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内毒素对可吸入颗粒物所诱发的巨噬细胞毒性和前炎性细胞因子mRNA表达的影响
目的 探讨可吸入颗粒物(PM10)所诱发的巨噬细胞毒性和前炎性细胞因子mRNA表达的改变与PM10中内毒素成分的关系.方法 采用鲎试剂终点显色法测定未经处理的PM10(PM10+)和经130℃高热处理24h的PM10(PM10ˉ)中内毒素含量,将PM10+和PM10ˉ以不同浓度(0、25、50、100、200、400μg/ml)分别染毒小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞24 h,采用MTT法测定细胞存活率,选取0、25、50、100、200μg/ml的PM10+和PM10ˉ分别染毒RAW264.7细胞6、12、24 h,采用反转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)测定染毒各时相RAW264.7细胞白介素-6(IL-6)mRNA和肿瘤坏死因子-α(TNF-a)mRNA的表达水平.结果 PM10+和PM10中内毒素含量分别为(58.7±6.4)EU/mg和(2.0±0.1)EU/mg.PM10+和PM10ˉ对RAW264.7细胞的存活率影响不明显.染毒剂量在50μg/ml以上时,PM10+和PM10ˉ均可使RAW264.7细胞IL-6mRNA和TNF-amRNA表达增加(P＜0.05),随着染毒剂量的增加,IL-6mRNA和TNF-a mRNA的表达均呈升高趋势,染毒6 h后,PMI0ˉ染毒组与PM10+染毒组相比,IL-6mRNA的表达减少(P＜0.05).结论 PM10对巨噬细胞的前炎性细胞因子mRNA表达的影响与其内毒素成分有关.
关键词： PM10 RAW264.7细胞 IL-6 mRNA TNF-α mRNA 内毒素 -
丹参多酚酸盐对实验性肝硬化大鼠肝组织TNF-α和IL-6mRNA的表达影响
目的:观察丹参多酚酸盐对肝硬化大鼠肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达影响.方法:SD大鼠40％ CCL4-橄榄油溶液建立肝硬化大鼠模型,随机分成4组:模型组、丹参多酚酸盐治疗低、中、高剂量组,分别每天腹腔注射葡萄糖溶液、丹参多酚酸盐12、24、48 mg/kg 2周.另取10只大鼠正常对照.治疗结束后观察各组大鼠死亡率,肝组织外观,光度法测门静脉血内毒素水平,光镜下观察病理形态学改变,Real-time RT-PCR法检测肝脏组织TNF-α和IL-6 mRNA的表达变化.结果:模型组大鼠死亡率42.86％,丹参多酚酸盐高剂量组无死亡率；与正常组比较,模型组内毒素水平显著升高(P＜0.01),经丹参多酚酸盐治疗后低剂量组内毒素水平降低(P＜0.05),丹参多酚酸盐中剂量组与高剂量组显著降低(P＜0.01).丹参多酚酸盐治疗组肝脏色泽、质地、边缘、表面光滑度及组织病理较模型对照组有明显改善.高剂量组TNF-αmRNA和各治疗组IL-6mRNA表达量与模型组相比有显著统计学差异(P＜0.01),中剂量组TNF-αmRNA表达量与模型组相比有统计学差异(P＜0.05).结论:丹参多酚酸盐降低肝硬化大鼠死亡率,改善肝硬化大鼠肝组织炎症程度,抑制肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达.
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心乐胶囊对病毒性心肌炎模型小鼠TNF-α、TGF-β1 mRNA表达的影响
目的:通过观察心乐胶囊对CVB3致病毒性心肌炎BABL/c小鼠TNF-α、TGF-β 1 mRNA表达影响,探讨心乐胶囊治疗病毒性心肌炎的作用机制和疗效.方法:健康雄性BABL/c小鼠60只,随机数字表法分为6组:空白组、模型组、玉丹荣心丸组及心乐胶囊高、中、低剂量组,每组10只.利用原位杂交技术观察心乐胶囊对CVB3致病毒性心肌炎小鼠TNF-α、TGF-β1mRNA表达影响.结果:与空白组比较,模型组小鼠心肌组织TNF-αmRNA表达增高,有显著差异(P＜0.05),模型组小鼠心肌组织TGF-β1mRNA表达增高,有显著差异(P＜0.01);与模型组比较,玉丹荣心丸组、心乐胶囊各剂量组均可降低心肌组织TNF-αmRNA表达,有显著差异(P＜0.01),玉丹荣心丸组、心乐胶囊各剂量组均可降低心肌组织TGF-β1mRNA表达,有显著差异(P＜0.05);与玉丹荣心丸组比较,心乐胶囊各剂量组均可使小鼠心肌组织TNF-α、TGF-β1mRNA表达降低,有显著差异,其中以心乐胶囊高剂量组为明显(P＜0.01)结论:(1)心乐胶囊能够明显地降低病毒性心肌炎小鼠TNF-α、TGF-β1mRNA表达.(2)心乐胶囊可以减轻心肌细胞炎症反应,抗心肌纤维化,保护心肌,减轻心肌的损伤.
关键词： 心乐胶囊 病毒性心肌炎 TNF-α mRNA TGF-81 mRNA -
外周血单个核细胞TNF-α基因表达与哮喘相关表型
目的:探讨外周血单个核细胞( PBMC )TNF-α基因mRNA表达与哮喘严重程度、临床病理及相关影响因素的关系.方法:采用实时荧光定量PCR技术检测67例哮喘病人和25例健康对照PBMC中TNF-α mRNA表达水平,分析其与哮喘控制程度、血浆TNF-α浓度、嗜酸性粒细胞百分比(EOS％)、血浆总IgE浓度和哮喘相关影响因素的关系.结果:经方差分析和SNK-q检验,哮喘未控制组PBMC中TNF-α mRNA表达水平高于正常组(P＜0.01)、控制组(P＜0.01)和部分控制组(P＜0.05).相关分析显示哮喘病人TNF-α mRNA表达与血浆TNF-α浓度和EOS％呈正相关,相关系数分别为r=0.584(P ＜0.01)和r=0.29(P＜ 0.05),有吸烟史的哮喘病人TNF-αmRNA表达水平高于非吸烟病人(P＜0.05).结论:哮喘病人PBMC中TNF-α mRNA表达水平与哮喘的控制程度呈负相关,与血浆TNF-α浓度呈正相关,PBMC中TNF-α mRNA表达水平与血浆TNF-α浓度可作为哮喘控制程度的参考指标.
关键词： 哮喘 TNF-α mRNA PBMC 实时荧光定量PCR 表型 -
新类固醇药物对阻塞性黄疸大鼠肝脏TNF-α mRNA表达的影响
目的研究21-氨基类固醇(U-74389G)对阻塞性黄疸大鼠发生内毒素血症时的保护作用.方法将大鼠随机分为3组:(1)假手术组;(2)胆总管结扎组;(3)胆总管结扎+生长激素组.每组在两周之后腹腔内注射内毒素0.02mg/kg,第三组在给予内毒素之前30min和之后30min分别静脉注射U-74389G 3mg/kg和1.5mg/kg.在给予内毒素之后1、2、4h分别计数各组大鼠的存活率;检测各组大鼠血清TNF-α水平;取肝组织测定肿瘤坏死因子TNF-α mRNA表达水平.结果阻黄大鼠给予内毒素之后1、2h血清TNF-α水平明显升高,肝脏中TNF-α mRNA表达也显著升高,在2、4h后大鼠存活率降低,给予U-74389G可逆转这些改变.结论 U-74389G可降低肝脏中TNF-αmRNA的表达,在阻黄大鼠发生内毒素血症时起保护作用.
关键词： 类固醇 阻塞性黄疸 肝脏 TNF-α mRNA -
DMN诱导的小鼠慢性中毒性肝炎过程中IL-18、TNF-α mRNA及Fas mRNA的动态变化
目的观察二甲基亚硝胺(DMN)所致小鼠慢性中毒性肝炎时肝组织损伤与IL-18、TNF-α mRNA、Fas mRNA表达的动态变化.方法取30只小鼠作为模型组,腹腔注射0.1%的DMN14 mg/kg,每隔4 d注射1次,共注射5次.分别在第1、3、5次注射后2 d(即实验第3 d、11 d、19 d)及停止注射14 d(即实验第31 d)眼球取血后分批处死动物(每次处死6只),检测血清IL-18、肝组织TNF-α mRNA及Fas mRNA的表达.对照组6只小鼠,腹腔注射生理盐水,每隔4 d 1次,共5次,于第31 d处死,检测指标同模型组.结果小鼠第一次注射DMN后肝细胞气球样改变为主,炎症、坏死不明显.随着注射次数的增加,炎症、坏死逐渐加重.停止注射后,肝组织逐渐修复.血清IL-18、肝组织TNF-α mRNA及Fas mRNA水平随着炎症、坏死的加重而升高,且呈正相关关系.结论 DMN所致小鼠中毒性慢性肝炎的IL-18、TNF-α mRNA、Fas mRNA的改变与肝组织病理改变同步,呈正相关关系,与人类肝炎时有一定的相似性.
关键词： DMN 小鼠慢性肝炎 IL-18 TNF-α mRNA Fas mRNA -
铁皮石斛多糖对RAW2647细胞分泌TNF-α的影响
目的 研究铁皮石斛多糖(polysaccharides from Dendrobium officinale,DOP)对小鼠巨噬细胞系RAW264 7细胞分泌TNF-α的影响并探讨其作用机制.方法 MTT法检测细胞活性;ELISA法检测TNF-α的分泌水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α mRNA 表达量;Western blot 技术检测胞质I-κBα 蛋白的表达量.结果 DOP在20~160 mg·L-1范围内明显促进RAW264.7细胞增殖,无细胞毒性;与空白对照组比较,DOP剂量依赖性地促进TNF-α的分泌;上调TNF-α mRNA 表达;Western blot结果显示DOP能明显降低胞质内I-κBα蛋白水平.结论 DOP能增强RAW264 7细胞分泌TNF-α,其作用机制可能与降低胞质内I-κBα蛋白水平,活化核转录因子NF-κB,诱导TNF-α mRNA的表达有关.
关键词： 铁皮石斛多糖 RAW264.7细胞 细胞增殖 TNF-α TNF-α mRNA I-κBα -
MK-801对大鼠坐骨神经缺血再灌注损伤保护作用的实验研究
目的 探讨MK-801阻断N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体与周围神经缺血再灌注损伤之间的关系及大 鼠坐骨神经缺血再灌注损伤的机制.方法 24只健康清洁级SD雄性大鼠,随机分为对照组(假手术组)、缺血组、MK-801组各8只(再灌注前15 min腹腔内注射MK-801,1 mg/kg).采用比色法检测血浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和坐骨神经诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平；光镜、电镜观察坐骨神经组织病理改变情况；RT-PCR法测定坐骨神经肿瘤坏死因子α (TNF-α) mRNA表达.结果 MK-801能明显降低大鼠血浆MDA、NO和坐骨神经iNOS水平；下调坐骨神经TNF-α基因表达;减轻坐骨神经组织病理改变.结论 兴奋性氨基酸参与了大鼠坐骨神经缺血再灌注损伤；其过程炎症细胞、炎症因子发挥着重要作用；MK-801对大鼠坐骨神经缺血再灌注损伤具有保护作用.
关键词： 坐骨神经 缺血 再灌注损伤 MK-801 TNF-α mRNA -
烫伤增强大鼠TNF-α基因表达对内毒素刺激的敏感性
目的证实严重烫伤大鼠TNF-α基因表达对内毒素(LPS)刺激敏感性增强,阐明创伤机体无明显感染条件下血清TNF-α升高的机理.方法给予同剂量LPS体内注射,观察烫伤组,烫伤休克组及其正常对照组血清TNF-α及肝脏TNF-α mRNA的变化.结果同剂量的LPS刺激后,正常对照组血清TNF-α及肝脏TNF-α mRNA升高不显著,而烫伤组,烫伤休克组血清TNF-α及肝脏TNF-α mRNA明显升高.结论 TNF-α基因表达对LPS敏感性增强,导致创伤患者TNF-α水平明显升高,提示防治创伤患者轻微感染在临床治疗休克、多功能器官衰竭中非常重要.
关键词： TNF-α mRNA 内毒素 敏感性 烫伤 -
赤雹根总皂苷对佐剂型关节炎大鼠的抗炎作用及TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达的影响
目的 观察赤雹根总皂苷(STDR)对大鼠佐剂型关节炎(AA)的治疗作用及对其炎症组织中TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平的影响,探讨STDR治疗类风湿性关节炎的作用机制,为临床应用提供实验依据.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、STDR 40mg·kg-1·d-1,80mg· kg-1·d-1,160mg·kg-1·d-1剂量组和雷公藤多苷12mg·kg-·d-1对照组.除正常对照组外,其余各组大鼠均于右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂0.1ml.造模18天后各给药组均ig给予相应药物,模型对照组ig给予等体积蒸馏水,给药21 d.于给药后第21天处死大鼠,取其足跖部,采用RT-PCR法提取炎症组织中mRNA测定TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达水平,并取膝关节滑膜组织进行病理学观察.结果 TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达水平明显著低于模型组(P＜0.05或P＜0.01),膝关节滑膜增生及炎症反应明显轻于模型组.结论 STDR对大鼠AA具有显著的治疗作用,其抑制TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA的表达可能是其治疗AA的机制之一.
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参附注射液预处理对大鼠胃粘膜细胞的保护效应及作用机制的研究
目的 观察参附注射液对大鼠急性胃粘膜病变过程中的胃粘膜保护作用及胃组织TNF-α mRNA与IL-1βmRNA表达的影响,探讨参附注射液是否通过抗炎机制发挥胃粘膜保护作用.方法 30只成年Wistar大鼠随机分成3组,正常组(A组,n=10),应激组(B组,n＝ 10),参附注射液预处理组(C组,n=10),在(20±1)℃水温下,B组、C组用浸水束缚应激法(WRIS)复制急性胃粘膜病变模型.6h后处死取胃组织标本,10x解剖显微镜下观察各组胃粘膜损伤指数(GI),采用RT-PCR技术测定各组胃组织中TNF-α mRNA与IL-1 β mRNA表达变化.结果 (1)与A组比较,B组大鼠经WRIS 6h后胃粘膜损伤严重,GI明显升高(P＜0.01)；与B组比较,C组能显著减轻WRIS后胃粘膜损伤,降低GI(P＜0.05).(2)与A组比较,B组TNF-α mRNA与IL-1 β mRNA表达显著上调(P＜0.05)；与B组比较,C组TNF-α mRNA与IL-1 β mRNA表达显著下调.(3)GI的变化与TNF-α mRNA和IL-1βmRNA的变化呈正相关(r1=0.981,r2=0.992,P＜0.05).结论 参附注射液预处理能明显下调大鼠急性胃粘膜病变过程中胃组织TNF-αm RNA与IL-1 β mRNA的表达,阻抑应激后胃粘膜炎性反应可能是参附注射液发挥胃粘膜保护作用的重要机制之一.
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慢性捆绑应激对大鼠学习记忆能力及海马TNF-α表达的影响
目的探讨学习记忆能力与海马细胞因子TNF-α的关系.方法把大鼠分为应激组和正常组,应激组大鼠每天捆绑6h,持续21d,第22d用Y迷宫测试两组大鼠学习记忆能力,用原位杂交细胞化学显示两组大鼠海马TNF-α mRNA阳性细胞.结果应激组大鼠学习记忆成绩明显下降(P<0.05),其海马TNF-α mRNA阳性细胞数明显高于正常组.结论应激组大鼠学习记忆下降与其海马相关细胞因子TNF-α有联系.
关键词： 慢性捆绑应激 TNF-α mRNA 学习记忆 -
补气通络法对大鼠腰神经根慢性炎症性损害干预作用的研究
目的:观察补气通络法(补气通络胶囊)干预腰神经根慢性炎症性损害的疗效及探讨其作用机制.方法:36只大鼠随机分成补气通络组、布时芬组、生理盐水组及非手术组各9只,建立大鼠椎间盘突出症坐骨神经损害模型,分别在手术造模3、5、7周后,观察各组神经根组织病理变化,检测大鼠腰神经根肿瘤坏死因子-α (TNF-α) mRNA、白细胞介素-1(IL-1) mRNA表达水平.结果:生理盐水组IL-1 mRNA、TNF-α mRNA表达较非手术组增高,差异均有显著性意义(P＜0.05);补气通络组IL-1 mRNA、TNF-α mRNA表达较生理盐水组、布洛芬组下调,差异均有显著性意义(P＜0.05).结论:补气通络胶囊对大鼠腰神经根慢性炎症性损害具有良好的抗炎镇痛作用,并可改善大鼠腰神经根中TNF-α mRNA、IL-1 mRNA表达水平.
关键词： 神经根慢性炎症性损害 补气通络法 TNF-α mRNA IL-1 mRNA 动物实验 大鼠 -
柴黄胃溃宁对肝郁脾虚证胃溃疡模型大鼠脾IL-6、TNF-α mRNA表达的影响
目的:探讨柴黄胃溃宁对肝郁脾虚证胃溃疡脾脏中IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响和可能疗效机制.方法:40只大鼠随机取10只作为空白组,其余30只按多因素复合模拟中医病因结合乙酸法建立模型,造模2周后,随机分为模型组、柴黄胃溃宁组和法莫替丁组,各10只,连续灌胃给药14天.用HE染色观察大鼠胃窦部溃疡的病理学改变,采用RT-PCR技术检测脾脏中IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达水平.结果:模型组大鼠血清去甲肾上腺素水平较空白组升高,5-羟色胺、D-木糖、胃泌素水平较空白组下降(P＜0.05).与正常组比较,模型组TNF-α mRNA升高(P＜0.01),IL-6 mRNA升高(P＜0.05).与模型组比较,柴黄胃溃宁组TNF-α mRNA降低(P＜0.01),IL-6 mRNA升高;法莫替丁组TNF-α mRNA、IL-6 mRNA均降低(P＜0.01).结论:柴黄胃溃宁通过下调TNF-αmRNA和升高IL-6mRNA水平调节肝郁脾虚证胃溃疡模型大鼠免疫功能.
关键词： 胃溃疡 肝郁脾虚证 柴黄胃溃宁 IL-6 mRNA TNF-α mRNA -
男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ2、leptin、TNF-αmRNA的表达与胰岛素抵抗
目的:研究肥胖患者腹部皮下脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(PPARγ2)、瘦素(leptin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA与胰岛素抵抗(IR)的关系.方法:应用RT-PCR凝胶成像半定量技术测定男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA,以及空腹血清leptin、胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBS),计算胰岛素抵抗指数(IRI),分析观察指标与肥胖之间的相关关系.结果:①肥胖组FINS、leptin、IRI、脂肪组织mRNA 、leptin mRNA及TNF-αmRNA高于非肥胖组(P＜0.05);②IRI与leptin mRNA、TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptin、BMI、FINS成正相关(P＜0.05);③以IRI为应变量,TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptin mRNA、血清leptin、BMI为自变量做多元逐步回归分析,回归方程:Y=0.358+0.813 PPARγ2 mRNA.结论:①男性肥胖患者leptin及腹部皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA、TNF-α mRNA较非肥胖者升高;②男性患者PPARγ2 mRNA与IR密切相关,可以反映IR的程度.
