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仙鹤草水提物对HepG2细胞凋亡的影响
目的 研究仙鹤草水提液对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制.方法 将细胞分为6组:空白组、对照组、仙鹤草水提液-C、-D、-E、-F组.空白组加入正常培养液0.1 mL,对照组加入质量浓度为 50 μg· mL-1的5-FU培养液0.1 mL,仙鹤草水提液-C、-D、-E、-F组别加入含不同浓度(1.00,0.75,0.50,0.25 mg· mL-1)仙鹤草水提液的培养液0.1 mL.以噻唑蓝法检测不同药物浓度与不同作用时间对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用;以流式细胞仪检测细胞凋亡率;以实时定量-聚合酶链反应和免疫印迹法检测Bax mRNA表达水平和Caspase-3蛋白的表达水平.结果 在48 h,空白组、对照组与仙鹤草水提液-C、-D、-E、-F组对HepG2的生长的抑制率分别为0,22.10%,71.10%,67.88%,47.19%和27.35%,这5个给药组与空白组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);且仙鹤草水提液对HepG2细胞的抑制作用呈剂量、时间依赖性.空白组与仙鹤草水提液-C、-D、-E组的Bax mRNA表达量分别为1.00 ±0.00,2.53 ±0.13,4.95 ±0.11 和3.39 ±0.17,仙鹤草水提液-C、-D、-E 组与空白组相比,差异均有统计学意义( P ＜0.05, P＜0.01);空白组、对照组与仙鹤草水提液-C、-E组的Caspase-3蛋白表达水平分别为0.72 ±0.00,1.06 ±0.02,1.02 ±0.11 和0.88 ±0.07,对照组和仙鹤草水提液-C、-E组与空白组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01).空白组和仙鹤草水提液-C组的人肝癌 HepG2细胞凋亡率分别为0.2%和24.3%,仙鹤草水提液-C组与空白组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 仙鹤草水提液能显著促进HepG2凋亡,抑制其增殖,可通过上调线粒体凋亡通路Bax基因和Caspase-3蛋白表达诱导细胞凋亡,其抗肿瘤作用可能与线粒体凋亡途径有关.
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仙鹤草水提液对肺癌A549细胞增殖的抑制作用
目的:探讨不同浓度的仙鹤草水提液对体外培养的人肺癌细胞系A549 细胞增殖及凋亡的影响.方法:采用不同浓度的仙鹤草水提液分别作用于体外培养的人肺癌细胞A549细胞株24、48、72h后,MTT法观察药物对肺癌A549细胞生长的抑制效应;作用于细胞48h后倒置显微镜观察细胞形态学的改变;应用AO/EB荧光染色法,观察不同浓度仙鹤草水提液对细胞凋亡的影响;Annexin V/PI双染流式细胞仪检测经药物作用后A549细胞凋亡情况.结果:仙鹤草水提液可剂量依赖性地抑制A549细胞的增殖,以48h的增殖抑制作用好;通过倒置显微镜可明显观察到细胞的形态学改变;细胞荧光染色出现了明显的凋亡细胞,表现为细胞皱缩、核染色质浓缩、核碎裂等凋亡特征性的形态学改变;流式细胞仪检测结果显示,仙鹤草水提液可明显诱导细胞凋亡.结论:仙鹤草水提液可对人肺癌细胞系A549 细胞具有显著的体外增殖抑制作用,其主要作用可能与诱导细胞凋亡有关.
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仙鹤草水提液对多种肺癌细胞的增殖抑制作用实验研究
目的 研究仙鹤草水提液对多种肺癌细胞(HCC827、H358、H1650、H1299)的增殖抑制作用.方法 采用SRB法检测不同浓度仙鹤草水提液(0.4、0.8、1.6和3.2mg/mL)分别作用24、48、72h对4种肺癌细胞株的抑制率的影响,并检测仙鹤草水提液与顺铂不同浓度联合作用72h对H1299的抑制率.结果 仙鹤草水提液对4种肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用.作用72h,3.2mg/mL仙鹤草水提液对HCC827、H358、H1650的增殖抑制率与5μmol/L的顺铂比较差异无统计学意义(P＞0.05);3.2mg/mL仙鹤草水提液对H1299的抑制效果明显优于5μmol/L顺铂(84.74％比34.47％,P＜0.05).0.5μmol/L顺铂与四个梯度浓度(0.4、0.8、1.6、3.2mg/mL)的仙鹤草水提液对肺癌细胞H1299的抑制作用逐渐增加;与0.8mg/mL仙鹤草水提液联合用药对H1299的抑制作用(32.24％)低于单用该浓度的仙鹤草水提液(35.47％),高于单用该浓度的顺铂(12.81％);其他组合抑制作用均高于单用该浓度的仙鹤草水提液或顺铂,其中0.5μmol/L顺铂和3.2mg/mL仙鹤草水提液联合用药对肺癌细胞的增殖抑制作用强,抑制率达到92.49％.1.6mg/mL的仙鹤草水提液与四个梯度浓度(0.5、1、2.5、5μmol/L)的顺铂联合用药对肺癌细胞的增殖抑制作用均明显强于单用该浓度的仙鹤草水提液或顺铂,其中5μmol/L顺铂和1.6mg/mL仙鹤草水提液联合用药抑制率达到91.77％.结论 仙鹤草水提液对肺癌细胞有显著的体外增殖抑制作用,联合顺铂用药产生协同作用,抑制作用强于单独用药.
