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兔骨髓基质干细胞的培养与鉴定体系的建立

邓辰红;王飞;王文兰

摘要: 目的 探讨兔骨髓基质干细胞的培养与鉴定体系的建立方法与效果.方法 空气栓塞的方式处死SPF级新西兰大白兔6只,分离骨髓组织,利用贴壁培养分离纯化兔骨髓基质干细胞,多次传代后以流式细胞术检测细胞表面抗原;以BrdU标记骨髓基质干细胞,将骨髓基质干细胞注入兔颅内,分别于注射1、3周后取脑组织制作石蜡切片,进行免疫荧光染色.结果 通过贴壁法培养幼年兔骨髓细胞可获得较纯化的骨髓基质干细胞.免疫细胞化学染色显示骨髓基质干细胞中CD44+细胞率超过90%,细胞核未着色;流式细胞仪测定培养骨髓基质干细胞的CD90+细胞率为94.5%,CD34+细胞率为0.24%.BrdU标记显示得到了能够掺DNA合成期的骨髓基质干细胞,标记细胞所占的比例在40.0%以上.结论 通过贴壁法培养幼年兔骨髓细胞呈多角短梭形,可获得骨髓基质干细胞,BrdU可作为体内示踪骨髓基质干细胞的标志物之一.

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