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一种新的DNA-DNA交联检测法--改良单细胞凝胶电泳法
DNA交联是细胞内发生的严重事件,它影响DNA的正常复制功能,从而导致突变或肿瘤.多种致癌物质和抗肿瘤药物可引起DNA-DNA交联,如砷、镍、铬、顺铂、丝裂酶素C等[1~4].因此,检测外环境因素所导致的DNA-DNA交联是判断其是否为诱变剂或致癌因素的有效手段.传统检测DNA交联物的方法是碱洗脱法,但该法昂贵、耗时、操作复杂,并涉及到同位素[5].发展新的DNA-DNA交联物检测方法实有必要.
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HBV cccDNA研究新动向
乙肝病毒感染的首要启动因素是细胞核内cccDNA的形成,cccDNA是病毒复制的模板,在病毒生命周期中起着至关重要的角色,然而由于技术原因,目前对cccDNA本身了解和复制功能仍知之甚少.
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猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究
目的研究猴免疫缺陷病毒(SIV)外膜糖蛋白(envGP)基因片段与病毒复制功能的关系。方法利用两病毒株共有的内切酶位点,将非致病性SIVmac142株envGP区的DNA片段与致病性SIVmac 239株的对应区域进行置换,构成多个重组体。RFLP和部分序列测序确定后,用等量突变病毒(3μg)转染CD4+T淋巴细胞CEM×174细胞系,用ELISA监测培养液中SIV核心蛋白P27水平的变化,以判定重组病毒的复制能力。结果与SIVmac 239株相比,SIVmac 239 envGP重组体(SIVmac 142/239envGP/142)仍保持高度的复制活性,SIVmac 239 gp41(SIVmac 142/239gp41/142)或SIVmac 239N-gp41(SIVmac 142/239N-gp41/142)的复制能力明显降低,而SIVmac 239-gp41(SIVmac 142/239C-gp41/142)重组体无复制活性。结论 envGP基因是SIVmac 239株复制能力或毒力的重要调节因素。
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肝干细胞移植治疗重症肝病
原位肝移植仍然是目前治疗重症肝病有效的措施.但是,它存在的三大缺陷阻碍着其更广泛应用:(1)供肝缺乏;(2)供体肝与受体存在免疫排斥反应,肝移植术后需长期应用免疫抑制剂,使患者免疫力下降,易患各种疾病;(3)器官移植费用昂贵,对国家、社会、个人都是一种沉重的经济负担.干细胞是一类具有自我复制功能和多分化潜能的早期未分化细胞,通过控制条件可以使其分化为肝细胞,达到修复损伤组织,恢复部分肝脏功能的目的.自体肝干细胞移植治疗重症肝病是安全和有效的,但其长期疗效仍需要观察.
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骨髓干细胞向肝样细胞分化的研究进展
骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)是一类具有自我复制功能和分化潜能的早期未分化细胞,属于成体干细胞中的一种,主要包括造血干细胞(hemopoietic stem cells,HSCs)和间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs).近年来,人们对BMSCs的多向分化潜能性有了越来越全面的认识.BMSCs可以跨越胚层横向分化为各种组织细胞(包括肝样细胞),并且具备取材方便、体外培养技术成熟以及自体移植潜能等优点,因此其有望成为生物人工肝支持系统或肝细胞移植的理想种子细胞.