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医院预防保健科在甲型H1N1流感流行期间的预防及感染控制体会
甲型H1N1流感为一种新型呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒株,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感病毒的基因片段[1],自2009年3月以来,此病毒迅速在全球范围内蔓延,其传播力之强、传播速度之快,在历史上比较少见,现将预防感染及感染的控制体会介绍如下.
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基因芯片技术(下)
3 基因芯片技术的应用3.1 DNA序列测定3.1.1 原理[5] 基因芯片测序采用的是杂交测序(SBH)的原理.该技术包括:末知序列的DNA与大量的短链寡核苷酸探针杂交;所形成完整的双链体的鉴定与分析.如对于一种12碱基的靶基因片段,假设其核苷酸顺序为5'-AGCCTAGCT GAA-3'.用它与一组8个碱基完全排列组合的寡核苷酸探针群混合杂交.在这一组由总数为48=65536种8个碱基的寡核苷酸组成的完全探针群中,仅有5种会同靶基因片段形成完全互补的双链分子.根据这5种发生了完全杂交的8个碱基的寡核苷酸之间重叠序列的线性关系,可推算出这段l2个碱基的靶基因分子的核苷酸顺序.
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基因芯片技术(上)
1概述1.1基因芯片定义[1~4]基因芯片(Gene Chip),又称DNA 芯片、DNA微阵列(DNA microarray),包括寡核苷酸微阵列(Oligo-microarray)及cDNA microarray,是将大量的DNA片段按预先设计的排列方式固化在载体表面,并以此作为探针,在一定的条件下,与样品中待检测的靶基因片段杂交,通过检测杂交信号,实现对靶基因的存在、含量及变异等信息的快速检测.
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甲型H1N1流感确诊病例的护理措施与医院感染管理
甲型H1N1流感是一种新型呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒株,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片段[1].2009年3月,在墨西哥、美国等地相继发现人感染甲型H1N1流感病例,并导致上百人死亡[2].
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1例重症甲型H1N1流感患者的护理
2009年3月,墨西哥暴发"人感染猪流感"疫情,并迅速在全球范围内蔓延.此次流感为一种新型呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片段[1].我国大陆发现的病例大多为输入性病例,绝大多数症状较轻,通常表现为流感样症状.甲型H1N1流感患者和无症状感染者为主要传染源[1].我院2009年7月11日收治1例重症甲型H1N1流感并发肺炎的患者,经过14d的治疗护理,患者于2009年7月25日康复出院,现报道如下.
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人疱疹病毒8型相关性恶性肿瘤
一、HHV-8与Kaposi肉瘤等人类恶性病变的相关性近年,Kaposi肉瘤(KS)作为并发于HIV感染末期艾滋病的代表性恶性肿瘤,有发病增加的趋势.KS的临床亚型分为:经典型、非洲型、免疫抑制型和艾滋病相关型.其实,不管有否HIV感染,任何KS亚型的人疱疹病毒(HHV)-8基因片段检出率均高,反之HIV感染但非KS组织者,其检出率却极低,故现多认为HHV-8乃是一切亚型KS的共同原因病毒.
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DNA芯片技术及其在医学上的进展
1 DNA芯片技术DNA芯片又称基因芯片(Gene Chips),DNA微集阵列(DNA Microarrys)等.它交叉综合了物理学、化学、微电子学与生物学的高新技术,把大量基因探针或基因片段按特定排列方式固定在硅、玻璃、塑料或尼龙膜载体上,形成致密、有序的DNA分子点阵.因固相载体常用硅玻片或硅芯片,故称其为DNA芯片[1].一般认为DNA芯片技术主要由四大部分组成.
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bFGF发酵中以乳糖为诱导剂初探
重组牛碱性成纤维细胞生长因子(融合蛋白,bFGF)是被广泛应用的基因工程产品.在bFGF发酵生产中所采用的菌种含有乳糖操纵子,对抗生素具有抗性的工程菌.常用方法采用IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)做为诱导剂,可调节Lac启动子,使目的基因片段得以表达获得所需要的目的蛋白.
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浅谈IL-37 b与类风湿关节炎的关系
IL-37是IL-1家族第7个成员( IL-1 family 7, IL-1 F7),初是2000年利用计算机序列分析发现鉴定的一个细胞因子,2010年被 Nold 等人命名为IL-37[1]。人的 IL-37基因定位于第2号染色体上[2],结构与其他IL-1家族成员具有高度同源性。根据其基因片段上外显子的不同可组成五个剪切亚型(IL-37a-e),而每种亚型的表达都有其明显的组织特异性。 IL-37 b是分子量大的亚型,也是其主要的效应亚型,包括6个外显子中的5个(1、2、4、5、6),位于N端的外显子1和2能够编码一种前结构域,它包含了半胱氨酸天冬氨酸酶-1( caspase-1)的酶切位点,在caspase-1的酶切作用下, IL-37 b 由细胞外向细胞核内转移[3], IL-37b含有的外显子4~6能编码β-三叶草二级结构,IL-37b被认为是具有生物学功能的IL-37亚型,有研究表明试验状态下IL-37b能够形成同源二聚体的形式[4],已有研究证明IL-37 b与IL-18、IL-18 BP ( IL-18结合蛋白)和IL-18 Rα( IL-18受体)相互作用,以非竞争性结合形成复合体,抑制了 NF-κB 和 MAPK 等途径,使 IFN-γ的合成下降,对IL-1家族受体后信号传导产生负性调节作用,但是IL-37 b对IL-18的活性并未产生影响[4-6]。成熟的IL-37b还可以进入细胞核与Smad3结合形成复合体,通过调节基因转录抑制促炎因子的产生[7]。因此科学家推测它在细胞内和细胞外均具有生理活性[8]。
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抗BrdU单克隆抗体的制备及初步鉴定
溴脱氧尿嘧啶核苷(Bromodeoxyuridine,BrdU)是DNA前体胸腺嘧啶核苷的类似物.通过检测BrdU掺入S期细胞DNA的基因片段,可避免用同位素标记所产生的放射性污染等副作用.本文在过碘酸氧化法偶联抗原的基础上,已制备出具有均一分泌活性的抗BrdU单抗--1aB3、3aD9、4aF8,并经过初步鉴定.
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禽流感病毒的变异进化及其预防控制
流感病毒属于正粘病毒科,为有包膜单链负股RNA病毒,其基因组由7或8个基因片段组成.流感病毒包膜上有两种重要的表面蛋白,血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuramidinase,NA),尤其是HA分子,除了能够和宿主细胞表面的HA受体特异性结合、介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合外,也是机体免疫系统识别和攻击的主要靶点[1].
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破伤风毒素全基因片段PCR扩增、克隆和序列分析
目的对破伤风毒素全基因片段扩增、克隆和测序,以便有效利用.方法根据A、B、C 3个片段的基因序列,分别设计上游和下游引物,采用PCR扩增,并克隆3个片段,进行序列测定.结果所克隆的基因(AF389424)与GenBank中的基因序列比较变异较小,C片段基因与国内克隆株AF154828相同.结论为进一步研究、利用奠定基础.
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生物芯片技术及其应用
生物芯片是90年代中期发展起来的一种具有划时代意义的微量分析技术。它是一种综合了分子生物学、免疫学、半导体微电子、激光、化学染料等领域的新科学的技术。 初的生物芯片主要的目标是用于DNA序列的测定、基因表达谱鉴定和基因突变体的监测分析,所以一开始被称为蹦A芯片或基因芯片(Gene chip或DNA Microarray)。但随着科学技术的发展,这一技术已扩展到免疫反应、受体结合等非核酸领域,如近来发展的蛋白质芯片(Protei Microar-ray)。所以按现状改称生物芯片更符合发展的趋势。 生物芯片技术是将大量的基因探针、基因片段或抗原(抗体)按特定方式固定的排列在特制的载体(如玻片)上…,在特定条件下与待检样品进行作用,通过精密的扫描仪器进行记录、检测、分析的一种技术。 一、生物芯片概况 生物芯片技术从制做原理和应用可分为基因芯片、蛋白质芯片、Biaco~技术等几个类型,本文仅就基因芯片和蛋白质芯片综述如下。
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甲型H1N1流感病房的消毒隔离
2009年3月,墨西哥暴发"人感染猪流感"疫情,并迅速在全球范围内蔓延.世界卫生组织(WHO)初始将此型流感称为"人感染猪流感",后将其更名为"甲型H1N1流感".6月11日,WHO宣布将甲型H1N1流感大流行警告级别提升为6级,全球进入流感大流行阶段.此次流感为一种新型呼吸道传染病,其病原为新甲型H1N1流感病毒株,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段[1].甲型H1N1流感病人和无症状感染者为主要传染源[1].
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8p杂合性缺失与膀胱肿瘤的关系
肿瘤遗传学和分子生物学研究表明,癌症的发生是由癌基因的激活及抑癌基因失活的结果,而抑癌基因的失活可能在其中起着更为关键的作用.抑癌基因(tumor suppressor gene)是能够抑制细胞的恶性转化,对正常细胞的增殖起负性调节的基因.抑癌基因的失活常常表现为一个等位基因丢失(allelic loss)和另一个存留等位基因(retained allele)突变.其中,等位基因丢失就是由肿瘤中常见的染色体区域或节段缺失所致,它同时还会伴有抑癌基因座位相邻区域的杂合性缺失(loss of heterozygosity, LOH).LOH是指肿瘤基因中特定染色体上某种DNA多态标记的等位基因片段由同一患者正常组织基因组的两种变成一种,即等位基因型由杂合子变成纯合子.LOH是肿瘤细胞中染色体缺失的表现.
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EcoRI酶切柯萨奇B3病毒基因片段的原子力显微镜观察
以往对生物大分子的形态研究主要依靠电镜、X射线衍射、核磁共振等方法,这些技术都有一定的局限性.新近发展起来的原子力显微镜(AFM)是一种具有原子级分辨率的超微结构研究工具,与传统手段相比,具有分辨率高、制样简单以及可以在接近生理条件下成像等优点,因此在生物结构的研究中具有独特优势.本研究通过AFM对柯萨奇B3病毒(CVB3)基因片段的酶切观察,探讨AFM在生物大分子领域的应用前景.
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猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究
目的研究猴免疫缺陷病毒(SIV)外膜糖蛋白(envGP)基因片段与病毒复制功能的关系。方法利用两病毒株共有的内切酶位点,将非致病性SIVmac142株envGP区的DNA片段与致病性SIVmac 239株的对应区域进行置换,构成多个重组体。RFLP和部分序列测序确定后,用等量突变病毒(3μg)转染CD4+T淋巴细胞CEM×174细胞系,用ELISA监测培养液中SIV核心蛋白P27水平的变化,以判定重组病毒的复制能力。结果与SIVmac 239株相比,SIVmac 239 envGP重组体(SIVmac 142/239envGP/142)仍保持高度的复制活性,SIVmac 239 gp41(SIVmac 142/239gp41/142)或SIVmac 239N-gp41(SIVmac 142/239N-gp41/142)的复制能力明显降低,而SIVmac 239-gp41(SIVmac 142/239C-gp41/142)重组体无复制活性。结论 envGP基因是SIVmac 239株复制能力或毒力的重要调节因素。
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志贺菌属致病的研究进展
致病岛是指细菌染色体上具有典型结构特征的基因片段,主要编码细菌毒力及代谢相关产物.志贺菌属基因组中已发现了多个致病岛,并广泛存在于该菌属的各群细菌中,与致病性和耐药性等密切相关.对志贺菌属致病岛的研究为进一步深入理解其致病机制、开发防治细菌性痢疾的新策略提供了理论依据.
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长模板聚合酶链反应技术在病毒学研究中的应用
长模板聚合酶链反应(PCR)技术是一种可扩增几个kb甚至几十个kb基因片段的PCR新技术,已被用于病毒全长基因,感染性克隆的构建,转录体的制备,病毒基因变异、分型的分析和病毒基因功能组学的研究等方面.
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急性病医疗机构耐碳青霉烯类抗生素或产碳青霉烯酶肠杆科细菌感染的诊治指南
可移动的基因片段(转座子)上,易于播散.CRKP感染使病死率增加,延长住院天数并且增加医疗费用.