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  • 幽门螺杆菌对胃上皮细胞的影响

    作者:马清珠;刘怀琴;王焱

    幽门螺杆菌(HP)感染是世界范围性疾病,人群中感染率高,几乎50%终生感染HP,但只有10%感染者发展为明显临床疾病[1].自1983年Warran和Mashall发现HP以来,对其与胃炎、消化性溃疡的关系已有了共识,认为HP是慢性活动性胃炎的病原菌,是消化性溃疡的重要致病因子[2].HP感染后引起胃上皮细胞的增殖与凋亡异常,终发展成胃癌.这一动力学研究已引起WHO重视,将HP列为Ⅰ类致癌原.1994年国际癌症研究机构得出HP对人类有致癌作用的结论.因此,近年来许多学者从流行病学及实验室研究证实,HP感染与胃癌发生关系密切,胃癌又是我国常见的恶性肿瘤之一,因此根除HP感染是预防胃癌发生的关键,现将其发病机制综述如下.

  • 稳恒磁场对新生小鼠肾上皮细胞影响

    作者:吴全义;端礼荣;张永康

    目的 研究稳恒磁场(SMF)对新生小鼠肾上皮细胞增殖分化的影响.方法 利用大鼠新生小鼠肾上皮细胞进行原代培养,观察不同磁感应强度的稳恒磁场(5,10,20,30,40,50,60 mT)作用下,其细胞形态学变化,从细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并与对照组进行比较.结果 经稳恒磁场作用的新生小鼠肾上皮细胞集落形成率明显减少,细胞体积小;磁感应强度为40,50,60 mT各组与对照组比较,其相对蛋白质含量明显降低(P<0.05),MDA的含量明显增高(P<0.01),SOD的活性明显降低(P<0.05),并呈强度-效应关系.结论 稳恒磁场能抑制新生小鼠肾上皮细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,导致脂质过氧化有关.

  • 原代肾上皮细胞改良培养方法

    作者:周峰;杜贤进;董长垣;张杰

    背景:目前国内对上皮细胞的研究多采用细胞株的方式,但其离体时间长,细胞易产生变异,而原代培养则与体内状态更相近,希望能为组织工程肾脏相关研究提供肾上皮细胞来源.目的:探索原代肾上皮细胞培养的条件和方法.建立一套高效快捷的原代肾上皮细胞培养方案.设计、时间及地点:单一样本观察,开放性实验,于2007-12/2008-03在武汉大学病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室完成.材料:新生2-4 d SPF级雄性SD大鼠鼠婴12只.方法:取SD大鼠,切取双侧肾脏组织,将其反复剪成约1 mm×1 mm×1 mm块,加入2.5 g/L的胰酶和0.4 g/L乙二胺四乙酸,放入37℃恒温水浴箱消化,30 min后移至200目钢网过滤,去除未消化组织块和细胞团,收集网下悬液1 000 dmin低温离心5 min,用DMEM(pH 7.2)培养基制成细胞悬液,以4×108L-1密度接种于培养瓶中,置CO2培养箱中培养.再将细胞悬液接种到一个培养瓶内,静止培养30min,镜下观察细胞部分贴壁,将培养液连同尚未J贴壁细胞一起吸到另一瓶内,继续培养,重复上述操作一次,纯化肾上皮细胞.主要观察指标:以4×108L-1密度接种于培养瓶中培养.用4 g/L锥虫蓝染色榆测肾上皮细胞的存活率,不着色者为存活细胞.并观察肾上皮细胞的形态学变化、贴壁率.结果:肾上皮细胞存活率为95.20%,4 h约60%的细胞贴壁,12 h 85%以上的细胞已经贴壁.24 h后肾上皮细胞伸出伪足呈梭形、多角形,具有胞核一两个,细胞大小均匀,生长迅速,三四天后形成细胞簇,后肾上皮细胞连接成片生长.结论:该肾上皮细胞培养方法存活率、贴壁率高,是一种可靠的肾上皮细胞培养方法.

  • 淫羊藿苷联合胚胎干细胞对造影剂肾病大鼠模型肾上皮细胞凋亡的影响

    作者:赛依帕;宋元春;刘璟;赵海燕

    目的:探讨淫羊藿苷联合胚胎干细胞对造影剂肾病(CIN)大鼠模型肾上皮细胞的作用及其可能的机制,为临床上淫羊藿苷联合应用提供实验依据.方法:选取SD大鼠50只,随机分为对照组、模型组、淫羊藿苷组、干细胞组和联合给药组,每组10只,除对照组外其他各组大鼠尾静脉注射吲哚美辛(INDO)、N-硝基-LO-精氨酸甲酯(L-NAME)和泛影葡胺建立CIN大鼠模型.检测造模前后血肌酐(Scr)值;采用半定量RT-PCR和Western blotting法检测细胞凋亡相关因子p38MAPK和caspase 3 mRNA和蛋白的表达,流式细胞术定量检测肾上皮细胞凋亡率.结果:Scr测定,注射造影剂48 h后,大鼠Scr值明显升高,提示造模成功.与模型组比较,联合给药组大鼠Scr值明显下降(P<0.05).与模型组比较,淫羊藿苷组、干细胞组和联合给药组大鼠p38MAPK和caspase-3 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);联合给药组大鼠肾上皮细胞凋亡率明显低于淫羊藿苷组和干细胞组(P<0.05).结论:联合给药对CIN模型大鼠的肾上皮细胞有保护作用,其作用机制可能与抑制细胞凋亡通路中相关因子有关.

  • TT病毒的分类及致病性研究

    作者:吴新刚;陆淼泉

    TT病毒是近年来新发现的一种肝炎相关病毒,隶属圆环病毒科,迄今已确认了至少28种基因型.目前,人们对TT病毒的致病性存在很大的争议,它对肝脏确切的致病作用尚待进一步研究证实.近的研究提示,TT病毒与呼吸系统疾病有一定相关性,其开放阅读框架产物可损害肾上皮细胞.

  • TT病毒分子生物学研究进展

    作者:吴新刚;王晓燕;陆淼泉

    TT病毒属圆环病毒科,其基因组为单链负股环状DNA,全长约3.8kb,由编码区和非编码区组成,前者至少含有6个公认的开放阅读框架。TT病毒以滚环复制方式主要在肝细胞和造血细胞中复制,其转录产物包括3.0、1.2、1.0kb等3种剪接mRNA。TT病毒的衣壳蛋白由3.0kbmRNA转译,而1.2kb、1.0kb mRNA表达产物为非结构蛋白,对转录过程起调节作用。近,有研究发现,TT病毒开放阅读框架表达一种可能对肾上皮细胞有损伤作用的类鱼精蛋白。

  • 尿液有形成分染色检查法的选择

    作者:顾可梁

    尿液有形成分检查是指在尿中检出管型、各种病理意义的颗粒,如红细胞、白细胞、肾上皮细胞、细菌等成分的检查,以作为完整尿液分析不可缺少的重要组成部分,它对泌尿系统等疾病的诊断、定位、鉴别、预后判断、药物治疗监测及健康人员筛查等有重要意义[1].

  • 76例血尿患者尿沉渣红细胞形态分析(摘要)

    作者:王中东;黄麦华;王学勤

    本文用普通显微镜观察血尿患者尿沉渣各种形态红细胞及相关成分,发现异型红细胞在肾性和非肾性血尿鉴别中具有特殊的意义,同时尿蛋白浓度与肾上皮细胞和管型的出现呈正相关.

  • 骨桥蛋白在高钙促进大鼠肾上皮细胞与草酸钙晶体黏附中的作用

    作者:席启林;刘喆;侯建全;欧阳骏;浦金贤;刘安定;王少刚;叶章群

    目的 探讨骨桥蛋白(OPN)在高钙尿致含钙肾结石形成中的作用及机制.方法 根据成人及大鼠高钙尿诊断标准,钙干预浓度分别为0.1、0.3、0.6 g/L,作用于大鼠肾上皮细胞(NRK),检测其对NRK细胞增殖、分泌OPN及OPN基因表达的影响;构建有效沉默OPN基因表达的慢病毒载体[OPN-RNA干扰(RNAi)],感染NRK细胞后应用高钙刺激,检测细胞黏附的一水草酸钙晶体量的变化.结果 0.3、0.6 g/L钙刺激NRK细胞6、24、48 h后,3个时间点检测NRK细胞增殖均较空白对照组明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05);3个浓度钙刺激3、6、24h后OPN分泌量均较空白对照组显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);3个浓度干预3h和6h两个时间点NRK细胞OPN基因mRNA和蛋白水平均明显升高,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);成功构建OPN-RNAi慢病毒载体,病毒滴度为6×108 TU/ml.OPN-RNAi组、空病毒载体组和空白对照组分别用0.6 g/L钙干预24 h后细胞黏附的一水草酸钙含量(以钙浓度表示,mg/L)分别为19.25±3.71、27.22±3.82和31.91±1.15;OPN-RNAi组细胞晶体黏附量较空病毒载体组和空白对照组均显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 OPN可能介导高钙促进NRK细胞与一水草酸钙晶体的黏附.

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