首页 > 文献资料
-
抑制素测定的临床意义
抑制素(inhibin, INH)是一种多肽糖蛋白, 在男性主要由睾丸支持细胞(steroli细胞)分泌, 女性主要由卵巢颗粒细胞分泌.INH在反馈调节垂体前叶合成分泌卵泡刺激素(FSH)方面具有重要作用, 并参与多种生殖内分泌、旁分泌及自分泌的调节.INH有两种活性形式, 分别称为抑制素-A(inhibin A, INH A)和抑制素-B(inhibin B, INH B), 它们都有2个亚基, 一个叫α亚基, 另一个叫β亚基, 通过二硫键连接而成.INH A(αβA)和INH B(αβB)的α亚基完全相同, 但β亚基不同.INH的β亚基可以形成二聚体称为ACT.人INH的α亚基与猪INH的α亚基约85%相同, βA亚基的全部, βB亚基的98%氨基酸残基与猪INH相同[1].
-
钠离子通道基因SCN1A、SCN2A、SCN1B突变与癫痫
癫痫是一种常见神经系统慢性疾病,是由脑部神经元过度同步化放电所导致.目前发现多种编码电压门控性钠离子通道的基因突变与癫痫的发生有关.其中大多数突变是在编码钠离子通道α亚基的基因SCN1A、SCN2A和编码β亚基的基因SCN1B上发现的.不同的基因突变导致的癫痫综合征表型轻重不一.轻者表现为热性惊厥,预后良好,重者可表现为顽固性癫痫.钠离子通道基因突变引起的常见癫痫综合征有全面性癫痫伴热性惊厥附加症(generalized epilepsy with febrile seizure plus,GEFS+)、婴儿严重肌阵挛癫痫(severe myoclonic epilepsy of infancy,SMEI)、良性家族性新生儿-婴儿惊厥(benign familial neonatal-infantile seizure,BFNIS)等.本文就SCN1A、SCN2A和SCN1B基因突变导致的癫痫综合征的临床表型及其基因突变特点作一综述.
-
类风湿性关节炎动物模型中HIF-1α的表达
类风湿性关节炎(RA)属自身免疫性疾病,其发病机制迄今没有完全阐明,临床上尚缺乏根治RA的方案和预防的措施.缺氧诱导因子-1(HIF-1)是近年来发现的一种机体适应缺氧的重要转录调节因子,由α和β两个亚基构成,其中β亚基为组成性表达.在缺氧条件下,HIF-1α蛋白及其靶基因表达增加.2003年Cramer等发现HIF-1α和髓系细胞介导的机体炎症反应密切相关.
-
妊娠滋养细胞肿瘤患者外周血肿瘤细胞检测方法的研究
目的研究从妊娠滋养细胞肿瘤患者外周血中检出肿瘤细胞的方法.方法具有β-hCG-mRNA表达特征的绒癌细胞株(JAR细胞)掺入正常人外周血中,用荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测其中β-hCG-mRNA,推测JAR细胞的量;采集治疗前的妊娠滋养细胞肿瘤患者外周血,定量检测其中的β-hCG-mRNA,以推测滋养细胞的含量.结果当10 ml外周血中含有102以上JAR细胞时可检测到其中的β-hCG-mRNA;9例滋养细胞肿瘤中有4例的外周血中检测到β-hCG-mRNA表达.推算肿瘤细胞量为104~107个/10ml外周血.结论荧光定量RT-PCR法测定β-hCG-mRNA是检测、推算外周血中滋养细胞肿瘤细胞的有用方法之一;部分妊娠滋养细胞肿瘤患者外周血中可检测到肿瘤细胞.
-
编码钾离子通道蛋白的KCNE基因家族与心律失常
心肌细胞电压依赖性钾离子通道(Kv)由α亚基和β亚基共同组成,α亚基以四聚体形式形成孔道;β亚基作为α亚基的辅助亚单位,调节其门控动力学特性和对药物的反应性,影响通道蛋白的转运、修饰以及细胞膜定位.KCNE基因家族编码一类钾离子通道β亚基,与KCNQ1、HERG、Ky3.4、Ky2.1、Ky4.2以及HCN等多种离子通道相互作用,维持细胞正常的电生理学特性,其结构和功能的异常将导致心脏电活动的紊乱,引起各种心律失常.笔者现对其相关研究进展作一综述.
-
膀胱癌组织βhCG mRNA及其亚型表达分析
目的探讨βhCG 基因表达与膀胱肿瘤临床生物学的关系. 方法采用RT-PCR法,结合限制性内切酶分析对37例膀胱癌组织进行βhCG mRNA及其亚型表达的检测. 结果 37例癌组织中βhCG mRNA阳性26例(70%).阳性表达率与肿瘤病理分级无关(P>0.05);浸润性肿瘤(13/14)较浅表性肿瘤(13/23)阳性率高(P<0.01);浅表性肿瘤主要表达β7基因,而浸润性肿瘤多同时表达3个或以上βhCG mRNA亚型. 结论膀胱肿瘤βhCG mRNA表达与肿瘤临床分期相关.同时表达多个βhCG mRNA亚型提示肿瘤分化差,易浸润.
-
葡萄胎组织中HCG的计量学相关研究
通过对葡萄胎绒毛膜促性腺激素(human chorionic ganadotropin, HCG)的计量学相关性研究,探讨侵袭性葡萄胎血清HCG-β含量高于良性葡萄胎的原因.采用免疫组化、组织学图象分析定量、血清HCG-β检测,对32例良性葡萄胎和21例侵袭性葡萄胎HCG含量进行测定.结果示良性葡萄胎合体滋养细胞单位面积HCG含量(0.560±0.064)明显高于侵袭性葡萄胎(0.409±0.122);而侵袭性葡萄胎HCG阳性胞质所占面积比率(0.284±0.136)显著高于良性葡萄胎(0.159±0.076);但组织中HCG相对总量二者差异无统计学意义,血HCG-β(ng/mL)含量有明显不同,良性葡萄胎(165.14±35.0),侵袭性葡萄胎(248±15.9);初步研究结果提示,虽然良性和侵袭性葡萄胎组织中HCG相对总量差异无统计学意义(P>0.05),但侵袭性葡萄胎HCG分泌功能细胞数目增多和侵袭组织接触HCG释放表面积的明显增大,使血HCG-β含量增高,反映了生物学行为的侵袭性.
-
异位hCGβ基因免疫诱导的特异性抗肿瘤免疫应答
目的观察异位hCGβ基因免疫诱导的肿瘤特异性免疫应答及其抗肿瘤作用,为肿瘤的免疫生物治疗寻求新途径. 方法构建含hCGβ编码基因的质粒TR421-hCGβ,对BALB/c小鼠实施基因免疫,并以空质粒为对照.采用ELISA法和3H-TdR掺入法分别检测免疫小鼠血清中特异性抗hCGβ-IgG抗体及其对肿瘤细胞体外生长的抑制作用;特异抗原体外刺激免疫小鼠脾细胞后,用3H-TdR掺入法和3H-TdR释放法分别检测其特异性增殖活性和细胞毒活性;皮下接种SP2/0-hCGβ细胞攻击免疫小鼠,以成瘤率及实体瘤重量评估体内抗瘤效果. 结果全部TR421-hCGβ质粒免疫小鼠均产生高水平的抗hCGβ-IgG抗体,该抗体可抑制肿瘤细胞的体外生长,与对照血清相比,差异有显著差性(P<0.05);hCGβ蛋白、灭活SP2/0-hCGβ细胞以及两者混合均能刺激TR421-hCGβ质粒免疫小鼠脾细胞的体外增殖(SI值分别为1.53、1.81和2.05),与空质粒免疫小鼠相比,差异有显著性(P<0.01);特异抗原刺激的TR421-hCGβ质粒免疫小鼠脾细胞对SP2/0-hCGβ细胞的细胞毒活性明显高于SP2/0细胞(P<0.01);空质粒免疫小鼠接种SP2/0-hCGβ细胞后成瘤率为100%,瘤重达3.37 g,而TR421-hCGβ质粒免疫小鼠的成瘤率为16.66%,瘤重为0.37 g,两组比较,差异有显著性(P<0.01).结论异位hCGβ基因免疫诱导的特异性免疫应答具有抗肿瘤作用,为肿瘤的基因免疫生物治疗提供新的途径.
-
小鼠ATP酶β亚单位真核表达载体的构建和细胞内定位研究
目的 构建小鼠ATP酶β亚单位(ATPaseβ)真核表达载体,并观察其在哺乳动物细胞中的表达定位情况.方法 取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,反转录为cDNA,以cDNA为模板PCR扩增得到ATPaseβ编码序列,将其连接到pMD18-T载体上,然后以pMD18-ATPaseβ为模板扩增得到ATPaseβ编码序列,再将其克隆到真核表达载体pcDNA3/HA上.采用脂质体转染法转染NIH 3T3细胞及293细胞,在荧光显微镜下观察结果.结果 PCR、双酶切和测序结果表明,重组质粒pcDNA3/HA-ATPaseβ构建正确;转染实验发现,该质粒能够在NIH 3T3细胞中表达,表达产物主要定位于细胞质,细胞膜上也有表达,而在293细胞中只表达于细胞质.结论 成功构建了带有HA标签的小鼠ATPaseβ真核表达载体,该载体能够在哺乳动物NIH 3T3及293细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究ATPaseβ的细胞内生物学功能提供了一个重要的工具.
-
G蛋白、G蛋白偶联受体及信号传导途径研究进展
一、G蛋白的结构和种类1.结构:G蛋白(G-protein/GTP binding protein)是能与鸟嘌呤核苷酸结合,具有水解GTP生成GDP即具有GTP酶(GTPase)活性的蛋白,位于细胞膜胞浆面的外周蛋白,一般是指与膜受体偶联的异源三聚体,由3个亚基组成,它们是α亚基(45kD)、β亚基(35kD)、γ亚基(70kD).总分子质量为100kD左右.G蛋白有两种构象,一种是以αβγ三聚体存在并与GDP结合,为非活化型,另一种构象是α亚基与GTP结合并致βγ亚基脱落,此为活化型.
-
米非司酮联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠疗效观察
近年来,由于B超诊断技术水平不断提高及血人绒毛膜促性腺激素-β亚基(β-HCG)定量测定的开展,使得很多异位妊娠获得早期诊断,非手术治疗成为可能.
-
分子佐剂C3d增强人绒毛膜促性腺激素β基因避孕疫苗的免疫效应及转变免疫应答模式的研究
目的研究分子佐剂C3d能否增强人绒毛膜促性腺激素(hCG)β DNA疫苗的免疫原性,并转变Th1/Th2型免疫应答模式.方法抽提纯化pcDNA3、pcDNA3-hCGβ、pcDNA3-hCGβ-C3d3、pCMV4-hCGβ-C3d3 4种质粒.将12只6周龄BALB/c雌性小鼠分为12组, A1~3组各6只以pcDNA3免疫,作为空白对照组;B1~3组各6只以pcDNA3 hCGβ免疫,作为阴性对照组;C1~3组各6只以pcDNA3-hCGβ-C3d3免疫,作为实验1组;D1~3组各5只以pCMV4-hCGβ-C3d3免疫,作为实验2组.免疫前1周,于小鼠左后腿肌肉注射0.25%普鲁卡因0.1 ml.1周后,在相同部位分别肌注前述4种质粒,剂量分别为:5 pmol(A1~D1组)、10 pmol(A2~D2组)、20 pmol(A3~D3组).3周后,再次给予相同剂量质粒加强免疫.于第2次免疫后3周,处死小鼠.用ELISA法测定外周血抗hCGβ抗体效价和经hCG抗原体外刺激脾细胞培养上清中Th1型(IL-2、INF-γ、TNF-α)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子分泌水平.结果 C3d分子佐剂能明显提高抗hCGβ抗体滴度.当免疫剂量为20 pmol时,与B3组比较,C3组抗hCG抗体大效价达到1∶ 450,提高了9倍.D3组抗hCG抗体大效价达到1∶ 12 150,提高了243倍.D3组与C3组相比较,抗hCG抗体水平提高了27倍.受试小鼠以5 000 IU hCGβ抗原刺激时,含C3d3的C3组及D3组INF-γ、IL-2表达水平显著低于B3免疫组(P<0.01);TNF-α表达水平也低于B3组(P<0.05);而C3组IL-4表达水平明显高于B3组(P<0.05),D3组IL-10表达水平明显高于B3组(P<0.01).结论 C3d分子佐剂能够增强hCGβ免疫原性;抑制Th1型细胞因子的分泌,增加Th2型细胞因子的分泌,使hCGβ基因免疫的免疫应答效应由Th1型向Th2型偏转.
-
人绒毛膜促性腺激素在妇产科的应用
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由合体滋养细胞分泌的糖蛋白激素,由α、β亚基组成,HCGα亚基抗体与卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、TSHα亚基均能发生交叉反应,而HCGβ亚基片段为其所特有而不受LH干扰,因此临床利用HCGβ亚基的特异抗血清,测定母体血清中HCGβ亚基,现已采用β-HCG放射免疫测定法正确地反应了受试者的HCG水平,检测HCG的酶联免疫方法具有特异性强、灵敏度高、试剂廉价、操作简单特点,应用比较广泛.
-
缺氧诱导因子新进展
目的 缺氧诱导因子是细胞对于缺氧主要的应答因子,缺氧诱导因子由α和β两个亚基组成.缺氧、重金属、细胞因子等能抑制α亚基的降解,α亚基与β亚基结合成有活性的异二聚体,转移到细胞核内,调节多种靶基因的转录.缺氧诱导因子除参与缺氧时细胞稳态的维持,还在胚胎发育,细胞分化,肿瘤生长中发挥作用.
-
胰岛素信号传导及其调节机制
1胰岛素信号传导通路胰岛素信号传导可大致分为几个步骤:(1)胰岛素首先与细胞表面胰岛素受体(IR)结合,激活其β亚基的酪氨酸蛋白激酶(protein Tyrosine kinase,PTK).
-
人类卵巢卵泡刺激素β基因cDNA分离克隆及意义
目的探讨人类卵巢卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)β基因表达.方法通过RT-PCR技术,分离、扩增人类卵巢组织FSHβ基因cDNA,并进一步克隆、测序.结果测序结果与垂体组织克隆FSHβcDNA序列相一致.结论人类卵巢组织自身转录FSHβ,提示有必要深入开展垂体-性腺轴的基因表达谱研究.
-
PCR-SSCP法检测耐多药结核分支杆菌耐药性
我国是结核病疫情严重的国家之一,其主要原因是耐药和耐多药结核病的广泛分布和迅速传播.异烟肼(INH)和利福平(RFP)均是抗结核的一线药物,对于其作用机理及结核杆菌的耐药机制的研究日益受到重视.据报道认为结核分支杆菌耐与RNA聚合酶的β亚基的编码基因rpoB的突变有关;耐异烟肼的产生是过氧化氢酶-过氧化物酶的编码基因KatG基因的缺失和突变有关,也inhA基因突变也有相关性[1,2].我们采用PCR-SSCP银染法直接检测临床分离株中结核分支杆菌rpoB基因和KatG基因突变,现将结果报告如下.
-
老年帕金森病大鼠模型皮质中γ-氨基丁酸 A受体β亚基含量的变化
目的:探讨在帕金森病(PD)状态下皮质中γ-氨基丁酸(GABA) A受体各个β亚基表达水平的变化。方法分离6-羟基多巴(6-OHDA)制作成功的PD动物模型的皮质,应用高效液相( HPLC)法测定皮质中GABA的含量,应用qRT-PCR的方法检测 GABA A受体中β1、β2、β3亚基的mRNA表达水平,应用Western印迹的方法检测GABA A受体中β1、β2、β3亚基的蛋白质表达水平。结果 PD模型大鼠注射侧的皮质中GA-BA的浓度较对照侧及正常对照的双侧均有不同程度的升高( P<0.05)。皮质中,β1、β2、β3亚基的 mRNA表达均有所降低,β2和β3亚基降低更明显( P<0.01);各个亚基的蛋白水平的变化趋势与mRNA的变化一致。结论 GABA A受体的β1、β2、β3亚基在皮质中均有表达,且与 GABA在PD动物脑组织中含量相适应,β1、β2、β3亚基均有受体下调的情况。
-
神经生长因子及受体与肿瘤相关性研究的现况与进展
1 神经生长因子及受体研究现况与进展NGF是在40年前被发现的一种多肽激素,它能促进感觉神经元和交感神经元支配的神经纤维的生长,含有α、β、γ3种亚基的多聚体,可表示为α2βγ2,其中β亚基具有NGF的所有生物学活性,也是3种亚基中唯一具有NGF的所有生物学活性的亚基,β亚基由2条各含有188个氨基酸残基的相同肽链组成.
-
果蝇中整合素αPS3/βν介导吞噬细胞吞噬凋亡细胞和细菌
整合素是由2个跨膜α和β亚基组成的异源二聚体,具有各种细胞功能。整合素βν是果蝇整合素的β亚基,参与吞噬凋亡的细胞和细菌。该研究搜寻了与βν亚基形成复合物并共同作用的α亚基,通过RNAi感染动物模型检测发现,αPS3(而不是其他4个α亚基)是果蝇胚胎有效吞噬凋亡细胞所必需的。αPS3编码scb突变时,包括缺失突变、插入P元件或改变核苷酸序列,都能降低吞噬能力。这种降低作用能被过表达scb逆转。此外,用干扰RNA(RNAi)同时干扰苍蝇中αPS3和βν后,其吞噬能力与干扰任一个亚基相同。αPS3缺失也能降低幼虫血细胞吞噬金黄色葡萄球菌的能力。采用免疫共沉淀分析化学交联处理的果蝇细胞系发现,αPS3与βν具有物理相互作用。结果提示,整合素αPS3/βν是果蝇吞噬细胞吞噬凋亡细胞和细菌的受体。