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颌下腺缺血再灌注后细胞凋亡与增殖的研究
我们应用几种形态学方法观察大鼠颌下腺缺血及再灌注不同时相上皮细胞的凋亡与增殖特征,以揭示缺血再灌注颌下腺组织损伤与修复过程中细胞凋亡和增殖与颌下腺上皮细胞丧失的关系.
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涎腺上皮细胞永生化细胞系及其意义
唾液在保护口腔组织、免疫、消化食物等维护口腔内器官的正常功能方面发挥着重要作用,它是由各个涎腺的上皮细胞分泌物的混合物,但是涎腺上皮细胞的生长、分化的自身调节机制尚不清楚.
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补肾活血中药对无排卵功血患者子宫内膜腺上皮细胞凋亡的影响
目的:探讨中西药物治疗无排卵功血的机制.方法:采用原位末端标记法(TUNEL法)对37例无排卵功血患者经中药或西药治疗前后进行子宫内膜腺上皮细胞凋亡的测定.结果:无排卵功血患者无论其内膜呈现增生期或增生性改变,其内膜细胞均表现为凋亡不足的特点,并且凋亡指数从增生期到复杂性增生有逐渐增强的趋势.经过合成孕激素和补肾活血中药治疗后,内膜细胞凋亡指数均有所提高.结论:合成孕激素和中药均能诱导无排卵功血患者子宫内膜细胞凋亡的发生,但二者作用途径不同.
关键词: 补肾活血中药 功能失调性子宫出血(无排卵型) 子宫内膜 腺上皮细胞 凋亡 -
双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素2(hBD-2)mRNA的表达
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双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β- 防御素-2基因表达及其信号转导机制
目的:本项研究目的是检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞hBD-2基因的激活作用并分离其活性组分,进一步探讨其受体及其胞内信号传导通路.方法:厌氧培养长双歧杆菌,采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取方法获得双歧杆菌胞壁蛋白质成份,利用SepharylS-100HR分子筛分离细胞壁蛋白.分别利用活菌,热灭活全菌,全细胞壁组份和全细胞壁蛋白组分,刺激人肠腺上皮细胞Caco-2,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、Northem杂交、免疫细胞化学染色和ELISA等技术在mRNA和肽水平上检测hBD-2基因的表达.应用Westem Blotting技术检测到IκB-α磷酸化和降解、NF-κBp65的核移位以及细胞内MAPKs蛋白分子ERK1/2、p38 MAPK和JNK的磷酸化.
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女性乳腺猫抓病1例
患者女,42岁,发现左乳肿物20 d入院.主诉肿物如"核桃"大小、无痛,于门诊行肿物活检穿刺病理报告为:散在大量红细胞、淋巴细胞、嗜中性白细胞,及少许增牛活跃腺上皮细胞.既往身体健康,追问病史,1年前曾被自养猫抓伤左手背部.查体:双乳对称,左乳外上象限偏外侧可触及一大小约3.5 cm×3.0cm × 3.0 cm肿物,活动差,稍感触痛,质韧,表面皮肤无橘皮样变,乳头无内陷、无溢液,左腋窝触及一大小约1.0 cm ×0.5 cm × 0.5 cm肿大淋巴结,质韧,无触痛,活动可.
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人子宫内膜腺上皮和基质细胞的分离与培养
目的:探索一种简便人子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞的分离培养方法.方法:通过筛网法和差速离心法,分离培养5例子宫内膜腺上皮和基质细胞,利用免疫细胞化学染色及其激光共聚焦显微镜鉴定分离的细胞并进行图像分析.结果:用差速离心法分离子宫内膜腺上皮细胞中CK-19阳性表达积分为4.16±0.22,子宫内膜基质细胞中Vimentin阳性表达积分为4.24±0.22,与筛网法相比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:通过改良差速离心法使腺上皮和基质细胞分离步骤简化,是一种较理想子宫内膜细胞分离培养方法.
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分离培养子宫内膜腺上皮和间质细胞方法的改进
目的:探索一种获得高产量、高纯度子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的分离培养方法.方法:通过高浓度胶原酶和DNase联合消化、过滤及贴壁纯化等技术,分离培养30例子宫内膜腺上皮和间质细胞,并拟传代.结果:29例标本培养成功,每1g子宫内膜组织约可分别得到(40~50)×106个腺上皮细胞和(40~50)×106个间质细胞,细胞产量高.并且腺上皮细胞纯度率约96%,间质细胞纯度率达98%以上.间质细胞可以有限传代,腺上皮细胞不能传代.结论:通过改良步骤,可提高腺上皮和间质细胞产量,同时保证了其纯度及活性,不失为一种较理想的子宫内膜细胞分离培养方法.
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乳腺癌术后乳糜漏1例报道
患者,女,63岁,因发现左侧乳腺包块20d入院.入院前20d无意中发现左侧乳腺约2.0cm 的包块,未感疼痛及不适,自行服用抗生素几天无效,于2002年4月8日行彩超检查提示左侧乳腺内上象限紧邻乳头1.7cm×1.6cm不规则减弱回声包块,另在乳房内上象限探及一弱回声结节0.7cm×0.6cm血流异常,于4月18 日行细针吸细胞学检查涂片见较多腺上皮细胞,核大小不一,有异型性,属核异质细胞.
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原代人子宫内膜细胞分离及培养鉴定
目的:探究原代人子宫内膜细胞分离及培养的简易方法,并对其纯度及生物活性进行鉴定。方法采用胶原酶消化人子宫内膜组织,经2次筛网过滤、离心及贴壁纯化技术,分离、纯化培养人子宫内膜间质细胞(ESC )和腺上皮细胞(EEC ),用细胞角蛋白(cytokeratin)和波形蛋白(vimentin)免疫细胞化学染色法和免疫荧光方法对所分离的细胞进行鉴定。结果 ESC呈平行生长,细胞呈梭形或多角形,波形蛋白抗体免疫细胞化学染色呈阳性,纯度达95%以上。EEC呈漩涡状生长,细胞呈多角形或蝌蚪形,细胞角蛋白抗体免疫细胞化学染色呈阳性,纯度可达90%。结论应用胶原酶消化法及二次筛网过滤法成功分离并培养数量、活力和纯度高的子宫内膜细胞,可操作性强,可供具备基本细胞培养条件的实验室进行推广。
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双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素2(hBD-2)mRNA的表达
目的:检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞β-防御素-2基因的激活作用及其活性组分.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Northern杂交检测HT-29细胞hBD-2mRNA的表达;采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取等方法分离双歧杆菌胞壁蛋白质成份.结果:RT-PCR和Northern杂交分析显示,在正常培养条件下HT-29细胞无可见的hBD-2mRNA表达信号,但在双歧杆菌菌体、细胞壁和胞壁蛋白刺激下均检测出显著的hBD-2mRNA表达.结论双歧杆菌能诱导人肠腺上皮细胞hBD-2 基因的表达,双歧杆菌胞壁蛋白可能是其诱导作用的活性组分.
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肌上皮标记在乳腺良、恶性疾病鉴别诊断中的研究进展
正常乳腺导管和腺泡由两层细胞构成,即内层的腺上皮细胞和外层的肌上皮细胞(Myoepithelial cells,MECs).MECs位于腺上皮与基底膜之间,其胞浆中富含肌纤维,具有收缩性.双层结构完整存在通常是乳腺良性病变的组织学标志,恶性病变则出现MECs的缺失或不完整,因此MECs存在与否就成为乳腺良恶性疾病鉴别诊断的重要指标[1].
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p16基因异常与胰腺肿瘤
胰腺腺癌(PC)在西方为常见的消化系统肿瘤之一.由于缺乏特异的早期临床症状与胰腺的较深的解剖位置,使得大部分患者就诊时已处于晚期,多数病人已出现局部播散或远处转移.在美国,胰腺癌位于癌症死亡原因中第五位[1].过去的十年间,胰腺癌发生相关基因的研究取得了较大进展.目前认为,胰腺癌是一种基因疾病,此病的进展是由于胰管腺上皮细胞分子异常的逐渐积累,有多种基因与胰腺癌的发生有关,p16基因是其中较常见及重要的一个,通过多种途径失活从而导致肿瘤发生.本综述旨在从分子生物学的角度认识胰腺癌的发生发展机制,寻找新的肿瘤标志物,阐明p16基因对胰腺癌的诊断、治疗及预后的意义.
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人子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞的分离纯化和培养
目的 分离和纯化人子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞并进行体外培养,为建立胚胎体外种植模型奠定基础.方法 通过酶消化、筛网过滤和差时贴壁等方法,分离和纯化人子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞并继续体外培养,通过免疫细胞化学染色进行细胞表型鉴定.结果 基质细胞和腺上皮细胞的产量分别为8×106个/g组织和6×106个/g组织,存活率分别为90%和85%,纯度分别达95%和90%;基质细胞波形蛋白染色阳性,腺上皮细胞角蛋白染色阳性;基质细胞接种后0.5 h开始贴壁,腺上皮细胞在接种24 h后贴壁;基质细胞可以有限的传代,腺上皮细胞不能传代.结论 采用醇消化、筛网过滤和差时贴壁等方法,可获得纯度较高的子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞.人子宫内膜细胞体外培养的成功为胚胎体外种植模型的建立奠定了基础.
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人子宫内膜和子宫内膜异位症患者在位内膜细胞培养及形态
子宫内膜异位症是指有生长增殖能力的内膜组织或细胞出现在子宫腔以外种植生长而引起的临床症状,其病理形态多样,侵袭广泛,具有类似恶性肿瘤样的生物学特性,严重影响患者的生活质量.子宫内膜异位症病因复杂,发病机制尚不完全清楚.子宫内膜异位症的发生与在位内膜的生理特性密切相关[1],子宫内膜异位症在位内膜细胞与正常子宫内膜细胞在黏附[2]、凋亡[3]、免疫[4]、血管生成[5]等多方面存在差异,推测可能与子宫内膜异位症的发生相关[6].
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皮肤子宫内膜异位症1例
患者女,40岁,农民.2年前无明显诱因在脐部出现一黄豆大小棕蓝色结节,感轻度疼痛不适,当地医院给予冷冻治疗后皮疹变平.1年前在同一部位及其左上方各出现一黄豆及绿豆大小结节,感轻度疼痛和压痛,月经期症状加重,同时结节增大,有时破裂出血.15年前顺产一子,体健,否认有类似家族史.体检:腹部无瘢痕,脐部可见一黄豆及绿豆大小的棕色结节,质中,其上可见血痂及血迹(患者月经期),结节周围无明显红肿(见图1).组织病理:真皮内可见子宫内膜的间质及腺状腔隙,腔隙由一排柱状的腺上皮细胞围成(见图2).诊断:皮肤子宫内膜异位症.采用手术切除皮损,随访3月无复发.
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CD40,CD40L与动脉粥样硬化及磁共振成像的相关研究进展
1 CD40及CD40L概述CD40分子是一种I型跨膜糖蛋白,分子量约48 kd,是许多细胞的表面分子[1],如B淋巴细胞,血管内皮细胞,胸腺上皮细胞及单核细胞,树突状细胞,内皮细胞和某些肿瘤细胞.隶属于肿瘤坏死因子受体超家族[2-4].
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凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞中Rb2/p130表达的影响
目的 通过体外培养人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞,比较凋膜止崩方靶向干预用药前后细胞中Rb2/p130的表达影响,揭示凋膜止崩方靶向祛除增生子宫内膜的机制.方法 对30例子宫内膜增生症患者的子宫内膜组织进行分离、提取腺上皮细胞,应用细胞免疫荧光法对腺上皮细胞进行鉴定;采用实时定量聚合醇链反应(Realtime PCR)分别检测用药组与空白组细胞中Rb2/p130的表达变化.结果 Rb2/p130基因在用药组(大、中、小剂量)中表达量依次递减,差异有显著性(P<0.05),空白对照组细胞中Rb2/p130的表达低于用药各组.结论 Rb2/p130基因的表达在用药组(大、中、小剂量)中表达逐渐降低,提示Rb2/p130可能参与了子宫内膜癌前病变的病理过程,用药剂量与Rb2/p130的表达之间的关系对指导临床治疗有一定意义.
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胶原酶分离及低速离心结合筛网过滤法纯化子宫内膜细胞的研究
目的:探索分离子宫内膜细胞以及纯化子宫内膜腺上皮细胞与间质细胞的佳方法.方法:采用Ⅰ型胶原酶、胰酶、Ⅰ型胶原酶混合胰酶以及机械研磨等4种方法处理大鼠子宫,比较细胞数和活细胞率,从而获得分离子宫内膜组织的佳方法.用获得的佳方法分离人类子宫内膜组织,比较采用2次筛网过滤(筛网法)和低速离心结合筛网过滤(结合法)进一步纯化子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞获得的细胞数和纯化效率,从而获得较好的纯化方法.结果:Ⅰ型胶原酶、胰酶、Ⅰ型胶原酶混合胰酶和机械研磨处理大鼠子宫组织所得的细胞数分别为6.43±3.55×105/ml、4.59±2.35×105/ml、4.25±1.06×105/ml、3.57±1.15×105/ml,差异有统计学意义(P<0.05);活细胞率分别为98.90±0.74%、96.63±1.84%、97.97±2.02%、97.20±4.41%,差异无统计学意义(P>0.05).筛网法和结合法纯化分离所获得的腺上皮细胞数为0.43±0.21×l05/ml、8.27±2.46×10 5/ml;间质细胞纯度为92.94±2.89%和99.19±0.24%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:Ⅰ型胶原酶是分离子宫内膜细胞的佳方法,而采用低速离心结合筛网过滤法是较理想的纯化分离后的子宫内膜细胞的方法.
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降低我县农村妇女妇科疾病发病率的几点建议
妇女的健康问题不仅是个人问题而且是社会问题,妇女健康状况关系着下一代的茁壮成长和全面发展,关系着每一个家庭的幸福和谐,关系到经济发展和社会稳定.2015年对我县24个乡镇的392个村已婚妇女进行妇女病普查.1基本情况采用妇科检查和宫颈脱落细胞病理学诊断方法.宫颈细胞病理学诊断采取TBS标准诊断,对宫颈细胞病理学诊断为“意义不明确的磷状细胞或腺上皮细胞(ASCUS)”及以上的宫颈上皮内瘤变的妇女病患者,必须进行宫颈活检.共普查13044人,年龄大65岁,小为18岁,查出不同程度患病人数11466人,患病率为87.9%;宫颈刮片检查人数13029人,宫颈刮片诊断数12993张;所查疾病中,阴道炎4609例,占40.2%;盆腔炎591例,占5.1%;附件炎4624例,占40.3%;滴虫260例,占2.3%;霉菌144例,占1.3%;癌前病变461例,其中ASC-US 348 例,ASC-H 30例,LSIL62例,HSIL19例,异常占4%.宫颈癌10例,占8‰,子宫脱垂8例,占7‰.从普查情况看,农村妇女妇科常见病患病率居高不下,其中,宫颈疾病是农村妇女健康的主要杀手,对农村妇女健康和生命构成严重威胁,为此进行妇科疾病检查势在必行.