猫咬伤致狂犬病1例

1 病历资料 王某,女,77岁,2008年4月初不慎被一只成年猫咬伤右踝部,当时伤口流血少许,未见其他不适,患者饮食、生活等一切如常,未注射狂犬病疫苗和破伤风抗毒素.同年7月18日晨起时,患者出现精神差、表情呆滞、咽部不适,随之出现吞咽困难、畏光、恐水、怕风等表现,即就诊于本诊所.

正常成年猫多导程视觉诱发电位研究

用平面均匀闪光和棋盘格图形翻转刺激，研究了17只正常猫的多导程视觉诱发电位(VEPs)，主要结果：(1)图形刺激引起的P-VEP波形为两个正相成分(P1和P2)夹着一个负相成分(N1)组成"W"型的波复合；而平面均匀闪光引起的F-VEP则为两个负相成分(N1和N1)夹着一个正相成分(P1)构成"M"型的波复合。这两种VEP均表现出明显的双眼总和现象，而且P-VEP的总和率大于F-VEP的。(2)P-VEP在头颅表面的分布是左右对称的，以在枕中线部位电极记录到的电位大，距离中线越远，其电位越小。而F-VEP则在中线的电位小，而两侧电极记录到的电位反而更高，分布也是左右对称的。(3)随刺激的空间频率增加，P-VEP的峰潜伏期逐渐延长；振幅则以0.1 c/deg的刺激所引起的为高，然后随刺激空间频率的升高而下降。(4)以半视野图形进行刺激，各导程的P-VEP仍为"W"型，但振幅明显低于全视野刺激，并且当鼻侧视网膜受刺激时，其反应均大于颞侧受刺激。

脊髓Ⅱ板层NOS、BDNF、GDNF阳性神经膨体的组织化学双标研究

目的:我们前面的研究已发现,脊髓Ⅱ板层有大量NOS、BDNF及少量GDNF阳性神经膨体.为观察这些神经膨体是否同时含有NOS和BDNF或BDNF和GDNF,以间接了解背根节(DRG)小细胞是否同时含有这些物质(因Ⅱ板层的膨体主要源于DRG小细胞).方法:用成年猫L3脊髓制作20 μm厚冰冻切片并分两组,一组先行NOS酶组化染色,NBT兰色反应显色,而后用BDNF抗血清(1∶500, Santa Cruz)以免疫组化ABC法行双标染色,DAB棕色反应显色.另一组则先用BDNF抗血清以免疫组化ABC法染片,DAB棕色反应呈色,再用GDNF抗血清(1∶1500, Santa Cruz)同前染片,TMB兰色反应显色.常规脱水透明封片后,观察脊髓Ⅱ板层NOS、BDNF与GDNF阳性神经膨体的单、双标情况.结果:在NOS与BDNF双标组切片脊髓Ⅱ板层,分别观察到大量兰色反应的NOS阳性神经膨体和棕色反应的BDNF阳性神经膨体,但大多为单标染色,双标者极少.BDNF和GDNF组切片阳性神经膨体的标记与NOS和BDNF组类似,均主要是大量单标的神经膨体,双标者极少.结论:Ⅱ板层内虽有BDNF、GDNF、NOS阳性神经膨体,但各自来源可能不同,即大多数DRG小细胞并非同时含有NOS和BDNF或BDNF和GDNF.提示若从神经膨体内所含物质来讲,DRG小细胞的功能类型及源于这些小细胞的神经膨体可能是不完全一致的.

成年猫备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用

成年猫L1～L7两侧背根节神经元数量的比较

5只正常成年雄性猫双侧L1～L7背根节(DRG)石蜡包埋,连续切片,显微镜观察计数,比较左、右DRG 神经元数量,为神经系统损伤后对神经元的存活和再生影响的研究提供DRG神经元计数资料.结果:1)每只动物各节段左、右DRG神经元数量比较,比率在0.70～1.26 之间,个别节段两侧有显著性差异(P＜0.01),而每只动物左、右DRG神经元总数比较,比率在0.93-1.02(P＞0.5),两侧无显著性差异.2)5只动物L1 ～L7各节段左、右DRG神经元均数比较,两侧无显著性差异(P＞0.5).结论:成年猫L1～L7各节段两侧DRG神经元数量呈对称性分布.

成年猫备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用

目的探讨成年猫部分去传入后备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用.方法切断L1、L3、L5和L7背根,术后第7 d摘取L2、 L4和L6背根节做分离细胞培养,对正常背根节、备用背根节和备用背根节加抗体封闭3个实验组中神经元存活、突起生长等情况进行观察比较.结果备用背根节组存活细胞和细胞微团数目以及神经突起长度均明显高于正常组和抗体封闭组.结论备用背根节内神经营养素-3对节内神经元有维持存活、促进突起生长的作用.

成年猫L6 DRG神经元按大小分类的形态学证据

采用成年猫L6背根节(DRG)制作20μm厚冰冻切片,测量神经元胞体平均直径以探讨神经元胞体大小与细胞类型的关系.结果:成年猫L6 DRG神经元可分3群,即大(胞体直径＞57μm)、中(42～57μm)、小(＜42μm)神经元.各占DRG神经元百分比分别是29%,22%,49%.该结果为了解成年猫L6DRG神经元的大小分类提供了标准.

CD44,CD54在成体脊髓表达

目的:观察CD44,CD54在成年猫脊髓的分布.方法:将成年猫处死后取其脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用CD44,CD54兔抗体(效价:1∶250)行ABC免疫组织化学染色.观察CD44,CD54在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:脊髓灰质内见CD44神经元阳性,阳性细胞遍布灰质各板层,阳性反应物主要见于细胞核.腹角阳性神经元明显,大小不等.背核神经元亦有阳性反应.灰、白质内未见阳性反应的胶质细胞.与CD44者比较,背核、腹角神经元仅见CD54的弱阳性反应,未见胶质细胞阳性反应,但后角Ⅰ,Ⅱ板层见大量CD54阳性神经膨体.结论:成年猫脊髓有CD44,CD54分布,提示这些神经细胞黏附分子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关.

FGF,IGF和EGF在成体脊髓的分布

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(FGF)、胰岛素样生长因子(IGF)和表皮生长因子(EGF)在成年猫脊髓的分布.方法:取脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用FGF,IGF和EGF(效价:1∶250)兔抗血清行免疫组织化学ABC法染色.观察FGF,IGF和EGF在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:FGF的免疫阳性反应物主要分布于脊髓灰质神经元,胞浆染色,腹角较为明显,Ⅱ板层也有少量阳性细胞.背核神经元也有阳性;此外,神经突起及纤维亦有阳性染色.灰、白质内还见阳性胶质细胞,白质内血管也有阳性染色.相对之,IGF和EGF在脊髓的分布相似,免疫阳性反应物主要分布于灰质内各板层神经元,胞核染色明显,胞浆亦有浅染,灰质和白质内未见阳性胶质细胞.结论:成年猫脊髓存在FGF,IGF及EGF,提示这些生长因子与成体脊髓功能有关.

Fas,FasL,Laminin,Fn在成年猫脊髓的分布

目的:观察Fas,FasL,Laminin、Fn在成年猫脊髓的分布.方法:将成年猫处死后取其脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用Fas,FasL,Laminin,Fn(效价:1∶1000,1∶250,1∶250,1∶250,)行免疫组织化学ABC法染色.观察Fas,FasL,Laminin,Fn在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:Fas阳性神经元以腹角为主,胞浆染色,背角相对较少,灰质内胶质阳性反应,细胞核染色.比较之,FasL阳性神经元遍布整个灰质,胞浆染色,未见胶质细胞阳性染色.Laminin在灰、白质内见大量血管内皮阳性染色,灰质内血管内皮的免疫阳性反应比白质强.未见神经元和胶质细胞染色.与Laminin相比较,在白质内仅见少量的血管Fn免疫反应阳性染色,只有约1/20～1/50左右,未见明显阳性神经元和胶质细胞染色.结论:在成年猫脊髓有Fas,FasL,Laminin,Fn分布,提示这些因子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关.