情况,2-NBDG荧光法检测葡萄糖摄取能力,Western blot检测AMPK、p-AMPK和过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α(peroxisomeproliferator activator receptor gamma coactivator-1 alpha,PGC-1α)蛋白水平.结果 PA处理的C2C12肌管有大量脂质沉积,TG含量明显增加,胰岛素刺激下的葡萄糖摄取能力显著下降,p-AMPK、PGC-1α蛋白水平明显降低(P＜0.05).山奈酚干预对PA诱导的上述指标变化无明显影响,但另外3种衍生物干预均能显著抑制PA诱导的上述指标变化,其中二氢杨梅素效果更明显(P＜0.05).此外,AMPK抑制剂(compound C,CC)可明显逆转二氢杨梅素的抑制效应(P＜0.05).结论 3种二氢山奈酚衍生物二氢杨梅素、杨梅素和槲皮素可通过调控AMPK/PGC-1α通路抑制棕榈酸诱导的C2C12-MD细胞脂质沉积,继而改善胰岛素抵抗.
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二氢杨梅素激活磷酸腺苷活化蛋白激酶抑制高糖诱导的血管内皮细胞凋亡
目的 探讨二氢杨梅素对高糖诱导血管内皮细胞凋亡的影响及其与磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的关系.方法 体外培养原代人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),分为正常对照组(5.56 mmoL/L葡萄糖)、高糖处理组(33.36 mmol/L葡萄糖)、甘露醇高渗对照组(5.56 mmol/L葡萄糖+27.8 mmol/L甘露醇)、AMPK激动剂5-氨基咪唑4-甲酰胺-1-β-D-呋喃核糖苷(5-Aminoimidazole-4-carboxamide-1-β-D-ribofuranoside,AICAR)(10 nmol/L)+高糖处理组、二氢杨梅素(1μmol/L)+高糖处理组、AMPK抑制剂compound C(5 mmol/L) +AICAR+高糖处理组和AMPK抑制剂compound C(5 mmol/L)+二氢杨梅素+高糖处理组.处理36 h后,CCK-8法检测细胞增殖活力,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测AMPK、p-AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACC)和p-ACC蛋白水平.结果 与正常对照组比较,高糖处理组细胞活力明显降低(P＜0.05),细胞凋亡率显著增加(P＜0.05),p-AMPK、p-ACC水平显著降低(P＜0.05);二氢杨梅素或AICAR预处理均明显抑制高糖诱导的HUVECs细胞活力下降、细胞凋亡增加和p-AMPK、p-ACC水平降低(P＜0.05);Compound C预处理明显抑制AICAR和二氢杨梅素对高糖诱导HUVECs细胞凋亡的保护作用(P＜0.05).结论 二氢杨梅素通过促进AMPK活化抑制高糖诱导的血管内皮细胞凋亡.
关键词： 二氢杨梅素 磷酸腺苷活化蛋白激酶 高糖 血管内皮细胞 细胞凋亡 -
安石榴苷减轻心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制研究
目的 探讨安石榴甙(PUN)预先处理对心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用及其机制.方法 选取成年雄性SD大鼠,PUN 30 mg/(kg·d)生理盐水灌胃7d后,建立心肌缺血再灌注(MI/R)模型.采用右侧颈总动脉插管检测心脏功能,用伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑(TTC)双染检测心梗面积,测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性反映心肌损伤,原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,比色法检测心肌丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,蛋白免疫印迹检测磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)表达及磷酸化.结果 PUN预先处理可改善MI/R后的心脏功能,减少心梗面积和心肌细胞凋亡,降低CK-MB和LDH的活性,降低心肌氧化应激,增加AMPK磷酸化(均P＜0.05或P＜0.01),而使用AMPK抑制剂(compound c)可阻断PUN对MI/R的保护作用(P＜0.05或P＜0.01).结论 PUN预先处理可减轻MI/RI,其机制可能与其激活AMPK有关.
关键词： 安石榴苷 心肌缺血/再灌注损伤 氧化应激 细胞凋亡 磷酸腺苷活化蛋白激酶
