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结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6的研究进展及应用
目前,结核病已是传染病的头号杀手.全世界近1/3的人感染Mtb,而且每年约有900万新发临床结核病患者及200~300万死亡患者.随着多耐药Mtb和HIV与Mtb双重感染的发生率增加,迫切需要研制新的疫苗和抗结核药物,以及可靠的早期诊断方法.Mtb早期分泌抗原靶6(6 kDa early secreted antigenic target protein,ESAT-6)是结核病疫苗和结核病诊断试剂的候选蛋白质之一.现对ES-AT-6的基础研究概况及应用综述如下.
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食源性吸虫免疫学诊断研究进展
寄生肝脏、肺及肠道的食源性吸虫可引起多种吸虫病,文中仅介绍了华支睾吸虫、片形吸虫属、后睾吸虫属、并殖吸虫属、棘口吸虫属等常见食源性吸虫当前免疫学诊断技术的研究进展.这些技术主要利用分泌抗原、重组抗原、寄主抗体,通过酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫荧光、免疫组织化学、蛋白质组学及侧向流动检测系统等进行诊断,综合应用上述方法有利于提高诊断率及精确率.
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两种结核分枝杆菌分泌抗原的基因克隆及表达鉴定
对结核病的诊断目前主要依据细菌学检查与PPD,而以抗原抗体为基础的便捷的血清学方法目前尚不成熟.常用的以PPD为抗原的ELISA检测法不够简便、快速,灵敏性和特异性也较差,且卡介苗(BCG)接种后,可使个体PPD反应呈阳性,从而削弱其诊断结核分枝杆菌感染的价值.
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田鼠巴贝西虫截短型分泌抗原1的原核表达与抗原性鉴定
目的 对田鼠巴贝西虫(Babesia microti)的诊断抗原分泌抗原1(Babesia microti secreted antigen 1,BmSA1)的截短部分(tBmSA1)进行克隆构建、原核表达与纯化,并对重组tBmSA1进行质谱鉴定以及抗原性鉴定.方法 通过PCR扩增截短型tBmSA1基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21 (DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组tBmSA1,使用AKTA进行镍亲和层析纯化,并对纯化的重组tBmSA1进行质谱分析,通过Western Blot和ELISA鉴定重组tBmSA1的抗原性.结果 成功构建了重组质粒pET-30a(+)-tBmSA1,重组tBmSA1得到高效表达和纯化,质谱分析验证了其正确性,Western Blot和ELISA结果显示其具有较好的抗原性.结论 实现了田鼠巴贝西虫tBmSA1的原核高效表达,并验证了其诊断价值,为田鼠巴贝西虫感染诊断奠定了基础.