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结核分枝杆菌肝素结合血凝素在肺结核及肺外结核中的免疫作用研究
目的 探讨结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素(heparin-binding hemagglutinin adhesin,HBHA)在不同结核感染状态人群中免疫反应及可能的诊断价值.方法 用天然的HBHA刺激选取阴性对照、潜伏感染者、肺结核和肺外结核患者,分离外周血单个核细胞,加入共培养,收集细胞培养上清,ELISA方法检测上清中IFN-γ的浓度,运用非参数检验的方法统计分析.结果 4组HBHA特异的IFN-γ分泌水平分别为49.5、781.9、341.8、214.4 pg/ml,潜伏感染者组远高于其他各组,HB-HA刺激后肺结核和肺外结核之间的IFN-γ分泌水平无统计学差异(U=1 901.5,P=0.448).结论 HBHA特异的IFN-γ分泌水平,有利于鉴别健康人群中的潜伏感染者,HBHA可能具有一定的免疫保护作用,尽管HBHA与肺外结核发病相关,其特异的细胞免疫在肺结核和肺外结核间无统计学差异.
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应用E7多肽/HLA-DR8四聚体监测治疗前后肺结核患者外周血多肽特异性CD4+T细胞的变化
目的 监测治疗前及治疗6个月内各时间点肺结核患者外周血E7多肽特异性CD4<'+>T细胞及总CD4<'+>T细胞的变化.方法 应用已有的果蝇S2恒定细胞株,分别表达、纯化获得2种生物素化E7/HLA_DR8(E7/HLA-DRBl*08032和E7/HLA-DRBI*0818)复合物单体,进而制备成相应四聚体,分别用2种四聚体与抗人CD4-FITC共染色,流式细胞分析检测治疗前以及规律抗结核治疗15、30、45、60、90、120、150、180 d肺结核患者外周血四聚体阳性(E7多肽特异性)CD4<'+>T细胞及总CD4<'+>T细胞,同时以健康成人对照者、非结核呼吸道感染患者外周血及脐带血作为研究对照.结果 多数病例的外周血总CD4<'+>T细胞在治疗前略低于正常水平,随着治疗开始很快升高并在短期内恢复至正常水平;但除治疗前组与脐带血差异有统计学意义(P<0.05)外,治疗前后各组之间,以及治疗前组与健康成人、非结核呼吸道感染者之间的差异无统计学意义(P>0.05).治疗前以及规律抗结核治疗15、30、45、60 d内肺结核患者组外周血可检出高水平的四聚体阳性CD4<'+>T细胞,与60 d后各组及3个对照组差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),2种四聚体之间的检测结果无统计学意义(P>0.05);肺结核患者外周血四聚体阳性CD4<'+>T细胞在治疗前即有较高水平,治疗15～60 d后达到高,一些患者中间有波动,以后开始逐渐降低甚至降至正常水平.结论 多肽/HLA-DR四聚体可以用于监测治疗前后结核患者外周血多肽特异性CD4<'+>T细胞的交化,配合总CD4<'+>T细胞的检测,对于治疗期结核患者疾病发展和恢复的监测具有指导意义.
关键词： 结核 肺/免疫学 CD4阳性T淋巴细胞 HLA-DR抗原 -
CD4+T淋巴细胞对肺结核患者血清白蛋白的影响
目的 探讨外周血CD4+T淋巴细胞对肺结核患者血清白蛋白的影响.方法 对119例初治肺结核患者进行淋巴细胞亚群和血清白蛋白测定,探讨细胞免疫功能与血清白蛋白相关性；同时,根据其CD4+淋巴细胞亚群水平,分为免疫低下组62例和正常组57例,探讨细胞免疫功能低下对低蛋白血症的影响.结果 (1)所有纳入患者外周血CD4+T淋巴细胞[(516.6±266.1)×109/L]与CD3+T淋巴细胞[(841.6±398.8)×109/L]、CD8+T淋巴细胞[(261.0±142.6)×109/L]、CD4+/CD8+T淋巴细胞比值(2.33±1.40)呈正相关(分别为r=0.883,P=0.000；r=0.579,P=0.000；r=0.365,P=0.000).(2)外周血CD4+T淋巴细胞与血清白蛋白呈正相关(r=0.116,P=0.033).(3)在免疫低下组中,肺部病灶范围达4个肺野以上者43例(占69.4％),明显高于正常组的22例(占38.6％),差异有统计学意义(x2=11.335,P=0.001)；免疫低下组治疗前血清白蛋白[(33.9±5.5)g/L]明显低于正常组[(36.1±5.7)g/L](t=2.187,P=0.031).结论 在肺结核患者中CD4+T淋巴细胞与治疗前血清白蛋白水平呈正相关.CD4+T淋巴细胞低下肺结核患者,其病灶范围较广,容易并发低蛋白血症.
关键词： 结核 肺/免疫学 CD4阳性T淋巴细胞 血清白蛋白 -
初治涂阳肺结核患者血清结核抗体IgG应用价值的再探讨
目的 探讨初治肺结核患者血清结核抗体(Tt-Ab)IgG检测的临床应用价值和其影响因素.方法 回顾性调查1911例初治涂阳肺结核患者血清TB-Ab IgG阳性率,并与同期涂阴患者健康人群进行对照;观察血清TB-Ab IgG阳性率与病灶范围大小,有无空洞,是否排菌及排菌量多少的关系,将所得数据作统计学处理;同时观察血清TT-Ab IgG与结核纯蛋白衍化物皮肤试验(PPD)二者之间有无相关性.结果 初治涂阳肺结核患者血清结核抗体阳性率仅53.3%,初治涂阴者为20.5%,健康人群血清结核抗体阳性率0.4%;初治涂阳患者血清TB-Ab IgG的阳性率与病灶范围大小,空洞有无及排菌量多少均有密切关系.结论 血清TB-Ab IgG检测在肺结核患者中的特异性和敏感性值得商榷,其临床应用和诊断价值有待进一步完善和提高.
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肺结核患者疗程中外周血辅助性和调节性T细胞的动态研究
目的 探讨辅助性T细胞17(Th17)和CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞与结核病的发病及抗结核治疗转归的关系.方法 纳入对象包括32例活动性肺结核患者、25例Mtb潜伏感染者、45例健康对照者.流式细胞术检测外周血Th17细胞分泌细胞因子IL-17和CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞表达强度.结果以(x-)±s表示,所有数据均使用Prism 4.0统计软件进行分析,两组间比较采用非配对t检验,多组间的比较采用ANOVA方差分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 肺结核患者组治疗前IL-17表达为(3.25±1.68)％,明显低于健康对照组[(4.62±1.46)％](F=6.633,P＜0.0001).比较活动性肺结核患者组IL-17表达在治疗前、治疗3个月[(4.17±2.27)％]、治疗6个月[(5.58±1.66)％]时的检测结果,发现治疗3个月时高于治疗前,但差异无统计学意义(F=12.244,P=0.057)；而治疗6个月时明显高于治疗前(F=12.244,P＜0.0001)和治疗3个月时(F=12.244,P=0.004).健康对照组CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞表达为(4.97±1.60)％,与Mtb潜伏感染组[(5.00±1.08)％]比较,差异无统计学意义(F=11.986,P=0.937);活动性肺结核患者组治疗前表达为(6.59±1.73)％,显著高于健康对照组及Mtb潜伏感染组(F=11.986,P＜0.0001).比较活动性肺结核患者组治疗前、治疗3个月[(8.28±2.04)％]、治疗6个月[(7.46±1.87)％]时的CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞表达,发现治疗3个月时的表达明显高于治疗前(F=6.458,P=0.001)；治疗6个月时的表达低于治疗3个月时(F=6.458,P=0.085),但差异无统计学意义；治疗6个月与治疗前的表达相比较,差异无统计学意义(F=6.458,P=0.068);治疗6个月CD4+CD25+CD127low调节性T细胞表达明显高于健康对照组(t=6.255,P＜0.0001).结论 结核病患者外周血Th17细胞明显减少,经有效抗结核治疗后,Th17细胞逐渐增加,表明Th17细胞在抗结核免疫中起保护作用.结核病患者外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞明显增多,经抗结核治疗后CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞逐渐减少,进一步说明CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞在抗结核免疫中起抑制作用.
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肺结核患者外周血Th17细胞亚群和血清IL-17A、IL-23含量检测
目的 研究肺结核(pulmonary tuberculosis,PTB)患者辅助性T细胞(T helper cell,Th)17细胞亚群及血清白细胞介素(IL)-17A、II-23含量并分析其意义.方法 收集东莞市慢性病防治院2012年6月至2013年6月确诊的活动性肺结核患者47例,其中常规抗结核药物治疗前(治疗3d以内)患者19例,常规抗结核药物治疗后(治疗28～35 d)患者28例;痰涂片检查Mtb阳性患者19例,阴性患者28例.同时选取26例与PTB患者同期于东莞市慢性病防治院体检科体检的健康志愿者为对照组.采用流式细胞术检测外周血Th17细胞亚群含量,ELISA法检测外周血血清IL-17A和IL-23含量,并分析其相关性.结果 PTB患者外周血Th17细胞亚群含量[(3.18±0.15)％]低于健康志愿者[(5.02±0.21)％](t=7.116,P＜0.001).常规化疗药物治疗前PTB患者Th17细胞亚群含量[(2.90±0.21)％]低于治疗后[(3.60±0.20)％](f=2.321,P＜0.05).痰涂片检查Mtb阳性患者外周血Th17细胞亚群[(2.51±0.20)％]低于阴性患者[(3.64±0.21)％](t=4.185,P＜0.001).PTB患者外周血血清IL-17A含量[(71.24±8.03)pg/ml]高于健康志愿者[(30.46±2.24)pg/ml](t=2.588,P＜0.05);而血清IL-23含量[(26.02±1.35)pg/ml]低于健康志愿者[(35.06±2.66)pg/ml](t=3.511,P＜0.05).常规化疗药物治疗前PTB患者血清IL-17A含量[(77.36±4.29) pg/ml]显著高于治疗后[(65.50±3.35) pg/ml](t=2.678,P＜0.05);而IL-23含量治疗前[(24.10±1.22) pg/ml]低于治疗后[(30.06±2.63) pg/ml](t=2.716,P＜0.05).痰涂片检查Mtb阳性患者血清IL-17A含量[(80.28±4.16) pg/ml]高于阴性患者[(65.32±3.37) pg/ml](f=2.678,P＜0.05);而IL-23含量阳性患者[(23.65±1.21) pg/ml]低于阴性患者[(29.75±2.35) pg/ml](t=3.143,P＜0.05).Pearson相关分析结果显示,PTB患者外周血Th17细胞亚群与血清中IL-17A和ID23含量呈正相关(r=0.324,P＜0.05;r=0.215,P＜0.05).血清中IL-17A和血清IL-23含量无显著相关性(r=0.078,P＞0.05).结论 Th17细胞亚群、IL-17A和IL-23在机体抗结核免疫过程中可能扮演不一致的作用.
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结核抗体和结核活动标记物对肺结核诊断的意义
为评估结核病抗体(PPD-IgG)和活动性结核标记物(ATM)在痰涂阴肺结核诊断上的可靠性,笔者选择确诊为活动性肺结核患者痰涂阳36例和痰涂阴42例患者,进一步检测PPD-IgG和ATM,现将检测结果报告如下.
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参芪平消胶囊对小鼠Lewis肺癌生长转移及免疫功能影响
目的:探讨参芪平消胶囊对荷瘤小鼠Lewis肺癌生长转移及免疫功能的影响.方法:建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,采用体内实验方法观察瘤重及肺表面转移灶,计算抑瘤率与抗转移率;采用放免法测定小鼠静脉血中T细胞亚群、IL-Ⅱ值.结果:参芪平消胶囊大、小剂量组抑瘤率分别为42.18%、32.65%,抗转移率分别为77.35%、53.98%,与对照组比较有显著性差异;该药能显著提升小鼠CD3、CD4、CD4/CD8与IL-Ⅱ值,与对照组、化疗组比P＜0.01.结论:参芪平消胶囊对小鼠Lewis肺癌生长转移具有抑制作用,并能提高小鼠机体免疫功能.
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活动性肺结核与潜在感染者CD8+、CD4+记忆T细胞表达水平的比较
[目的]探讨CD8+、CD4+记忆T细胞表达水平在活动性肺结核与潜伏感染者中的表达差异及其意义.[方法]本院确诊的25例活动性肺结核患者(A组)、25例肺结核潜伏感染者(B组)、30例健康人群作为健康对照组(C组),检测各组外周血CD4+记忆T细胞、CD8+记忆T细胞的表达水平,并探讨其与高分辨率CT评分(HRCT)的相关性.[结果]B组的CD4+ Tcm、CD8+ Tcm水平显著高于A组、C组(P＜0.05),A组的CD4+ Tcm、CD8+ Tcm水平显著的高于C组(P＜0.05).B组、A组的CD4+Tem、CD8+Tem水平显著的低于C组(P＜0.05),B组、A组的CD4+ Tem、CD8+ Tem水平相比差异无显著性(P＞0.05).A组患者CD4+ Tcm、CD8+ Tcm水平与HRCT评分呈显著的负相关关系(P＜0.05);A组患者CD4+Tem、CD8+ Tem水平与HRCT评分无显著的相关系(P＞0.05).[结论]CD4+、CD8+中心记忆性T细胞在活动性肺结核与潜伏感染者中水平差异显著,并且与肺结核患者病例损伤程度有关.
关键词： 结核 肺/免疫学 CD8阳性T淋巴细胞 CD4阳性T淋巴细胞 -
肺结核和肺外结核患者外周血淋巴细胞亚群及血液相关指标的变化比较
[目的]分析肺结核和肺外结核患者的免疫特点及血液指标差异.[方法]采用流式细胞术检测174例肺结核(A组),51例肺外结核(B组),100例非结核疾病组(C组)及255例健康体检者(D组)外周血CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、NK细胞、B细胞的百分比及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值并进行比较分析,同时对四组人群的血液学指标腺苷脱氨酶(ADA),C-反应蛋白(CRP)和癌胚抗原(CEA)进行检测比较.[结果]A组和B组患者的CD3+、CD4+T淋巴细胞数量百分比和CD4+/CD8+比值较C组和D组均明显降低(P<0.05);B组患者的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量百分比和CD4+/CD8+比值较A组患者明显降低(P<0.05).A组和B组患者的CD8+的T淋巴细胞数量百分比较C组和D组均明显升高(P<0.05);B患者的CD8+细胞百分比较A组患者明显升高(P<0.05).与B组患者的B淋巴细胞数量百分比较A,C组和D组明显升高(P<0.05).与A组和B组患者的NK细胞数量百分比相比较,C组和D组明显升高(P<0.05);A组和B组患者的NK细胞自然杀伤率较C组和D组明显降低(P<0.05).A和B组患者的ADA和CRP水平较C组和D组明显升高(P<0.05);B组患者的CRP水平较A组患者明显升高(P<0.05).[结论]肺结核和肺外结核患者常伴有免疫功能紊乱和血液学指标的异常,其可为临床免疫干预提供理论依据.
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难治性肺结核患者PBMCs结核分枝杆菌特异性Th1细胞因子反应低下
目的 研究难治性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)经结核分枝杆菌特异性抗原肽(ESAT-6,CFP-10)刺激后代表性Th1细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α的表达特点及意义.方法 纳入67例初治肺结核患者、28例难治性肺结核患者和25位结核分枝杆菌潜伏感染者,分离外周血单个核细胞(PBMCs),用ESAT-6,CFP-10肽库刺激PBMCs,采用FlowCytomix流式技术检测细胞培养液上清中细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-oα的浓度.结果 PBMCs经结核分枝杆菌特异性抗原肽刺激后,IFN-γ、IL-2和TNF-α均因刺激而升高,初治组的三个因子的水平均显著高于难治组和潜伏感染组(与难治组比较,Mann-Whitney U值=119.0,282.5、339.5,P均＜0.01;与潜伏感染组比较,Mann-Whitney U值=387.0,477.0、374.5,P=0.0002,0.0033、0.0001),难治组IFN-γ和IL-2的水平显著低于潜伏感染组(Mann-Whitney U值=105.5、162.5,P＜0.01),TNF-α的水平在难治组和潜伏感染组间的差异无统计学意义(Mann-Whitney U值=265.0,P=0.2695).结论 难治性肺结核患者结核分枝杆菌特异性Th1细胞因子反应低下,针对结核病的免疫治疗可能对难治性肺结核发挥更大的作用.
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非结核分枝杆菌肺病患者外周血T淋巴细胞亚群与营养状况相互关系的探讨
目的：探讨外周血CD4＋T淋巴细胞对非结核分枝杆菌（NTM）肺病患者营养状况的影响。方法：回顾性调查分析2008年1月至2012年12月期间在我院收治确诊的NTM肺病患者78例，分为细胞免疫功能低下组43例和正常组35例。探讨细胞免疫功能与营养指标相关性。结果：外周血CD4＋与CD3＋、CD8＋T淋巴细胞、CD4＋/CD8＋T淋巴细胞比值（2．03±0．87）呈正相关（P＜0．05）。与ALB、PA无相关性（P＞0．05）。细胞免疫功能低下组外周血淋巴细胞（TLC）计数明显低于对照组，合并支气管扩张例数明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：NTM患者多伴有营养不良，细胞免疫功能低下的NTM患者合并支气管扩张多见，TLC减少明显，但CD4＋T淋巴细胞与血清蛋白质（ALB＋PA）水平无必然相关性，NTM患者病变的严重程度是基础病变与细胞免疫、营养和感染等因素的共同结果。
关键词： 分枝杆菌感染 肺/免疫学 CD4阳性T淋巴细胞 营养不良 -
S-CpGODN对结核病防治作用的实验研究
目的:观察S-CpGODN对肺结核病人外周血单个核细胞Th1/Th2型免疫反应的影响.方法: 20例活动性肺结核病人和20例健康人外周血单个核细胞(PBMC)各分为4份,分别用RPMI1640,PPD,S-CpGODN,S-CpGODN+PPD培养48h.用real-time PCR检测PBMC的IFN-γmRNA、IL-10mRNA和IL-12mRNA表达.结果:S-CpGODN能促进肺结核病人PBMC表达IFN-γ mRNA,但不影响IL-10 mRNA表达;同时S-CpGODN也可促进肺结核病人PBMC表达IL-12mRNA.结论:S-CpGODN可增强结核病人低下的Th1型免疫反应,抑制结核菌抗原诱导的Th2型免疫反应.
