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386株结核分支杆菌临床分离株药敏试验结果分析
结核病是当今世界应引起注意的传染病之一,尤其是耐多药结核病(MDR-TB)的出现,使结核病治疗、控制及预防面临新的挑战.为此,我们结合MDR-TB的治疗原则,选择了异烟肼(H)、利福平(R)、利福喷丁(T)、乙胺丁醇(E)、链霉素(SM)、力排肺疾(P)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(O)、司帕沙星(S)、左旋氧氟沙星(L)、环丙沙星(C)等11种药物对结核分支杆菌临床分离株进行药敏试验(绝对浓度法),结果报告如下.
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全身播散性BCG感染1例
全身播散性卡介苗感染,其诊断依赖于标本培养有结核杆菌生长,菌型鉴定为卡介苗株[1].本例经抽取淋巴结炎内脓液,经间歇区寡核苷酸(SPOLIGOTYPING)和PCR对临床分离株与结核分枝杆菌标准株(M.TB H37Rv)、牛结核分枝杆菌(M.bovis)标准株和BCG株作比对,证实临床分离株为BCG株.采用联合二线抗结核药治疗获临床治愈出院.
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耐异烟肼结核分支杆菌耐药相关基因突变研究
目的:阐明结核分支杆菌耐异烟肼临床分离株katG基因、inhA基因、ahpC基因、kasA基因及oxyR基因突变特点,探讨是否可能通过DNA序列分析来判断结核分支杆菌对异烟肼的敏感性.
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噬菌体扩增法快速筛选结核分支杆菌对抗结核药物敏感性的研究
目的:利用噬菌体扩增技术对结核分支杆菌临床分离株进行异烟肼和氧氟沙星药物敏感性分析,评价该表型鉴定法的应用价值.
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肺炎链球菌临床分离株的临床特点、血清分型及耐药性分析
目的 探讨肺炎链球菌临床分离株的临床特点、血清分型及耐药性.方法 选取该院2015年1月—2017年2月收治的200例患者为研究对象,分析临床特点、血清分型及耐药性.结果 非儿科与儿科分离肺炎链球菌对青霉素G耐药率分别为23株(46.00%)与115株(76.67%),差异有统计学意义(x2=19.8322,P<0.05);两者对其他9种抗菌药物耐药率对比差异无统计学意义(P>0.05).结论 目前肺炎链球菌耐药问题十分严重,应提高实验室对肺炎链球菌的分离鉴定能力,并加大研究肺炎链球菌耐药机制,合理使用抗菌药物.
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常用消毒剂对临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的杀灭效果
目的 观察常用消毒剂对临床分离铜绿假单胞菌的杀灭效果.方法 采用悬液定量杀菌试验方法,对含氯消毒泡腾片、碘伏和戊二醛等3类消毒剂杀灭铜绿假单胞菌的效果进行了实验室检测,同时与标准菌株作平行比较.结果 155株临床分离的铜绿假单胞菌对19种抗生素存在不同程度的耐药.含氯消毒泡腾片、戊二醛、碘伏对临床分离的铜绿假单胞菌的小抑菌浓度依次为125、31、50 mg/L,对标准菌株小抑菌浓度依次为188、31、50mg/L.以含有效氯500 mg/L泡腾片、125 mg/L戊二醛和100 mg/L碘伏对悬液内铜绿假单胞菌临床株和标准株作用10 min,杀灭率均达100%.结论 小抑菌浓度测定临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌对含氯消毒剂抗性略高于标准株,3种消毒剂对临床分离菌株与标准株杀灭效果基本一致.
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医院不同来源金黄色葡萄球菌耐药性比较
目的 了解医院不同来源的金黄色葡萄球菌耐药性,为有效控制医院感染和临床用药提供依据.方法 采用纸片扩散法,对本医院临床分离与医院环境中分离的金黄色葡萄球菌的耐药性进行了检测和比较.结果 医院环境中分离与临床分离的金黄色葡萄球菌对万古霉素均100%敏感.医院环境中分离的25株金黄色葡萄球菌对头孢西丁、氯霉素、环氧沙星、克林霉素、红霉素、庆大霉素、青霉素、四环素、甲氧苄啶、利福平等10抗生素耐药率均低于临床病人标本分离的30株金黄色葡萄球菌.结论 医院环境中和病人标本分离的金黄色葡萄球菌对临床常用抗生素的耐药性存在差别,病人标本分离菌株耐药性更强.
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铜绿假单胞菌抗药基因检测及其对消毒剂抗性研究
目的 研究临床分离的铜绿假单胞菌携带的抗药基因情况及其与消毒剂的抗性关系和水平.方法 采用PCR方法和肉汤稀释法分别检测临床分离铜绿假单胞菌qacE△1-SulⅠ基因和对消毒剂抗性变化,并与铜绿假单胞菌标准菌株进行了平行比较.结果 临床分离的6株铜绿假单胞菌中,有5株检出qacE△1-SulⅠ基因阳性,抗药基因携带率达到83%以上.醋酸氯己定对6株临床分离铜绿假单胞菌的MIC值为7.8 mg/L,与标准菌株相同;对氯间二甲苯酚对其中1株临床分离株的MIC高于标准菌株,但有2株低于标准株;苯扎溴铵对6株临床分离的铜绿假单胞MIC均低于标准株;聚维酮碘对5株qacE△1-Sul Ⅰ基因阳性菌株的MIC值与标准菌株相同,但抗药基因阴性菌株的MIC值低于标准株.结论 临床分离的铜绿假单胞菌多数携带qacE△1-Sul Ⅰ基因,该抗药基因的携带与其对消毒刺的抗性有一定的相关性.
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水痘-带状疱疹病毒临床分离株基因特征分析
目的 运用分子生物学方法对水痘或带状疱疹患者皮肤水疱液及水痘疫苗中分离得到的水痘-带状疱疹病毒(VZV)株进行基因特征分析.方法 从水痘疫苗、水痘或带状疱疹患者的皮肤水疱液中分离VZV,然后利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性对病毒株的ORFs6、38、62进行分析,同时测序分析ORFs 1、31、51和62中的单个核苷酸多态性位点.结果 4种疫苗酶切结果均为Alu Ⅰ~-Pst Ⅰ~-Sma Ⅰ~+ BssHⅡ~+ Nae Ⅰ~+,49株VZV临床分离株中Alu Ⅰ~+ Pst Ⅰ~+Sma Ⅰ~-BssHⅡ~-Nae Ⅰ~-占96%(47株),Alu Ⅰ~-Pst Ⅰ~-Sma Ⅰ~+ BssHⅡ~+占2%(1株),Alu Ⅰ~+ Pst Ⅰ~-Sma Ⅰ~-BssHⅡ NaeⅠ占2%(1株),其中1例患者的临床分离病毒株与疫苗一致;测序分析显示不同疫苗核苷酸序列之间存在差异,分离得到的疫苗株病毒序列与Varilrix一致.结论 存在疫苗引起水痘的情况,测定ORFs 6、62中的限制性片段长度多态性能够区分疫苗株和野毒株,对ORFs 1、31、51和62中的单个核苷酸多态性位点进行分析可追踪疫苗致病的病毒株来源.
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黄连素对结核分枝杆菌的体外抑菌作用
黄连是一味临床常用中药,其主要有效成分黄连素对某些革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌生长有抑制作用,其中对痢疾杆菌的作用强[1].黄连素在临床上主要用于治疗胃肠炎、菌痢、疖疮、化脓性中耳炎和结膜炎[2].有报道表明,黄连煎剂1:2 500对人型结核杆菌有抑制作用,对兔及豚鼠的实验性结核病的疗效不显著,大剂量时对小鼠有效[3].汪仲元测定过黄连素对结核菌的抑制能力,发现1:4000浓度对结核菌有抑制作用[4].邵春源等报道,中药黄连对豚鼠实验性结核病有一定疗效[5].上述研究均采用人型结核杆菌标准株或BCG疫苗株,尚未见到结核杆菌临床分离株对黄连素的敏感情况报道,我们对黄连素进行了结核分枝杆菌的体外抑菌活性研究,现报告如下.
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全自动荧光标记DNA测序法检测利福平耐药结核杆菌rpoB基因突变
为研究我国分离的结核杆菌临床分离株利福平(Rifampin,RFP)耐药表型与rpoB基因突变的关系,应用全自动荧光标记DNA测序方法对7株RFP耐药株及1株RFP敏感株的rpoB基因突变集中区域进行了序列分析,并与欧美日文献报道结果做了对比.
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沈阳地区肺炎支原体分离株P1蛋白基因限制性酶切图谱分型研究
采用P1基因PCR扩增产物酶切图谱分析方法对沈阳地区分离的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)菌株进行分型,以便了解本地区MP的流行情况,为临床诊断提供依据。 MP临床分离株的分离和鉴定:取临床诊断为肺炎支原体肺炎患儿的咽拭子标本放3ml支原体肉汤培养基置37℃培养7~10?d,分别转种于支原体肉汤培养基和支原体固体培养基,用血球吸附实验和MP生长抑制试验鉴定分离株。结果:6株临床分离株血吸附实验结果阳性。用MP感染阳性患者的血清做MP生长抑制实验,6株分离株亦均呈现阳性结果。
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幽门螺杆菌临床分离株flaA和flaB基因的克隆、表达和鉴定
所有幽门螺杆菌(Hp)菌株均有鞭毛,由染色体基因组中的flaA和flaB两个基因编码,全长分别为1 533bp和1 545bp,其核苷酸或氨基酸序列高度保守,与其它细菌鞭毛蛋白无抗原交叉,多数Hp感染者血清中可出现FlaA和FlaB抗体[1],因而FlaA和FlaB可作为基因工程疫苗和诊断试剂盒的候选抗原.我们构建了Hp临床菌株Y06的高效原核表达系统,鉴定了重组FlaA(rFlaA)和重组FlaB(rFlaB)抗原性和免疫反应性,检测了Hp临床分离菌株FlaA、FlaB抗原表达和感染者血清抗体情况.
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志贺菌临床株喹诺酮类耐药与gyrA和parC基因点突变
近年来,肠杆菌科细菌对喹诺酮类耐药不断增加,国内外均有报道对喹诺酮类耐药的志贺菌,本文以志贺菌为例,一是了解和掌握杭州市志贺菌临床分离株喹诺酮耐药的流行趋势,对1998-2007年杭州地区分离到的202株志贺菌进行药敏实验,与2005年全国志贺菌药敏监测点进行比较[余华丽,常昭瑞,张立实,等.国家监测点2005年志贺菌菌型分布和药敏结果 分析.中华流行病学杂志,2007,28(4):370-373],分析志贺菌耐喹诺酮类分布情况,预测志贺菌耐喹诺酮类药物的发展趋势.二是探讨志贺菌临床分离株喹诺酮类耐药机制.
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质粒介导16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌临床分离株的流行情况研究
到目前为止,在革兰阴性杆菌中已发现AnnA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA 6种16S rRNA甲基化酶,且编码这些酶的基因通常和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因共处一个质粒上,通过质粒在不同的菌株之间播散~[1-4].RmtC型16S rRNA甲基化酶首次在奇异变形杆菌中被发现~[4],但16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌中的流行情况还不清楚.本研究的目的是对从我院2004年5月至2007年9月临床标本中分离的198株奇异变形杆菌进行16SrRNA甲基化酶筛查,并对其转移机制进行研究,现将结果报道如下.
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4株金黄色葡萄球菌临床分离株的多位点测序分型
多位点序列分析(Multilocus Sequencing Typing, MLST)是近年报道的一个具有很高分辨能力的分子生物学方法,它的主要优势是已经建立了有大型数据库的国际网站http://www.mlst.net,可以直接将实验结果提交数据库与已知的流行株进行比较,分析不同时间不同地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)临床分离株的遗传相关性.本研究对从天津分离的4株金葡菌临床株进行MLST分型,并与国际流行克隆株比较,了解它们的遗传背景和可能的来源.
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结核杆菌异烟肼耐药与katG基因突变分子的关系
近年来,全球结核病疫情回升,结核病依然是一个全球性的、严重的公共卫生问题和社会问题.异烟肼(isoniazid,INH)是治疗结核病的主要一线药物之一,2000年第4次结核病流行调查资料显示,INH的耐药率达17.6%,仍居第一位.故结核分枝杆菌对INH耐药的问题备受关注.新疆是我国耐多药结核病(MDR-TB)的高发区,研究新疆结核杆菌耐INH的机制,建立一种对临床分离株耐药的快速检测手段,是临床迫切需要解决的问题.
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幽门螺杆菌毒力基因cagA、vacA与胃十二指肠疾病的关系
国际上已有很多国家对本国幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)分离株的vacA基因进行了研究和分析。Atherton等曾提出Hp vacA基因镶嵌型模型,将信号序列分为三型,中间序列分为两型〔1〕,但来自欧洲和日本的报告显示不同地区Hp分离株具有较高多态性,具有地区、人群相关性特点。然而,目前国内尚未见这方面的研究报告。为了解我国Hp临床分离株vacA基因型特点以及不同vacA基因同胃、十二指肠疾病的关系以及cagA基因同Hp毒力的关系,本实验进行了以下研究。
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深圳地区小儿肠道病毒感染的核酸检测分析
为了解深圳地区肠道病毒(EV)的感染流行情况和病毒分型特征,我们采用检测EV的套式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)方法进行EV感染检测,并对临床分离株5′端非编码区(5′UTR)基因序列进行分子进化树分析.
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巨细胞病毒感染对血管内皮细胞脂质体形成的影响
近年来的研究显示动脉粥样硬化有较高的巨细胞病毒(CMV)感染率[1],其病变部位存在大量的CMV DNA,并且,CMV感染诱导产生细胞因子影响宿主的脂肪代谢,使血清胆固醇水平增高,导致胆固醇在动脉粥样硬化斑的堆积,终引起动脉粥样硬化.血管内皮细胞损伤和功能改变是动脉粥样硬化发生的重要基础,然而,CMV诱导动脉粥样硬化的分子病理机制仍不清楚.本研究用CMV临床分离株体外感染主动脉细胞,观察感染后细胞内脂质体的形成,推测CMV对动脉粥样硬化病变局部细胞内脂肪代谢的影响.