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白藜芦醇的雌激素作用研究
目的 探索反式白藜芦醇经口摄入后,在体内的雌激素作用和剂量-反应关系.方法选用19日龄未成年大鼠做子宫增重试验,分别经灌胃给予0.1、0.3、0.6和1.0 g/ks BW的白藜芦醇,以3.0μg/kg BW的雌二醇为阳性对照,并设立水和油的阴性对照组,所有剂量组连续灌胃3 d.实验结束称量子宫的湿重和干重,对卵巢、子宫和阴道进行组织病理学检查,并测量子宫内膜上皮细胞高度.结果和对照组比较,白藜芦醇对子宫重量无影响;组织病理学结果显示,1.0 g/ks BW白藜芦醇剂量组的子宫轻度增生,0.3、0.6和1.0 g/ks BW白藜芦醇剂量组的阴道轻度增生.无剂量-反应关系;受试物纽子宫内膜上皮细胞高度无明显变化.结论白藜芦醇经口摄入时雌激素作用较弱,且无剂量-反应关系.
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白藜芦醇对大鼠缺氧心肌细胞凋亡的保护作用及对SIRT1表达的影响
目的 研究白藜芦醇(Res)对大鼠缺氧心肌细胞凋亡的保护作用,以及对SIRT1表达的影响.方法 选择褐鼠心肌细胞株H9c2培养48 h后随机分为5组:Res干预组,Res对照组,尼克酰胺(Nam)干预组,Nam对照组和正常对照组.24 h后终止培养,RT-PCR法检测SIRT1 mRNA表达水平的变化;免疫细胞化学法和Western blot法检测SIRT1蛋白表达水平的变化;TUNEL法及流式细胞仪PI染色法分析细胞凋亡.结果 与Res对照组比较,Res干预组SIRT1 mRNA表达水平升高,蛋白表达增加;与Nam对照组比较,Nam干预组SIRT1 mRNA水平与蛋白表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与Res对照组比较,Res干预组细胞凋亡率降低,与Nam对照组比较,Nam干预组细胞凋亡率升高(P<0.01),正常对照组细胞凋亡率低.结论 Res能减少缺氧诱导的心肌细胞凋亡,可能是通过上调SIRT1的表达发挥作用.
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白藜芦醇对心肌微血管内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用
目的 观察白藜芦醇对缺血再灌注损伤心肌微血管内皮细胞(cardiac microvaacular endothelial cells,CMECs)的保护作用.方法 培养大鼠CMECs,模拟缺血再灌注损伤,随机分为对照组、缺血再灌注组及白藜芦醇组,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞活性;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测CMECs凋亡率;酶联免疫吸附法检测半胱天冬酶3(caspase-3)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与对照组比较,缺血再灌注组和白藜芦醇组吸光度值明显降低(P<0.01),CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量、SOD活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与缺血再灌注组比较,白藜芦醇组吸光度值、SOD活性明显升高[(0.47±0.06)vs(0.14±0.04),(28.9±2.9)μU/Lvs(22.4±2.2)μU/L,P<0.01];CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量明显降低,差异有统计学意义[(15.6±0.4)%vs(38.6±0.6)%,(152.1±13.3)vs(307.2±25.3),(9.2±0.7)μmol/L vs(13.5±1.2)μmol/L,P<0.01].结论 白藜芦醇可减轻CMECs的缺血再灌注损伤,这种保护作用可能是通过抗氧化和抗凋亡来实现.
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白藜芦醇抑制大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌增殖
目的 研究白藜芦醇对大鼠颈动脉内膜球囊损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响.方法 72只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、损伤组和干预组,每组各24只.干预组于手术前1周及术后给予白藜芦醇50 mg/kg灌胃,余两组用等量生理盐水灌胃.术后1、7和14天观察大鼠颈总动脉形态学变化并进行图像分析;免疫组织化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,RT-PCR检测血管平滑肌中妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的表达.结果 与假手术组比较,损伤组和干预组7、14天管腔面积明显减小.与损伤组比较,干预组7、14天管腔面积明显扩大(P<0.01),内膜面积/中膜面积明显减小(P<0.01);干预组7、14天PCNA,PAPP-A表达较损伤组明显降低(P<0.01).结论 白藜芦醇可能是通过抑制血管内膜平滑肌细胞PAPP-A的表达,减轻大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜平滑肌的增殖,为临床白藜芦醇抗血管平滑肌增殖的治疗提供理论依据.
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白藜芦醇抑制缺氧复氧诱导心肌微血管内皮细胞凋亡的研究
目的 探讨白藜芦醇对缺氧复氧诱导心肌微血管内皮细胞(CMEC)凋亡的抑制作用及其可能的分子机制.方法 体外培养大鼠CMEC,建立缺氧复氧损伤模型,随机分为对照1组、缺氧复氧1组、缺氧复氧+白藜芦醇组(白藜芦醇1组),白藜芦醇分别选择5、10、20、30及40 μmol/L浓度,MTT法检测CMEC增殖能力.20 μmol/L白藜芦醇为适浓度,使用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002,后续实验又分为对照2组、缺氧复氧2组、缺氧复氧+白藜芦醇2组(白藜芦醇2组)、缺氧复氧+白藜芦醇+LY294002组(LY294002组).PI-AnnexinⅤ检测CMEC的凋亡;Western blot法检测细胞蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达或磷酸化水平.结果 与缺氧复氧1组比较,不同浓度白藜芦醇1组均可增加CMEC增殖能力,呈剂量依赖性,以白藜芦醇1组20 μmol/L保护作用显著(P<0.05).与白藜芦醇2组比较,LY294002组CMEC凋亡率明显升高,磷酸化Akt和Akt蛋白、HIF-1α蛋白表达明显下降(P<0.05).结论 白藜芦醇可显著抑制缺氧复氧诱导的CMEC凋亡,其机制可能与PI3K/Akt介导的HIF-1α上调相关.
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TRAIL联合白藜芦醇对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡影响的研究
目的:探讨 TRAIL 联合白藜芦醇对乳腺癌MDA-MB-231 细胞株增殖及凋亡的影响.方法:MTT 法和软琼脂集落形成实验检测细胞增殖;DAPI染色法及流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞表面DR4、DR5蛋白表达.结果:50 ng/mL TRAIL与50和100 μmol/L白藜芦醇联合作用14 d后,MDA-MB-231细胞在软琼脂中集落形成率分别为(2.49±0.08)%和(1.38±0.07)%,与相应浓度TRAIL、白藜芦醇单独应用比较及组间比较,差异有统计学意义,P<0.01.50 ng/mL TRAIL与50和100 μmol/L白藜芦醇联合作用后,对MDA-MB-231细胞增殖抑制率为(62.43±2.07)%、(87.32±1.44)%;细胞凋亡率为(53.59±1.44)%、(73.72±1.96)%,与单独应用相应浓度TRAIL、白藜芦醇比较及组间比较,差异有统计学意义,P<0.01.50、100和200 μmol/L白藜芦醇作用后,细胞膜表面DR4、DR5的荧光指数分别为1.80±0.07、2.11±0.14、2.59±0.16和2.16士0.08、2.92±0.25、3.90±0.06,与对照组(FI 值分别为1.52±0.04和1.61±0.13)比较及组间比较差异有统计学意义,P<0.05.结论:TRAIL与白藜芦醇联合可协同抑制MDA-MB-231 细胞增殖并诱导其凋亡,DR4,DR5蛋白表达的上调可能是其协同效应的机制之一.
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凋亡相关因子在白藜芦醇抑制人皮肤鳞状细胞癌裸鼠移植瘤生长中的调节作用
目的 观察白藜芦醇(Res)对人皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)A431裸鼠移植瘤生长的影响,探讨生存素(survivin)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)在此过程中的调节作用.方法 建立人皮肤鳞癌(A431)裸鼠移植瘤模型,按随机数字表法分为空白组、生理盐水阴性对照组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组、Res高、中、低剂量组,每组10只,分别予以药物干预后处死荷瘤鼠.绘制移植瘤体积生长曲线；通过终末瘤质量,计算Res的抑瘤率；采用HE染色,观察各组移植瘤组织病理形态学变化；应用原位末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡；采用Western印迹法检测Res对各组裸鼠移植瘤组织中survivin、caspase-3蛋白表达的影响.采用方差分析及Pearson相关分析对结果进行统计分析.结果 治疗结束时,(1)CTX阳性对照组、Res高、中、低剂量组、阴性对照组、空白对照组移植瘤体积分别为(1154±255)、(1002±115)、(1207±176)、(1342±211)、(1642±226)、(1564±156) mm3,瘤质量分别为(1.84±0.30)、(1.72±0.39)、(1.96±0.40)、(2.67±0.73)、(3.16±0.52)、(3.33±0.59)g,Res高、中、低剂量组瘤体积、瘤质量均低于阴性及空白对照组(均P＜0.05)；Res高、中、低剂量组抑瘤率分别为45.57％、37.97％、15.51％.(2)以上各组肿瘤组织的凋亡指数分别为36.79％±8.86％、33.15％±6.00％、18.09％±3.92％、10.53％±4.20％、3.87％±1.63％、2.73％±1.61％,Res高、中、低剂量组凋亡指数均高于阴性及空白对照组(均P＜0.05).(3)以上各组肿瘤组织中survivin蛋白相对表达量分别为0.48±0.20、0.19±0.11、0.22±0.12、0.28±0.24、0.98±0.41、0.85±0.34；caspase-3蛋白相对表达量分别为0.42±0.09、0.31±0.10、0.31±0.07、0.22±0.08、0.14±0.04、0.13±0.05,Res各组survivin蛋白的表达均低于阴性及空白对照组,caspase-3蛋白表达均高于阴性及空白对照组(均P＜0.05).(4)经Pearson相关分析,移植瘤中survivin与caspase-3蛋白表达无相关性(r=-0.279,P＞0.05).结论 Res对人皮肤鳞癌A431裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用,其机制可能与抑制肿瘤组织中survivin的表达,进而活化caspase-3,从而诱导肿瘤细胞凋亡有关.
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302 藜芦属植物化学成分和药理作用
综述了近年来国内外对藜芦属植物化学成分与药理作用的研究进展。
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白藜芦醇改善慢性心力衰竭预后的临床观察
目的观察白藜芦醇对冠心病慢性心力衰竭(CHF)预后的影响.方法将114例CHF患者随机分成治疗组(59例)、对照组(55例).所有患者均常规治疗,治疗组加用白藜芦醇4 mg,每晚1次.治疗2个月后复查血脂常规、C反应蛋白(CRP)、左室射血分数(LVEF).观察所有患者的住院次数、总日数、病死率.结果治疗组与对照组比较,治疗2个月后,血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、CRP均有不同程度的降低,LVEF则有明显提高.治疗组与对照组比,住院次数和总日数减少,但差异无统计学意义(P＞0.05);病死率明显降低,两组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论白藜芦醇治疗冠心病CHF能够改善患者的预后.
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藜芦乳膏的皮肤毒性实验研究
[目的]研究藜芦乳膏对动物皮肤的毒性作用.[方法]利用健康SD大鼠进行皮肤急性毒性试验,用健康白兔进行皮肤刺激性试验,用健康豚鼠进行皮肤过敏试验.[结果]藜芦乳膏对大鼠完整皮肤及破损皮肤均不发生急性毒性反应,对白兔完整皮肤和破损皮肤无刺激性,对豚鼠完整皮肤无致敏作用.[结论]藜芦乳膏用于预防和治疗与毛囊蠕形螨感染有关的酒渣鼻、痤疮及毛囊炎时是较安全的.
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紫檀芪对中波紫外线照射的HaCaT细胞抗氧化物酶表达及活性的影响
目的 探讨紫檀芪对HaCaT细胞急性中波紫外线(UVB)损伤的防御作用及相关机制.方法 MTS法和流式细胞仪检测不同浓度紫檀芪作用后HaCaT细胞增殖活性及凋亡与坏死率,筛选无毒性紫檀芪浓度.HaCaT细胞随机分为对照组(不做任何处理)、UVB组和2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪组及2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪+UVB组.Western印迹法检测紫檀芪和UVB处理前后HaCaT细胞内Nrf2核转位情况,定量PCR检测过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达,ELISA检测CAT和SOD活性.结果 MTS法和流式细胞仪检测结果显示,2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪对HaCaT细胞无毒性作用.对照组Nrf2胞质蛋白1.03±0.08、胞核蛋白1.04±0.11;与对照组比较,2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组Nrf2胞质蛋白和胞核蛋白均无明显变化,UVB组Nrf2胞质蛋白无明显变化,但Nrf2胞核蛋白显著增加(1.77±0.08,q=17.24,P＜0.01).与对照组及UVB组比较,2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪+UVB组Nrf2胞质蛋白浓度均显著下降(0.86±0.10、0.87±0.11、0.46±0.11,均P＜0.05),胞核蛋白浓度则显著升高(2.38±0.11、2.57±0.11、2.07±0.13,均P＜ 0.01).qPCR显示,与对照组相比,UVB照射对CAT mRNA表达有明显的抑制作用(P＜0.05),对SOD mRNA表达则无明显影响(P＞0.05),2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组CAT和SOD的表达亦均无明显变化(P＞ 0.05).然而,2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT表达的抑制(P＜0.05),并上调SOD的表达(P＜0.05).ELISA显示,UVB照射可显著降低HaCaT细胞内CAT和SOD活性(均P＜ 0.001),2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT和SOD活性的抑制作用(P＜0.05),但其活性仍明显低于对照组(P＜0.05).结论 紫檀芪可通过激活Nrf2通路,上调其下游抗氧化物酶CAT、SOD表达,防御HaCaT细胞急性UVB损伤.
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白藜芦醇及其抗肿瘤作用机制
白藜芦醇(Res)是一种天然植物补体,具有抗肿瘤活性.研究表明,它可以通过抗氧化、抑制细胞色素P450酶、抑制环氧化酶(COX)、促进肿瘤细胞凋亡和诱导肿瘤细胞分化等来发挥抗癌作用.Res不仅直接作用于肿瘤细胞,而且可提高机体细胞与体液免疫应答的水平,调节细胞因子的分泌,从而发挥抗肿瘤作用.体内研究表明,Res无明显毒副作用,是一种有效的化疗和预防药物.因此,作为一种理想的天然化疗药物,将有希望用于肿瘤临床治疗.
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白藜芦醇抗癌作用机制的研究进展
白藜芦醇存在于多种植物和食物中,研究表明,白藜芦醇具有拮抗肿瘤、抗炎、神经保护、心血管保护、抗血小板聚集、保肝利肝、植物雌激素、抗细菌真菌等多方面作用.因此就其抗癌作用研究进展进行综述.
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白藜芦醇抗病毒作用的研究进展
白藜芦醇主要存在于葡萄、花生、虎杖等植物中,是一种天然的、具有多种生物活性的物质.现介绍近年来自藜芦醇在抗病毒方面的研究进展,综述其对多种病毒具有的显著抑制作用,将其应用于临床具有十分重要的意义.
