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白血病抑制因子受体过表达对肺癌干细胞凋亡的影响及其机制

姜琪;任雪松;刘春华;张艳;汤秦

摘要: 目的 探讨白血病抑制因子受体(LIFR)过表达对肺癌干细胞(LCSC)凋亡的影响及其机制.方法 从肺癌患者的原发癌灶中分离培养原代肺癌细胞,用流式细胞术筛选出CD133+表型的LCSC.将包含LIFR的重组慢病毒过表达质粒及其阴性对照空载体质粒分别以病毒/细胞数量为18的比例感染LCSC,经2.0μg/mL的嘌呤霉素筛选,成功构建稳定表达LIFR的LCSC细胞株及其对照细胞株,分别作为观察组和对照组.采用实时荧光定量PCR法检测两组LIFR mRNA相对表达量,采用流式细胞术检测培养48 h时两组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测两组细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3相对表达量.结果 观察组、对照组LIFR mRNA表达量分别为8.54±1.32、1.03±0.02,细胞凋亡率分别为(35.00±5.29)%、(11.33±1.76)%,两组比较P均<0.05.与对照组比较,观察组Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白相对表达量升高(P均<0.05).结论 LIFR过表达可促进LCSC凋亡;其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax、Caspase-3蛋白表达有关.

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