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复方水蛭滴眼液抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞凋亡的信号转导机制研究
目的 探讨复方水蛭滴眼液抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的信号转导机制.方法 采用牛LEC进行原代和传代培养,用H2O2诱导LEC凋亡,同时加入终浓度为1/1000的复方水蛭滴眼液共同孵育.荧光分光光度法及放射免疫法检测LEC内游离钙([Ca2+]i)、cAMP和cGMP浓度变化.结果 H2O2可明显升高LEC内[Ca2+]l和cAMP的水平,显著降低cGMP水平;加入复方水蛭滴眼液后,细胞内[Ca2+]i和cAMP浓度较H2O2组显著降低,而cGMP水平显著升高.结论 复方水蛭滴眼液抑制H2O2诱导的LEC凋亡的机制可能是通过降低LEC内[Ca2+],和cAMP的水平,阻断或抑制Ca2+-钙凋蛋白依赖性蛋白激酶途径、Ca2+-蛋白激酶C途径以及cAMP-蛋白激酶A(PKA)信号转导途径抑制LEC凋亡;同时通过升高LEC内cGMP浓度、激活cGMP-蛋白激酶C(PKC)信号转导途径抑制LEC凋亡.所以,复方水蛭滴眼液是通过多条途径抑制H2O2诱导的LEC凋亡.
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针刺对实验性脑梗死大鼠脑心组织及血液cAMP、cGMP的影响
目的探讨cAMP、cGMP在脑梗死所致心脏损伤中的变化及针刺对其的调节作用.方法利用大鼠大脑中动脉阻断模型,采用放免分析法检测大鼠造模前后不同时相脑、心组织及血液中cAMP和cGMP含量.结果模型组在造模后心、脑组织及血液中cAMP显著上升,cGMP无显著变化;针刺组cAMP较模型组显著下降,接近正常组.结论cAMP、cAMP/cGMP的升高可能是脑梗死并发心脏损伤的一个重要环节,针刺对cAMP、cAMP/cGMP具有良性调节作用.
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一氧化碳对大鼠肺动脉平滑肌细胞[Ca2+]、cAMP、cGMP的作用
目的观察低浓度一氧化碳(CO)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的作用.方法应用细胞培养,Lowry法测量蛋白质含量,Fura-2荧光指示剂测PASMC的胞内钙浓度([Ca2+]),放射免疫cAMP、cGMP药盒测cAMP、cGMP浓度.结果①缺氧组PASMC内质网扩张,胞浆内出现髓鞘样结构,线粒体肿胀、空泡化.低浓度CO组PASMC的损害减轻、仅线粒体稍肿大,部分内质网有扩张.②缺氧组PASMC[Ca2+]明显升高(P<0.01),低浓度CO组PASMC[Ca2+]接近常氧组.③缺氧组PASMC的cAMP均有升高趋势,cAMP先降后升,cGMP缓慢升高.低浓度CO组PASMC的cGMP虽比常氧组有所升高,但无明显差异(P>0.05).缺氧及复合CO作用下cAMP均呈上升趋势,和常氧组比差异显著(P<0.01).结论缺氧可能通过第二信使系统促进PASMC的增生,而低浓度CO可以抑制缺氧的作用,至少部分可能是通过[Ca2+]-cGMP系统实现的.
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L-Arginine及衰老对大鼠阴茎组织中NO、ET-1的影响
目的探讨喂养左旋精氨酸(L-Arginine)及衰老对大鼠阴茎组织中"NO-cGMP通路"及ET-1的影响及意义.方法将不同月龄(2、8、16、24月)大鼠随机分为对照组与实验组(喂养L-Arginine),进行了以下研究:①阴茎组织中一氧化氮(nitric oxide, NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量测定;②阴茎组织一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)活性变化;③阴茎组织中 ET-1 (endothelin-1)含量测定.结果①阴茎组织中NO含量先升高后降低,8月龄高,24月龄低,NOS活性变化与其一致,各月龄组间差别均非常显著(P<0.01);cGMP含量表现为显著降低(P<0.01);ET-1含量呈升高趋势,ET-1/NO比值也显著升高(P<0.01);②L-Arginine长时间喂养大鼠后,阴茎组织中NOS活性及NO、cGMP含量均显著增加(P<0.01),ET-1含量无明显改变.结论阴茎组织中cGMP含量及ET-1/NO比值可能决定着平滑肌细胞舒缩状态; L-Arginine对增强NOS活性、增加NO、cGMP含量有明显作用,表明L-Arginine有用于治疗勃功能障碍(erectile dysfunction, ED)的潜在临床价值.
关键词： 阴茎勃起 增龄 一氧化氮 cGMP L-arginine -
增龄对大鼠阴茎组织中NO-cGMP通路及性激素的影响研究
目的探讨增龄对大鼠阴茎组织中"NO-cGMP通路"及性激素的影响和意义.方法以不同月龄(2、8、16、24月)大鼠为对象,进行了以下研究:①阴茎组织中一氧化氮(Nitric oxide, NO)、环磷酸鸟苷(Cyclic Guanosine monophosphate, cGMP)含量测定;②阴茎组织一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase, NOS)活性变化;③血中睾酮(Testosterone, T)、促黄体生成素(Luleinizing hormone, LH)含量测定.结果 (随月龄增加):①阴茎组织中NO含量先升高后降低,8月龄高,24月龄低,NOS活性变化与其一致,各月龄组间差别均非常显著(P<0.001);②cGMP含量表现为显著降低(P<0.001);②血中睾酮先升高后降低,8月龄高,24月龄低,血中LH逐渐升高,各月龄组间差别均非常显著(P<0.001).结论①随龄增加睾酮的变化与NOS活性密切相关,而NO含量与NOS活性相关;②阴茎组织中cGMP含量可能决定着平滑肌细胞舒缩状态;③cGMP 不全由NO 产生,可能存在非依赖NO途径.
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冰片与川芎配伍对大鼠血浆及脑组织cAMP/cGMP的影响
观察冰片与川芎配伍对大鼠血浆及脑组织cAMP/cGMP的影响.结果显示,冰片与川芎配伍可明显增加大鼠血浆及脑组织cAMP的含量,并升高脑组织cAMP/cGMP比值,作用明显优于单用川芎或冰片.提示冰片与川芎配伍对缺血性脑组织损伤的保护作用可能是通过增加大鼠血浆及脑组织cAMP的含量,而伍用冰片后可增强川芎对脑缺血损伤的保护作用.
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珠蚌多糖的免疫调节作用研究
目的：研究珠蚌多糖的免疫调节作用。方法：用3H-TdR掺入法观察珠蚌多糖对正常小鼠和免疫低下小鼠T、B淋巴细胞转化增殖作用的影响；用放射免疫法测定珠蚌多糖对氢化可的松造模小鼠血浆Camp与cGMPiigu。结果：珠蚌多糖可增强B淋巴细胞的转化增殖作用和降低血浆Camp/Cgmp水平，促进机体免疫功能。
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大黄不同炮制品对大鼠一般状况及血浆cAMP、cGMP含量的影响
目的:研究大黄不同炮制品对大鼠一般状况及血浆cAMP、cGMP含量的影响,探讨大黄不同炮制品药性变化.方法:观察生大黄、酒大黄、熟大黄长期较大剂量灌胃对大鼠外观、体重、体温、排便情况的影响,并应用放射免疫法测定血浆cAMP、cGMP含量.结果:生大黄和酒大黄组一般状况较正常组差,体重增长缓慢,体温下降,大便稀溏,熟大黄组一般状况较好,大便质软成形.各炮制品组血浆cAMP水平降低.cGMP水平升高,cAMP/cGMP降低,生大黄和酒大黄作用明显,熟大黄作用较弱,但生大黄和酒大黄差异不显著.结论:长期较大剂量用生大黄和酒大黄灌胃会使大鼠阳气受损出现较明显的虚寒证表现,而熟大黄作用不显著.
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银丹心脑通软胶囊通过促进NO释放抑制球囊损伤所致大鼠血管内膜增生
目的 研究银丹心脑通软胶囊(YDXNT)对球囊损伤所致大鼠血管内膜增生的影响并探讨其机制.方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、YDXNT低剂量组(YDXNT-L)和YDXNT高剂量组(YDXNT-H),行颈总动脉球囊损伤造模后次日开始灌胃给药,YDXNT低、高剂量组大鼠分别给予YDXNT0.5和1.0 g/kg,每日一次;Sham组与Model组大鼠给予生理盐水,共14 d.HE染色光镜观察血管形态学变化,RT-PCR法检测其eNOS mRNA的表达,比色法检测大鼠血浆中NO含量,免疫酶联吸附试验(Elisa)检测血浆环磷酸鸟苷(cGMP)的含量.结果 YDXNT能显著减轻球囊损伤所致颈动脉管腔狭窄,并可上调血管eNOS mRNA的表达及升高血浆中NO、cGMP(P ＜0.01)含量.结论 YDXNT可抑制因球囊损伤所致大鼠的颈动脉血管内膜增生,其机制可能与YDXNT促进NO释放有关.
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检测血浆、组织cAMP及cGMP对鉴别良恶性胃病的临床价值
目的 探讨血浆、组织中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及cAMP/cGMP(CA/CG)比值的测定对鉴别良恶性胃病的临床意义.方法 对105例因胃肠道症状接受胃镜检查配合活检确诊,分为慢性胃炎组42例,溃疡病组28例,胃癌组35例.用放免法分别测定血浆、组织cAMP,cGMP和CA/CG 比值.结果 35例胃癌患者血浆及组织中cAMP,cGMP,CA/CG (±s)分别为19.14±2.52 pmol/ml,6.90±1.78 pmol/ml,3.66±2.12和459.95±103.25pmol/g湿组织,25.47±9.20pmol/g湿组织,18.36±9.70,其中cGMP,CA/CG 指标胃癌组与慢性胃炎组及溃疡病组相比差别有统计学意义(P<0.001 ),而cAMP与各组相比差别无统计学意义(P>0.05).结论 测定血浆、组织cGMP及CA/CG比值对辅助鉴别良恶性胃病有重要临床意义.
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检测血浆、胃液cAMP及cGMP对鉴别良恶性胃病的价值
目的探讨血浆、胃液中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及cAMP/cGMP(CA/CG)比值的测定对鉴别良恶性胃病的临床意义.方法对103例因胃肠道症状接受胃镜检查配合活检确诊,分为慢性胃炎组48例,溃疡病组24例,胃癌组31例.用放免法分别测定血浆、胃液cAMP、cGMP和CA/CG比值.结果31例胃癌患者血浆及胃液其cAMP,cGMP,CA/CG分别为19.12±2.55 pmol/ml,6.88±1.75 pmol/ml,3.76±2.12和2.66±0.56 pmol/L,1.13±0.52pmol/ml,3.01±1.91,其中cGMP,CA/CG指标胃癌组与慢性胃炎组及溃疡病组相比差别有统计学意义(P值均＜0.001),而cAMP与各组相比差别无统计学意义(P＞0.05).结论测定体液cGMP及CA/CG对辅助鉴别良恶性胃病有重要临床意义.
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血管钠肽对人桡动脉的舒张作用及其机制
目的:研究血管钠肽(VNP)对人桡动脉(human radial artery, HRA)的舒张作用及其机制.方法:采用离体血管灌流的方法,观察VNP对内皮完整和去内皮HRA的舒张作用,以及8-Br-cGMP、NPR-A、B选择性抑制剂HS-142-1、鸟苷酸环化酶选择性抑制剂美蓝(methylene blue, MB)和Ca2+激活K+通道(Ca2+-activated K+ channel, KCa)的选择性抑制剂TEA对这一过程的影响.结果:VNP(10-10～10-6 mol/L)可剂量依赖性地舒张HRA,该作用无内皮依赖性.8-Br-cGMP(10-7～10-3mol/L)可模拟VNP的血管舒张效应.HS-142-1(2 × 10-5 mol/L)或MB(10-5 mol/L)完全阻断VNP舒张作用.TEA(10-3 mol/L)减弱VNP的舒血管作用.结论:VNP对HRA具有不依赖内皮的舒张作用,它主要是通过作用于NPR-A、B,即钠尿肽的鸟苷酸环化酶耦联受体,升高细胞内的cGMP水平.KCa可能是其舒张作用的重要效应分子.为应用VNP防治血管移植术后的痉挛提供了重要的理论依据.
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血管钠肽抑制异丙肾上腺素对心肌细胞收缩的增强作用
目的:研究血管钠肽(VNP)对心肌细胞收缩的作用及其机制,观察HS-142-1、8-Br-cGMP和镁蓝(methylene blue,MB)对心肌细胞收缩的影响.方法:采用单心肌细胞动缘探测技术检测细胞收缩的幅度.结果:10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L Iso可剂量依赖性地引起心肌细胞收缩增强,与对照组相比较分别增强(13±3)%、(26±2)%、(60±5)%、(153±4)%和(312±7)%.此效应可被普萘洛尔(10-6mol/L)所阻断.10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L VNP可剂量依赖性地抑制Iso(10-8 mol/L)引起的心肌细胞收缩幅度的升高,与Iso(10-8mol/L)相比较分别减弱(99±3)%、(95±2)%、(84±6)%、(66±3)%和(61±3)%.8-Br-cGMP(10-7～10-3mol/L)也可剂量依赖性地抑制Iso(10-8 mol/L)引起心肌细胞收缩的增强.钠尿肽鸟苷酸环化酶(guanylate cyclase,GC)受体的特异性阻断剂HS-142-1(2×10-5mol/L)使VNP的作用几乎完全消失.MB是GC的抑制剂,10-5mol/L MB不但使VNP的作用完全消失,而且增强心肌细胞收缩的效应.VNP和HS-142-1本身对心肌细胞收缩无显著影响.而MB使心肌细胞收缩幅度升高.结论:VNP作用于心肌细胞的钠尿肽GC受体,通过升高细胞内cGMP水平发挥降低细胞收缩的作用.
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cGMP对脑缺血再灌流后海马区星形胶质细胞活化的作用机制研究
为了观察cGMP对海马区胶质纤维酸性蛋白合成调节的作用,本研究用钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型,进行了免疫荧光法染色.结果表明:脑缺血再灌流后海马区cGMP合成增加,多数cGMP阳性细胞为星形胶质细胞,此细胞的多数呈cGMP强阳性染色,胶质纤维酸性蛋白反应也多呈强阳性;使用鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂ODQ,则cGMP合成减少,cGMP阳性细胞多呈弱阳性,同一细胞的胶质纤维酸性蛋白反应也多呈弱阳性.本实验结果提示:cGMP可能与海马胶质纤维酸性蛋白的合成调节有关.
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短暂性前脑缺血再灌流后海马本部与齿状回cGMP反应细胞的差异
观察脑缺血再灌流后海马本部与齿状回cGMP反应细胞的差异。钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型，应用免疫荧光组织化学方法。结果表明：海马本部cGMP合成增加，cGMP主要分布于cAl区的放射层及腔隙分子层，双重免疫荧光反应证实多数cGMP阳性细胞是星形胶质细胞。齿状回与海马本部不同，较对照组增加了一些中小圆形的cGMP阳性细胞，分布在齿状回各层。本实验结果揭示，短暂性前脑缺血再灌流可增加海马本部cGMP的合成，多数cGMP阳性细胞是星形胶质细胞。意味着星形胶质细胞在脑缺血再灌流早期扮演着重要角色。
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牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉血管内皮细胞cGMP生成的影响
目的:体外研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)cGMP水平的影响.方法:用Pg ATCC 33277分别以感染复数(multiplicity of infection,MOI)1∶10、1∶50、1∶250干预HUVEC,并以未受Pg ATCC 33277干预的HUVEC作为阴性对照,分别培养4、12、36 h,在倒置显微镜下观察各组细胞形态；125I cGMP放射免疫试剂盒检测各组HUVECcGMP的水平.结果:与对照组相比,Pg ATCC 33277分别以MOI 1∶10、1∶50、1∶250干预HUVEC 4、12、36 h后,实验各组HUVEC的细胞形态未见明显改变,仍呈典型的“铺路石”状单层贴壁生长；Pg ATCC 33277 MOI1∶250时可呈时间依赖性地降低HUVEC cGMP水平,而同一时间点内,各浓度组的cGMP水平并无明显差异.结论:短时间内,Pg ATCC 33277对HUVEC的细胞形态无明显影响,但可降低HUVEC cGMP的生成,HUVECNO生物利用度下降.
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电磁脉冲对大鼠松果体及血浆中cAMP和cGMP的影响
目的观察电磁脉冲(EMP)照射大鼠后,松果体和血浆中cAMP,cGMP浓度的变化,探讨EMP对大鼠昼夜节律的影响及机制. 方法采用放免分析法检测EMP照射大鼠后松果体及血浆中cAMP和cGMP的含量. 结果照射组大鼠松果体中cAMP,cGMP和cAMP/cGMP的数值及昼夜波动幅度均有明显降低(P<0.05),且位相发生移动;血浆中cAMP,cGMP位相也发生移动. 结论 EMP照射能影响大鼠松果体和血浆中第二信使cAMP,cGMP,从而干扰松果体细胞信号转导系统,进一步影响动物的昼夜节律.
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cAMP、cGMP、IL-2、IL-6检测在过敏性鼻炎治疗中的临床意义
过敏性鼻炎是机体受到外界的某种刺激产生过敏反应而发生的一种变态反应性疾病,病因复杂且有各种细胞因子参与发病过程.
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血脉通颗粒对家兔动脉粥样硬化形成的干预作用机理研究
目的:探索血脉通颗粒对家兔颈动脉粥样硬化斑块形成的干预作用机理.方法:高脂饲料加空气干燥术形成家兔颈动脉粥样硬化模型,并给予血脉通颗粒治疗3个月后,观察各组家兔血清循环内皮细胞(CEC)、血清基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)、血清内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血浆cGMP、血管紧张素(AngⅡ)及血液黏度、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化.结果:血脉通颗粒可降低造模家兔血清CEC、MMP-1、MMP-9、MDA及ET,升高TIMP-1、cGMP、AngⅡ、SOD及NO水平,改善造模家兔血液流变学指标.结论:血脉通颗粒可通过干预高血脂对血管内皮细胞的损伤、抑制血清MMP-1和MMP-9活性、干预高脂饲料喂食所造成血浆cGMP和AngⅡ水平下降、抗氧化及改变血液流变学等多途径、多环节、多靶点地干预颈动脉斑块形成.
