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改良型痘苗病毒安卡拉株(MVA)作为递送载体在抗感染治疗中的应用
改良型痘苗病毒安卡拉株( modified vaccinia virus Ankara,MVA)是人类在寻求痘苗病毒作为天花疫苗的过程中获得的高度减毒的痘苗毒株. MVA来源于一个土耳其的痘病毒毒株(chorioallantois vaccinia virus Ankara,CVA),CVA在鸡成纤维细胞中传代570代后得到MVA[1]. 对MVA全基因序列测序后发现, MVA基因组全长178 kb,与CVA相比MVA在传代的过程中丢失了大约15%(30 kb)的病毒基因,这些基因大多与病毒的毒力和宿主选择范围密切相关[2].MVA在允许细胞(permissive cell),如BHK-21、CEF等细胞内,可以完成完整的生活周期. 而在非允许细胞( non-permis-sive cell) ,如大部分哺乳动物和人类细胞内,MVA病毒的早期和晚期蛋白都进行了表达,但是病毒不能包装成完整的粒子[3]. 与其他痘病毒一致,MVA在感染细胞后,基因组不进入细胞核,而是在细胞质中依赖自身的启动子与转录系统来完成基因的复制与表达. 传代过程中MVA丢失了6个主要的基因片段,这些部位可以用来插入25 kb以上的外源基因,并且在外源基因插入后并不影响病毒本身的感染能力和表达能力[4].
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神经蛋白质组学-神经科学研究的新方向
2001年2月人类基因组的全序列测序的完成,标志着生命科学的研究进入了后基因组时代.后基因组时代的任务就是研究基因组的功能活动,即从揭示生命的所有遗传信息转移到在整体水平上对生物功能的研究.澳大利亚Macquarie大学的M.R.Wilkins和K.L. Wiliams于1994年首次提出了"蛋白质组"(proteome)的概念.1999年
杂志将蛋白质组定义为:在一个细胞的整个生命过程中有基因组表达的以及表达后修饰的全部蛋白质.需要指出的是,蛋白质组的定义中包含了时间和空间的概念.由于蛋白质的种类和数量总是处在一个新陈代谢的动态过程中,同一细胞的不同周期,其所表达的蛋白质是不相同的,同一细胞在不同的生长条件下(正常、疾病或外界环境刺激)所表达的蛋白质也是不同的.另外,研究对象的大小和范围(细胞、组织或生物体)不同,其相应的蛋白质组也不相同.因而,蛋白质组的研究,需要对研究对象以及特定的时间和空间进行界定.因为蛋白质性质的多样性特征,催生出众多的蛋白质组分析技术,这些技术基于不同的生物、化学等方法整合而产生的.当前大多数蛋白质组研究平台的基本技术主要分为与蛋白分离技术相结合的质谱技术和蛋白芯片技术. -
猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究
目的研究猴免疫缺陷病毒(SIV)外膜糖蛋白(envGP)基因片段与病毒复制功能的关系。方法利用两病毒株共有的内切酶位点,将非致病性SIVmac142株envGP区的DNA片段与致病性SIVmac 239株的对应区域进行置换,构成多个重组体。RFLP和部分序列测序确定后,用等量突变病毒(3μg)转染CD4+T淋巴细胞CEM×174细胞系,用ELISA监测培养液中SIV核心蛋白P27水平的变化,以判定重组病毒的复制能力。结果与SIVmac 239株相比,SIVmac 239 envGP重组体(SIVmac 142/239envGP/142)仍保持高度的复制活性,SIVmac 239 gp41(SIVmac 142/239gp41/142)或SIVmac 239N-gp41(SIVmac 142/239N-gp41/142)的复制能力明显降低,而SIVmac 239-gp41(SIVmac 142/239C-gp41/142)重组体无复制活性。结论 envGP基因是SIVmac 239株复制能力或毒力的重要调节因素。
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结核疫苗研究进展
结核仍然是目前威胁人类生命健康三大传染性疾病之一,尤其是HIV/AIDS流行日趋严峻以及结核病原菌--结核分枝杆菌(TB)耐药株的不断增多,导致结核发病率和死亡率大幅度上升,结核病的预防与控制再次被提为重要日程.因此,世界各主要发达国家都加大了结核免疫与预防的再研究力度,尤其是1998年TB DNA全序列测序的完成[1],大大加速了结核致病因子、保护性抗原、全新疫苗的筛选工作,现仅就结核疫苗研制的发展动向综述如下: