Mash-1基因过表达对脑创伤后C57 BL/6成年雄性小鼠神经细胞增殖、分化及学习、记忆功能的影响
摘要： 目的 观察Mash-1基因过表达对脑创伤后C57BL/6成年雄性小鼠神经细胞增殖、分化及学习、记忆功能的影响.方法 将160只健康成年雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、单纯创伤组、阴性对照组和过表达组.利用重组腺病毒Ad5-mMash-1进行基因转染.于脑创伤前1 d和脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d采取RT-PCR检测Mash-1 mRNA水平,Western blotting检测Mash-1蛋白表达,水迷宫评价学习和记忆功能.采用免疫荧光法检测脑创伤后3d和7d神经细胞增殖情况.结果 与假手术组比较,单纯创伤组与阴性对照组脑创伤后1 d、3 d、7 d和14 d Mash-1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05～0.01),过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d和14 d Mash-1 mRNA相对表达量显著升高(均P<0.01).过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d和14 d的Mash-1 mRNA相对表达量显著高于单纯创伤组与阴性对照组(均P<0.05).与假手术组比较,单纯创伤组脑创伤后1 d、7 d、14 d,阴性对照组和过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d时Mash-1蛋白相对表达量显著升高(P<0.05～0.01),单纯创伤组脑创伤后3 d Mash-1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05).过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d的Mash-1蛋白相对表达量显著高于单纯创伤组及阴性对照组(均P<0.05).与假手术组比较,单纯创伤组脑创伤后3 d、7 d的BrdU阳性细胞数,脑创伤后3 d DCX阳性细胞数显著减少(P<0.05～0.01),过表达组显著增多(均P<0.05).过表达组脑创伤后3 d、7 d的BrdU阳性细胞数,脑创伤后3 d DCX阳性细胞数显著高于单纯创伤组(均P<0.05).单纯创伤组、阴性对照组和过表达组的脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d的逃避潜伏期差异无统计学意义(均P>0.05).与假手术组比较,单纯创伤组、阴性对照组和过表达组脑创伤后1 d、3 d、7 d、14 d的逃避潜伏期均显著延长(均P<0.05).结论 Mash-1基因过表达增加脑创伤后成年C57BL/6小鼠海马齿状回和大脑皮质的神经细胞增殖和分化,但对其学习和记忆功能无影响.
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脑对称指数与重症脑血管病患者病情及预后的关系
目的 探讨脑对称指数(BSI)与重症脑血管病患者病情及预后的关系.方法 选取有意识障碍的重症脑血管病患者48例,于发病或病情加重3 d内进行EEG监测,同时采用GCS、NIHSS以及急性生理与慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)量表评价患者的病情,其中21例患者于发病或病情加重第7 d及第14 d进行EEG重复测量.于发病3个月时采用GOS评分评估预后.结果 脑梗死及脑出血患者不同时间点BSI比较差异有统计学意义(均P<0.001).脑梗死患者7 d时的BSI显著高于3 d及14 d(均P<0.05),脑出血患者第3 d的BSI显著高于第7 d及14 d(均P<0.05).脑梗死患者7 d时患侧δ波、θ波绝对功率值及慢波指数显著低于健侧(均P<0.05),14 d时患侧α波指数、θ波绝对功率值显著低于健侧(均P<0.05).脑出血患者≤3 d时患侧δ波、θ波绝对功率值及慢波指数均显著高于健侧(均P<0.05),14 d时患侧α波指数功率值低于健侧(P<0.05).BSI与患健侧慢波指数功率差呈正相关(t=6.524,P<0.001).单因素分析显示,BSI、患健侧θ波功率差的绝对值、GCS评分、NIHSS评分、APACHEⅡ评分对患者预后有影响(均P<0.05);多因素分析显示,BSI与GCS评分对预后有影响(均P<0.05).结论 BSI可相对准确地反映重症脑血管病患者的脑功能变化,并为患者的治疗及预测预后提供指导.
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帕金森病患者黑质高回声与临床特征的关系
目的 探讨帕金森病(PD)患者黑质高回声与临床特征的关系.方法 采用经颅超声(TCS)技术检测黑质回声强度.根据回声强度将81例PD患者分为高回声组和正常回声组,并比较两组的临床资料.结果 与正常回声组比较,高回声组男性比率显著升高(P<0.05),年龄、发病年龄、病程及文化程度差异无统计学意义(均P>0.05).与正常回声组比较,高回声组患者吸烟比率显著降低,嗅觉障碍、快动眼期睡眠行为障碍(RBD)比率显著升高(P<0.05～0.01).两组间有家族史、毒物接触史、过度日间嗜睡、体位性低血压、便秘、排尿障碍、焦虑、抑郁、认知功能障碍比率及运动症状的进展和严重程度差异无统计学意义(均P>0.05).结论 不吸烟、嗅觉障碍、RBD可能与黑质高回声有关.
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β-胡萝卜素对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征大鼠学习记忆及海马区caspase-3、磷酸化tau表达的影响
目的 探讨β-胡萝卜素(β-C)对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)大鼠学习记忆及海马区caspase-3、磷酸化tau蛋白表达的影响.方法 将24只成年SD大鼠随机分为正常对照组、单纯OSAS模型组(模型组)和OSAS模型组+β-C干预组(干预组),每组8只.采用低氧舱建立OSAS大鼠动物模型.模型组及干预组小鼠于造模前给予β-C灌胃,正常组不做任何处理.造模完成后,采用Morris水迷宫检测实验大鼠的学习和记忆能力,HE染色观察大鼠海马组织的病理学改变,采用Western Blotting法检测海马组织中caspase-3、p-tau的蛋白表达变化.结果 模型组大鼠各时间点逃避潜伏期时间较正常对照组显著延长(均P<0.05);干预组第2～5 d逃避潜伏期较模型组显著缩短(均P<0.05).模型组穿越平台次数明显少于正常对照组和干预组(均P<0.05).与模型组比较,正常对照组与干预组caspase-3、p-tau蛋白表达显著降低(均P<0.05).结论 β-C可减轻OSAS所致的学习记忆能力受损,其机制可能与其抑制caspase-3、p-tau的蛋白表达有关.
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轻度认知功能障碍患者情绪记忆损害特征
目的 探讨轻度认知功能障碍(MCI)患者情绪记忆的改变.方法 采用情绪记忆神经认知心理学检查评价22例MCI患者(MCI组)及22名健康成年人(正常对照组)的情绪记忆,并采用事件诱发电位(ERPs)检测P300的潜伏期和波幅.结果 与正常对照组比较,MCI组MMSE、词汇流畅性试验、数字广度试验评分均显著降低(均P<0.01).MCI组与正常对照组正性、中性和负性情绪图片效价度差异无统计学意义(均P>0.05).与正常对照组比较,MCI组正性和负性图片再认正确率均显著降低(P<0.05～0.01),中性图片再认正确率差异无统计学意义(P>0.05).MCI组及正常对照组正性、负性与中性图片再认正确率差异有统计学意义(F=6.27,F=39.13;均P<0.05).与正常对照组比较,MCI组正性和负性图片再认反应时间差异有统计学意义(P<0.05～0.01),中性图片差异无统计学意义(P>0.05).MCI组及正常对照组正性、负性与中性图片再认反应时间差异有统计学意义(F=3.74,F=16.48;均P<0.05).MCI组与正常对照组学习阶段ERPs-P300的潜伏期、波幅差异无统计学意义(均P>0.05).与正常对照组比较,MCI组再认阶段正性和负性图片ERPs-P300潜伏期显著增加,波幅显著降低(P<0.05～0.01);中性图片潜伏期及波幅差异无统计学意义(均P>0.05).MCI组学习阶段(F=55.20,P<0.05;F=43.12,P<0.05)及再认阶段(F=29.36,P<0.05;F=19.39,P<0.05)正性、负性与中性情绪图片ERPs-P300潜伏期及波幅差异均有统计学意义;正性与负性ERPs-P300潜伏期及波幅比较差异无统计学意义(均P>0.05).正常对照组的学习阶段(F=55.66,P<0.05;F=39.33,P<0.05)及再认阶段(F=114.48,P<0.05;F=51.77,P<0.05)正性、负性与中性情绪图片ERPs-P300潜伏期及波幅差异均有统计学意义.结论 MCI患者存在情绪记忆的受损及反应时间延长,且情绪效价"正向"选择性偏向受损.
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白藜芦醇对高脂饮食诱导的认知障碍的保护作用及机制研究
目的 观察白藜芦醇(RV)对高脂饮食(HFD)诱导的认知功能障碍的影响.方法 60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、高脂喂养组(HFD组)、HFD+30 mg/kg RV组(30 mg/kg RV组),HFD+67.5 mg/kg RV组(67.5 mg/kg RV组)和HFD+135 mg/kg RV组(135 mg/kg RV组),每组10只,共干预7个月.于干预结束后,检测小鼠的体质量和血脂水平.采用Morris水迷宫和新物体识别实验评价学习记忆水平.采用ELISA检测海马区IL-1β、TNF-α、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平.采用Western boltting法检测海马区沉默信息调节因子1(SIRT1)通路表达.采用免疫荧光染色检测海马CA1区SIRT1蛋白水平.结果 (1)与HFD组比较,30 mg/kg RV组第4～6个月体质量及三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著增高(P<0.05～0.01);67.5 mg/kg RV组第4～6个月体质量及总胆固醇(TC)、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著增高(均P<0.01);135 mg/kg RV组第2～7个月体质量及TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著增高(P<0.05～0.01).与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TC、TG、LDL-C水平显著增高,HDL-C水平显著降低(均P<0.01);67.5 mg/kg RV组TC、TG水平显著增高(均P<0.05).与67.5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TC、TG、LDL-C水平显著增高,HDL-C水平显著降低(P<0.05～0.01).(2)与HFD组比较,30 mg/kg RV、67.5 mg/kg RV、135 mg/kg RV组相对识别指数(DI)、穿越平台次数、第5 d进入平台时间显著升高(P<0.05～0.01).与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组DI显著降低(P<0.01).与67.5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组DI显著降低(P<0.01).(3)与HFD组比较,30 mg/kg RV、67.5 mg/kg RV、135 mg/kg RV组TNF-α、IL-1β、MDA水平显著降低,SOD水平显著增高(P<0.05～0.01).与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TNF-α、IL-1β水平显著增高(均P<0.01).与67.5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组TNF-α、IL-1β水平显著增高(均P<0.05).(4)与HFD组比较,30 mg/kg RV、67.5 mg/kg RV、135 mg/kg RV组SIRT1水平显著升高,乙酰化p53(Ac-p53)、乙酰化核因子-κB(Ac-NF-κB)和乙酰化Forkhead转录因子(Ac-FoxO1)水平显著降低(P<0.05～0.01).与135 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组SIRT1水平显著降低,Ac-p53、FoxO1和Ac-NF-κB水平显著升高(P<0.05～0.01).与67.5 mg/kg RV组比较,30 mg/kg RV组Ac-p53水平显著升高(P<0.05).结论 RV具有浓度效应,可以减少小鼠HFD引起的认知障碍损伤,其机制可能与抑制炎症和氧化应激反应,以及促进SIRT1通路的表达有关.
关键词： 白藜芦醇 高脂饮食 认知障碍 沉默信息调节因子1通路 -
Toll样受体4及小胶质细胞在帕金森病中的作用
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)及小胶质细胞在帕金森病(PD)中的作用.方法 将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)组和TLR4抗体+MPTP组(TLR4抗体组).用腹腔注射MPTP法制作PD小鼠模型.免疫组织化学法检测TLR4及CD11b的阳性细胞表达数,RT-qPCR法检测小鼠纹状体内TLR4 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达.结果 正常对照组、MPTP组及TLR4抗体组TLR4阳性细胞及CD11b阳性小胶质细胞数量差异有统计学意义(F=331.758,F=131.856;均P<0.001).MPTP组TLR4、CD11b阳性细胞数高,对照组低,三组间两两比较差异有统计学意义(均P<0.001).正常对照组、MPTP组及TLR4抗体组小鼠中脑TLR4 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达量差异有统计学意义(F=36.385,F=299.599,F=40.191;均P<0.001).MPTP组TLR4 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达量高,对照组低,三组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05～0.01).结论 MPTP诱导的PD模型CD11b阳性细胞和炎症因子的表达明显上调,而这些上调可以通过TLR4特异性抗体部分阻断.TLR4及小胶质细胞与PD的神经炎症过程密切相关.
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孤立性脑桥梗死预后不良的影响因素分析
目的 探讨急性孤立性脑桥梗死预后不良的影响因素.方法 采用头颅MRI检查测定73例急性孤立性脑桥梗死患者的梗死灶大直径、动脉供血分布及穿支动脉粥样硬化情况.采用头颅MRA或CTA评价颅内血管狭窄程度.应用颈动脉彩超评价颅外动脉粥样硬化情况.根据出院mRS评分将患者分为预后不良组(mRS评分≥3分)和预后良好组(mRS评分<3分).结果 与预后良好组比较,预后不良组糖尿病发生率、入院及出院NIHSS评分、早期进展率、空腹血糖水平显著增高,男性比率显著降低(P<0.05～0.01).与预后良好组比较,预后不良组脑桥多发供血区梗死、穿支动脉粥样硬化、椎基底动脉狭窄比率及梗死灶大径显著升高(均P<0.01).穿支动脉粥样硬化及基底动脉狭窄是脑桥梗死预后不良的相关危险因素(OR=22.137,95％CI:2.563～191.228,P=0.005;OR=28.552,95％CI:2.347～347.313,P=0.009).结论 穿支动脉粥样硬化及基底动脉狭窄是急性孤立性脑桥梗死预后不良的相关危险因素.
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癫痫患儿不同眼状态间断性闪光刺激光敏性特征及脑电图分析
目的 研究癫痫患儿不同眼状态间断性闪光刺激(IPS)光敏性特征及EEG分析.方法 选取IPS阳性癫痫患儿,分析不同眼状态下IPS光敏性特征及EEG特征.结果 104例患儿中,背景正常101例(97.1％),背景活动减慢3例(2.8％).间期有癫痫放电99例(95.1％),其中广泛性放电66例(63.5％)、局灶放电20例(19.2％)、广泛性+局灶性放电13例(12.5％).IPS广泛性放电96例(92.3％),局灶性放电8例(7.7％).合眼+闭眼+睁眼IPS阳性患儿IPS时临床发作率显著高于其余患儿(χ2=4.575,P=0.032).光敏感程度随刺激频率增加而逐渐增加,当闪光频率在8～25 Hz时IPS阳性数量呈现峰值.间期广泛性放电患儿IPS均为广泛性放电,65.0％的间期为局灶性放电患儿IPS为广泛性放电;两者差异有统计学意义(χ2=20.684,P<0.001).结论 IPS阳性多见于特发性全面性癫痫患儿.合眼、睁眼状态下IPS阳性率高于闭眼状态,且8～25 Hz频段时IPS阳性率高.当三种眼状态IPS均阳性时,IPS易诱发发作.IPS放电特性与间期EEG及发作类型密切相关.
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3-硝基酪氨酸对轻微型肝性脑病的诊断价值
目的 探讨3-硝基酪氨酸(3-NT)对轻微型肝性脑病(MHE)的诊断价值.方法 采用肝性脑病心理测试评分(PHES)量表对90例无显性肝性脑病的乙肝肝硬化患者(肝硬化组)及90名健康体检者(正常对照组)进行评测.检测入组者外周血中3-NT、蛋氨酸、瓜氨酸、IL-6、IL-18水平.以PHES为金标准,评估各项指标诊断MHE的敏感性和特异性.结果 根据PHES量表,39例患者被诊断为MHE.与非MHE亚组比较,MHE亚组3-NT、IL-6、IL-18、蛋氨酸、瓜氨酸水平显著升高(均P<0.01).Logistics回归分析显示,3-NT(P=0.005)、IL-6(P=0.029)、IL-18(P=0.018)是MHE的相关危险因素,而蛋氨酸(P=0.401)、瓜氨酸(P=0.087)无预测价值.受试者工作特征曲线提示3-NT具有良好的有效性及可靠性,曲线下面积0.967,截断点为13.230 nmol,敏感度为92.5％,特异度为94.0％.结论 3-NT对MHE具有良好的诊断价值,且简便易行,敏感度和特异度较高.
关键词： 轻微型肝性脑病 肝性脑病心理测试评分量表 3-硝基酪氨酸 -
早期与中晚期帕金森病非运动症状的比较以及对生活质量的影响
目的 比较早期与中晚期帕金森病(PD)非运动症状(NMS)及其对生活质量的影响.方法采用非运动并发症30题问卷(PDNMS)以及39项帕金森病生活调查表(PDQ39)评价82例早期PD患者(早期组)及69例中晚期PD患者(中晚期组)的NMS及健康相关生活质量.结果早期组及中晚期组患者的便秘、兴趣缺乏、幻觉、错觉、嗅觉减退、吞咽困难、排便不尽感、夜尿、跌倒、日间思睡、失眠及多汗发生率差异有统计学意义(P<0.05～0.01).早期及中晚期PD患者PDNMS总分与PDQ39总分及各维度评分呈正相关(P<0.05～0.01).早期PD患者PDNMS的注意力下降、兴趣缺乏以及抑郁与PDQ39总分具有相关性(r=0.420,r=0.366,r=0.364;均P<0.01);中晚期PD患者PDNMS的兴趣缺乏、日间思睡及流涎与PDQ39总分具有相关性(r=0.396,r=0.380,r=0.371;均P<0.01).结论注意力下降、兴趣缺乏及抑郁对早期PD患者生活质量影响较大,而兴趣缺乏、日间思睡及流涎对中晚期PD患者生活质量影响较大.
