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人类白细胞抗原抗体在非血缘脐血移植中的作用
随着非血缘脐血移植(UC BT)在临床越来越多的应用,以及相关检测技术的发展,患者体内的脐血人类白细胞抗原(HLA)抗体对UCBT疗效的影响受到广泛关注.笔者拟就近年关于HLA抗体,尤其是供者特异性HLA抗体(DSA)对UCBT影响的研究进行综述.
关键词： 脐血干细胞移植 HLA抗原 HLA抗体 供者特异性HLA抗体 -
中国南方汉族造血干细胞捐献者HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1高分辨等位基因多态性分析
目的 探讨中国南方汉族造血干细胞捐献者人类白细胞抗原(HLA)-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点高分辨等位基因的多态性分布.方法 选择2016年1月至2017年12月于中国造血干细胞捐献者资料库(CMDP)深圳分库登记的4 262例中国南方汉族造血干细胞捐献者为研究对象.采用PCR-序列特异性寡核苷酸探针(SSO)和二代测序(NGS)技术对本研究4 262例造血干细胞捐献者的HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点进行高分辨等位基因分型检测.采用直接计数法分别计算上述5个HLA位点的常见、确认及罕见等位基因频率.采用x2检验判断研究对象的HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1各位点等位基因的分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律.结果 ①本研究4 262例中国南方汉族造血干细胞捐献者的HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点等位基因观察值与期望值分别比较,差异均无统计学意义(x2 =295.068、572.482、355.205、362.584、312.150,P＞0.05).本研究4 262例造血干细胞捐献者的HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律.②本研究4 262例中国南方汉族造血干细胞捐献者中,检出的HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点的等位基因分别为49、97、37、48和22种,其中等位基因频率＞0.05的常见等位基因包括:HLA-A* 11∶01、24∶02、02∶07、02∶01、33∶03和02∶03,累计等位基因频率为0.767 1;HLA-B* 40∶01、46∶01、58∶01、13∶01和51∶01,累计等位基因频率为0.471 6;HLA-C* 01∶02、07∶02、03∶04、08∶01、03∶02、06∶02和03∶03,累计等位基因频率为0.782 5;HLA-DRB1* 09∶01、15∶01、12∶02、07∶01、08∶03、03∶01、11∶01和04∶05,累计等位基因频率为0.656 4;以及HLA-DQB1* 03∶01、03∶03、06∶01、05∶02、03∶02、02∶01、05∶03、06∶02和02∶02,累计等位基因频率为0.877 6.③本研究4 262例中国南方汉族造血干细胞捐献者中,HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点的确认及罕见等位基因分别检出22、42、14、11和7种,其中HLA-A* 29∶03,HLA-B* 18∶04、15∶296和54∶03,HLA-C* 12∶12、HLA-DRB1* 04∶101,以及HLA-DQB1*02∶10为罕见等位基因,目前尚未被收录于CMDP的《常见及确认等位基因表(CWD)》2.3版本.结论 本研究获得较为完整的中国南方汉族造血干细胞捐献者的HLA-A、-B、-C、-DRB1及-DQB1位点的高分辨等位基因多态性分布数据,记录并统计HLA确认及罕见等位基因.本研究结果有助于CMDP中HLA基因人群分布和多态性数据的积累,并且为完善CMDP的CWD提供参考依据.
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常染色体短串联重复序列基因座复合扩增等位基因丢失现象的研究
目的 探讨常染色体短串联重复序列(STR)基因座复合扩增等位基因丢失现象的特征和原因,以及亲子鉴定中STR基因座等位基因疑似突变的确认策略.方法 选择2017年1月至6月,于深圳市血液中心接受三联体亲子鉴定的3个家庭的9例家庭成员为研究对象.研究对象纳入标准:STR基因座等位基因初检结果不符合孟德尔遗传规律,疑为STR基因座等位基因丢失者.采用美国ABI公司生产的GlobalFilerTM Express试剂盒对受试者血斑片样本的21个常染色体STR基因座等位基因进行分型.采用美国Promega公司生产的PowerPlex(R) 21复合扩增系统对受试者血斑片样本的STR等位基因分型结果进行验证.采用PCR-直接测序(SBT)法,检测受试者DNA样本人类白细胞抗原(HLA)-A/-B/-C/-DR/-DQB1基因座等位基因,并且对受试者HLA基因座单倍型进行分型,作为个体识别的补充验证.本研究所遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》,并且与受试者或其监护人签订知情同意书.结果 ①本研究3个家庭的三联体亲子鉴定中,6例受试者丢失的等位基因分别发生在STR的3个基因座CSF1PO、D1S165和TH01,并且突变步数均不相同.上述丢失的等位基因,既可能为父源性,亦可能为母源性.②家庭1中,对母亲和孩子的CSF1PO基因座等位基因分型的初检结果显示,等位基因均为纯合子;验证结果显示,等位基因均为杂合子;二者的CSF1PO基因座等位基因初检结果均丢失等位基因10.③家庭2中,对父亲和孩子的D1S1656基因座等位基因分型的初检结果显示,等位基因均为纯合子;验证结果显示,等位基因均为杂合子;二者的D1S1656基因座等位基因初检结果均丢失等位基因16.④家庭3中,对母亲和孩子的TH01基因座等位基因分型的初检结果显示,等位基因均为纯合子;验证结果显示,等位基因均为杂合子;二者的TH01基因座等位基因初检结果均丢失等位基因9.⑤于3个家庭的9例受试者DNA标本中,共检出12种HLA-A/-B/-C/-DRB1/-DQB1基因座单倍型,并且HLA基因座单倍型遗传方式符合孟德尔遗传规律.结论 对于疑似存在STR等位基因突变的STR基因座复合扩增中,采取单一的检测方法,可能存在漏检等位基因的风险,采用不同试剂盒进行验证其等位基因突变的真实性,能获得更加可靠的鉴定结果.
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深圳市健康无偿献血者外周血淋巴细胞表面人类白细胞抗原-E的基因型特异性表达研究
目的 探讨深圳市无偿献血个体的外周血淋巴细胞表面人类白细胞抗原(HLA)-E表达水平,并分析HLA-E基因型与HLA表达水平的相关性.方法 采用简单随机抽样法选择2015年8月至10月于深圳市血液中心无偿献血的82例献血者作为研究对象.采用Sepmate淋巴细胞分离管分离82例献血者的外周血淋巴细胞,然后采用流式细胞技术检测淋巴细胞表面HLA-E的表达水平;同时提取研究对象的外周血的DNA,采用PCR-直接测序法(SBT)进行序列测定,判定其HLA-E基因型;并且采用方差分析和t检验的统计学方法,分析比较不同HLA-E基因型献血者外周血淋巴细胞表面HLA-E表达水平的差异.结果 本研究82例献血者中,检出的HLA-E*01∶01/*01∶01基因型频率为20.7％(17/82),HLA-E* 01∶01/* 01∶03基因型频率为41.5％(34/82),HLA-E*01∶03/*01;03基因型频率为37.8％(31/82),3种基因型献血者的外周血淋巴细胞表面HLA-E相对表达水平分别为2.57±0.66、3.32±1.33和3.77±1.26,三者比较,差异有统计学意义(F=6.062,P＜0.05).其中,HLA-E* 01∶03/* 01;03基因型献血者外周血淋巴细胞表面HLA-E相对表达量高,其次为HLA-E*01∶01/*01∶03基因型献血者,HLA-E*01∶01/* 01∶01基因型献血者外周血淋巴细胞表面HLA-E相对表达量低,并且两两比较,差异均有统计学意义(HLA-E*01∶03/*01∶03基因型与HLA-E*01∶01/* 01∶03基因型比较,t=2.402,P＜0.05;HLA-E*01∶03/*01∶03基因型与HLA-E* 01;01/*01∶01基因型比较,t=4.212,P＜0.001;HLA-E*01∶01/* 01∶03基因型与HLA-E*01∶01/*01∶01基因型比较,t=3.054,P＜0.01).结论 深圳市健康献血人群外周血淋巴细胞表面HLA-E表达水平与其基因型密切相关.
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血小板输注无效患者HLA和HPA基因型及其抗体特异性的分析
目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)和人类血小板抗原(HPA)复合抗体诱发的血小板输注无效(PTR)患者的HPA/HLA基因型及抗体特异性.方法 选择2010年1月至2012年6月,于广州血液中心行血小板(PLT)配型的PTR患者中,6例同时具有HLA-Ⅰ类抗体和HPA抗体的患者作为研究对象(本研究遵循的程序符合广州血液中心人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象的知情同意).采用酶联免疫吸附试验方法检测患者HLA抗体及PLT特异性糖蛋白(GP)抗体,应用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对患者HLA及HPA 1～17进行基因分型,根据HLA/HPA基因型和单克隆抗体特异性俘获血小板抗原实验(MAIPA)的抗体检测结果确认抗体特异性.结果 6例PTR患者的抗HLA-Ⅰ类抗体中,以抗HLA-A*2、-A* 11及-B* 40为常见;PLT特异性GP抗体以GPⅡb/Ⅲa抗体阳性为主,占83.3％(5/6);经MAIPA PLT抗体特异性分析,3例(50.0％,3/6)患者存在抗HPA-3a抗体,2例(33.3％,2/6)患者HPA-3b抗体呈阳性,仅1例(16.7％,1/6)患者的HPA-5b抗体呈阳性.结论 临床上,对存在复合抗体的疑难PTR患者进行HLA/HPA基因型及其抗体特异性分析,能避免患者HLA/HPA抗体相应的PLT抗原输注,寻找与患者HLA/HPA基因型相匹配的献血者,可提高患者的PLT输注疗效,避免血液资源的浪费.
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佛山地区血小板输注无效患者的血小板抗体分析
目的 探讨佛山地区血小板输注无效(PTR)患者血小板(PLT)抗体特异性、抗体阳性率及其相关因素,为制定PLT输注策略提供参考依据.方法 选择2012年1月至2013年8月,佛山地区5所医院收治的55例PTR患者作为研究对象(本研究遵循的程序符合各病例收集医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象的知情同意,并与之签订临床研究知情同意书).采用固相凝集法检测PTR患者血清中的PLT抗体.计算PLT同种抗体检出率和人类白细胞抗原(HLA)、人类血小板抗原(HPA)抗体阳性率,并分析年龄和输血次数对PLT抗体阳性率的影响.结果 PTR患者PLT同种抗体检出率为58.2％ (32/55),其中同种HPA抗体阳性率为21.8％ (12/55),同种HLA抗体阳性率为50.9％(28/55),抗-HLA占所有免疫性抗体的87.5％ (28/32);在检出HPA抗体的患者中有66.7％(8/12)的患者同时检出HLA抗体.PLT自身抗体阳性率为7.3％(4/55).女性患者中PLT抗体阳性率为60.61％(20/33),略高于男性的54.5％(12/22),但两者比较差异无统计学意义(x2=0.01,P＞0.05).PLT抗体阳性率随输血次数增加而呈增高趋势(x2趋势=13.14,P＜0.05),以输血次数为4～6次时增幅大.结论 佛山地区PTR患者中PLT同种抗体以HLA抗体多见,其次为HPA抗体,少数患者还存在PLT自身抗体;PLT同种抗体阳性率随输血次数增加呈增高趋势,而与患者性别无关.
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中国西藏藏族人群HLA-A/B/DRB1座位基因遗传多态性和单体型分析
目的 分析西藏藏族HLA-A/B/DRB1座位基因遗传多态性和单体型特征.方法 采用PCR-SSO Luminex流式磁珠分型方法对343名西藏藏族无关个体作HLA-A/B/DRBI座位基因分型.应用直接计数法统计基因频率和大数学预期值算法估计HLA双座位和三座位单体型频率.结果 检出HLA-A座位基因13个,A02(GF=30.47%)、A24(GF=29.74%)和A11(GF=12.83%);B座位基因24个,高频基因为B-51(GF=19.68%),B15(62)(GF=13.41%)和B40(61)(GF=12.54%);DRB1座位基因13个,高频基因为DRBl04(GF=24.49%)、DRBl08(GF=17.49%)和DRB111(GF=14.87%);与中国宁夏回族、内蒙古蒙古族和中国汉族人群相比,高频基因分布均存在差异且具统计学意义(P=0.0000).观察到HLA-A-B-DR三座位单体型247种,占单体型理论总数的32.89%;观察到HLA双座位单体型A-B、A-DR、B-DR分别为113、82、126种,占单体型理论总数的60.43%、72.57%和64.62%.All-B15(HF=0.15%,RLD=100%)、A31-B75(HF=0.15%,RLD=100%)A3-1363(HF=0.15%,RLD=100%)存在强连锁不平衡;1318-DR4 (HF=0.29%,RLD=100%),B15-DR4(HF=0.15%,RLD=100%),B75-DR15(HF=0.15%,RLD=100%)存在强连锁不平衡.结论 中国西藏藏族的HLA-A/B/DRB1座位上的等位基因无论在基因频率分布、单体型频率分布以及连锁不平衡参数都具有自己的多态性特征.
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肺癌细胞的HLA抗原表达与组织类型及免疫修饰
目的了解肺癌细胞的HLA抗原表达及肺癌的组织类型和免疫修饰对其的影响.方法采用免疫组织化学方法和流式细胞术从体内外探讨肺癌组织的HLA-DR抗原表达.结果在56例病理确诊的肺癌患者癌组织中,腺癌76%(22/29),鳞癌8%(2/24)表现为HLA-DR抗原阳性,而3例小细胞癌均为阴性.腺癌的阳性率明显高于鳞癌和小细胞癌(P<0.05).HLA-DR抗原阳性癌细胞周围可见较多的淋巴细胞浸润,二者呈明显的正相关(P<0.05).HLA-DR抗原表达与患者的临床分期间未见明显相关.体外实验证明γ-干扰素能明显刺激肺癌细胞株的HLA-DR抗原表达,并呈明显的浓度依赖.结论 HLA抗原的表达与肺癌的组织分型及局部免疫状况明显相关,可能影响宿主对肿瘤的免疫反应.
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Eales病与人类白细胞抗原-A/B、-DRB/DQB的相关性研究
目的 观察分析遵义市汉族Eales病患者人类白细胞抗原-A/B、-DRB/DQB(HLA-A/B、DRB/DQB)基因的相关性,寻找可能的易感基因及保护基因. 方法 26例临床确诊为Eales病的遵义市汉族患者作为研究组,选取与研究组患者年龄、性别、民族等因素无差异的100名健康人为对照组.抽取外周静脉血,提取DNA,采用聚合酶链式反应特异序列引物法(PCR-SSP)检测HLA-A/B,HLA-DRB/DQB等位基因频率分布,计算两组优势比(OR). 结果 Eales病患者HLA-A*01(P=0.041,OR=20.5)-A*02(P=0.00;OR=54.667;OR95%CI为11.837-252.473)、-B*55(P=0.047;OR=4.524;OR95%CI为1.200-17.047),HLA-DRB*01(P=0.048;OR=5.879;OR95%CI为1.227-28.169),DQB*05(P=0.021,OR=2.769,OR95%CI为1.145-6.692)其分布频率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),HLA-A*11(P=0.031,OR=0.383,OR95%CI为0.158-0.930)明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 Eales病可能存在遗传易感性,HLA-A*01,-A*02,-B*55,-DRB*01,-DQB*05可能是遵义市汉族Eales病患者的遗传易感基因,而HLA-A*11可能是该病的保护基因.
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Eales病与人类白细胞抗原-DRB、DQB基因位点的关联
目的分析Eales病与人类白细胞抗原(HLA)DRB和DQB基因位点的相关性,探讨Eales病可能的免疫遗传学机制.方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)检测27例北方汉族Eales病息者以及30名正常对照者HLA-DRB、DQB基因位点,用SPSS 12.0统计软件分析两组人群HLA-DRB、DQB1等位基因频率的分布特点. 结果与正常对照组比较,Eales病患者HLA-DRB1*04等位基因频率明显增高(P=0.047,OR=3.20,OR 95%可信区间为1.00～10.21),两组间其他DRB和DQB1等位基因频率的分布差异均无显著性(P＞0.05).结论中国北方汉族人群中,DRB1*04等位基因与Eales病呈正相关,可能是Eales病的遗传易感基因.Eales病患者可能因其特定的HLA遗传素质而易受致病因子攻击出现免疫功能紊乱,从而促成Eales病的发生与发展.
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利用自体的人肝癌细胞系HCC-9724诱导特异性CTL
目的:用自体的人肝癌细胞系诱导对肝癌细胞具有特异性杀伤作用的T淋巴细胞.方法:分离肝癌患者外周血淋巴细胞(PBL),在50U/ml IL-2存在下与经照射的自体肝癌细胞系共刺激,进行筛选性的混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(MLTC),直接免疫荧光法分析其细胞表型,51Cr释放试验检测效应细胞的杀伤效应.结果:淋巴细胞明显增殖,细胞变大呈豆芽状.细胞毒性实验证明该细胞对HCC-9724有特异性杀伤作用,而对K562细胞没有杀伤作用.结论:利用同体肝癌细胞系HCC-9724作为刺激细胞反复诱导肝癌患者能产生肝癌特异性的CTL.推测在刺激及培养条件适宜时,人外周血中较少的CTL前体细胞(CTLp)是可能捕捉到的.
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人类白细胞抗原HLA-B BW4表型与宫颈癌的相关性
目的:探讨人类白细胞抗原HLA-B BW4表型与宫颈癌的相关性.方法:56例宫颈癌患者为病例组,68例健康体检者为对照组,取外周静脉血提取全血DNA,并采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法扩增HLA-B BW4.结果:年轻宫颈癌组HLA-B BW4的表型频率明显低于对照组及≥35岁宫颈癌患者(P＜0.05).结论:HLA-B BW4表型缺失可能与年轻宫颈癌的发生有关.
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口腔扁平苔藓与HLA的相关性研究
目的:探讨口腔扁平苔藓与人类白细胞抗原的相关性.方法:应用微量淋巴细胞毒试验,检测19 例上海汉族人口腔扁平苔藓外周血的人类白细胞抗原(HLA-A、-B、-DR、-DQ)的抗原频率.结果:患者组HLA-DR1抗原频率(36.84%)较正常对照组(1.08%)显著增高(P<0.001).结论:HLA-DR1 与口腔扁平苔藓明显相关.带有HLA-DRl 相关基因的个体对口腔扁平苔藓具有遗传易感性.
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用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析
目的:探索应用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析. 方法:PCR扩增外显子2基因片段后,应用焦磷酸微测序技术进行实时测序和HLA-DRB基因分型. 结果:磷酸微测序反应可以判读HLA-DRB基因的多态性位点,长可判读90个核苷酸,采用特异性等位基因和PCR反应所得到的纯化DNA对血样中的杂合子进行分析,测序结果与HLA数据库基因序列比较,可准确进行HLA-DRB基因型分析. 结论:用焦磷酸微测序技术进行HLA-DRB基因型分析具有高分辨率的优点,该方法可应用于临床器官移植的供体/受体筛查.
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宫颈癌与HLA等位基因DQB1*03、DR15的相关性研究
目的: 探讨我国陕西地区宫颈癌的发生与人类白细胞抗原(HLA)-DQB1*03、DR15等位基因的相关性.方法: 采用序列特异性引物的聚合酶链式反应(PCR-SSP)方法,扩增HLA等位基因DQB1*03、DR15的目的DNA片段(分别为79、197 bp),分析两对等位基因在陕西地区宫颈癌患者和正常人中分布频率的差异.结果: 45名宫颈癌患者组中DQB1*03等位基因频率显著高于50名健康对照组,DR15等位基因频率在两组中的分布无显著差异.结论: HLA等位基因DQB1*03可能与宫颈癌的发生具有相关性,DR15可能与宫颈癌的发生不存在关联.
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HLA氨基酸残基配型标准在肾移植中的应用
目的评价HLA氨基酸残基配型新标准在肾移植中的应用. 方法应用血清学和基因分型方法对134例肾移植供受者进行HLA-Ⅰ,Ⅱ类抗原分型,并比较氨基酸残基配型标准与传统的HLA六抗原无错配标准的关系. 结果 HLA氨基酸残基配型标准可以提高肾移植供受者的相配率,六抗原无错配率可由0.75%提高到2.24%,六抗原完全错配的几率由15.67%降至2.24%. 结论 HLA氨基酸残基配型标准是一种更为实用的同种异体移植配型策略.
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乙肝疫苗接种无、弱应答与遗传因素关系
目的从现场流行病学和实验研究两方面探讨乙肝疫苗接种无、弱应答是否与遗传因素有关. 方法健康小学生634名接种3针血源性乙肝疫苗,共筛选出29名无、弱应答者,同时选择30名强应答者作为对照.对无、弱应答者和强应答者一级亲属(同胞和父母)中符合疫苗接种条件的对象接种3针乙肝疫苗,观察免疫反应.另外,从无、弱应答和强应答者中选择部分对象检测人类白细胞抗原(HLA)-A,B,C,DR,DQ座位等位基因. 结果小学生无、弱应答率为4.6%(29/634).无、弱应答者和强应答者一级亲属接种3针乙肝疫苗后,无、弱应答发生率分别为25.0%和10.0%.无、弱应答者HLA-DR7和B54频率分别为52.2%和21.7%,明显高于强应答组9.1%和0.扩展HLA单体型频率在无、弱应答者中为17.0%,而在强应答者中为0. 结论对乙肝疫苗无、弱应答与遗传因素有关.
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子宫内膜异位症sICAM-1和sHLA-Ⅰ变化及意义
目的: 探讨盆腔子宫内膜异位症(内异症)患者血清和腹腔液中可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ(sHLA-Ⅰ)的水平与该病的发病关系. 方法: 以ELISA法定量检测sICAM-1的水平、半定量检测sHLA-Ⅰ水平. 结果: 内异症组血清和腹腔液中sICAM-1和sHLA-Ⅰ水平明显高于对照组(P<0.05). 结论: sICAM-1,sHLA-Ⅰ的变化可能与盆腔内异症发病有关,对sICAM-1和sHLA-Ⅰ的研究有利于了解内异症的发病机制和分期.
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西安地区HLA-DR抗原分布特征及分型方法的比较
目的: 了解西安地区HLA-DR的分布特征,比较不同实验方法的分辨效果. 方法: 采用PCR/SSP及PCR/SSOP分型方法对西安地区4229份血样进行分型,并将结果加以比较. 结果: 西安地区HLA-DR位点基因频率较高的是DRB1*15, DRB1*09和DRB1*12,多数抗原均存在显著的地区差异. 同一人群选择不同实验方法,其分辨率效果不同. 结论: 对于HLA-DR位点抗原的检测,PCR-SSP的方法似乎优于PCR-SSOP的方法.
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氨基酸三联体方法评价11例心脏移植供受体匹配情况的结果分析
目的介绍氨基酸三联体方法在评价心脏移植供受体HLA-I类抗原配合程度中的应用,分析其与交叉反应组评价方法之间的结果差异. 方法分别用上述两种方法对11例心脏移植供受体的HLA抗原配合情况进行评价,并对两种评价结果进行分析. 结果①应用HLA抗原交叉反应组方法分析11例心脏移植供受体,其HLA抗原配合的优劣顺序为:例1=例3=例5=例6>例7=例9=例11>例2=例8>例4>例10, 例1、例3、例5、例6供受体配合好;②应用氨基酸三联体方法分析上述11例心脏移植供受体,其HLA抗原配合的优劣顺序为:例3>例5>例2>例8>例11>例7>例4>例6>例9>例10>例1,例3供受体配合好,例1差. 结论氨基酸三联体方法从分子水平提供了多个分析参数供参考,能更精确地比较供受体HLA-I抗原间的差异,可能更有利于供受体的筛选和评价.
