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神经节苷脂对重型颅脑损伤患者血清S100B蛋白和Nogo-A蛋白水平的影响及疗效观察
目的 探讨神经节苷脂对重型颅脑损伤患者血清S100B蛋白和Nogo-A蛋白水平的影响及疗效观察.方法 选择2011年1月～2013年5月浙江省萧山中医院脑病中心住院的重型颅脑损伤患者74例,将其随机分为观察组和对照组.两组予以控制颅内压、预防感染、营养脑细胞和预防并发症等治疗,有手术指征者行手术治疗.观察组加用神经节苷脂针100 mg静滴,1次/d,连用2周.观察两组治疗前后血清S100B蛋白和Nogo-A蛋白水平变化,并比较随访3个月后的临床疗效.结果 治疗2周后,两组血清S100B蛋白和Nogo-A蛋白水平[(1.15±0.24)、(0.79±0.18)、(181.15 ±42.87)、(109.16±31.92)μg/L]均较治疗前[(1.59±0.38)、(1.60±0.41)、(218.02±44.12)、(215.81±50.45) μg/L]明显下降(P＜ 0.05或P＜0.01),且观察组下降值比对照组更明显(P＜0.05).治疗后随访3个月,观察组总有效率为86.49％,较对照组的64.86％明显升高(x2=6.19,P＜0.05).结论 神经节苷脂治疗重型颅脑损伤具有较好效果,作用机制可能与其能降低血清S100B蛋白和Nogo-A蛋白水平密切相关.
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急性颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶、Nogo-A蛋白和髓鞘碱性蛋白水平的变化
目的 探讨急性颅脑损伤患者治疗前后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Nogo-A蛋白和髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的变化.方法 选择2012年1月～2013年4月浙江省萧山中医院急性颅脑损伤患者50例(病例组)予以保持呼吸道通畅、吸氧、降颅压、抗感染、营养脑细胞和预防并发症等常规对症治疗,如有手术指征者及时予以手术治疗,治疗时间为2周.另选择同期体检中心体检的正常健康者30名作为对照组.观察治疗前后血清NSE、Nogo-A蛋白和MBP水平的变化.结果 病例组患者治疗前血清NSE、Nogo-A蛋白和MBP水平[(17.12±6.75)、(201.72±56.27)、(4.79±0.72) μg/L]明显高于对照组[(5.24±1.05)、(106.54±31.19)、(1.12±0.24) μg/L],差异有高度统计学意义(t=5.12、3.10、6.10,P＜0.01).治疗2周后,患者血清NSE、Nogo-A蛋白和MBP水平[(9.12±3.07)、(147.92±40.56)、(2.64±0.92)μg/L]较治疗前[(17.12±6.75)、(201.72±56.27)、(4.79±0.72) μg/L]均明显下降,差异有统计学意义(t=3.08、2.31、2.91,P＜0.05或P＜ 0.01).结论 急性颅脑损伤患者存在血清NSE、Nogo-A蛋白和MBP水平的异常升高,可作为急性颅脑损伤患者早期诊断的敏感指标,其水平的高低可反映脑细胞损伤严重程度.NSE、Nogo-A蛋白和MBP水平的变化可作为急性颅脑损伤患者治疗疗效随访和预后观察的指标.
关键词： 急性颅脑损伤 神经元特异性烯醇化酶 Nogo-A蛋白 髓鞘碱性蛋白 -
银杏叶提取物对大鼠急性脊髓损伤后运动功能恢复及Nogo-A蛋白表达的影响
目的 研究银杏叶提取物(EGb)对大鼠急性脊髓损伤后运动功能的恢复及脊髓Nogo-A蛋白表达的影响.方法 选用健康的成年Sprague-Dawley(SD)大鼠72只,雌雄不拘,体质量250～300 g.将大鼠分为正常组、急性脊髓损伤组和急性脊髓损伤后EGb治疗组(简称EGb治疗组).采用Allen's打击方法损伤大鼠胸椎T8～T10节段,分别于术后3、7、21 d进行BBB评分和斜板实验,并取受损节段大鼠脊髓,运用Western blot方法测定各时相点Nogo-A蛋白表达量及其变化.结果 术后21 d EGb治疗组比急性脊髓损伤组BBB评分和斜板实验临界角度升高,差异有统计学意义(P<0.05).Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,急性脊髓损伤组与EGb治疗组各个时相点Nogo-A蛋白表达量均显著高于正常组(P<0.05),7 d时高,21 d有所下降,但表达量仍高于正常组.EGb治疗组在各个时间点的Nogo-A表达量显著低于急性脊髓损伤组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 EGb可促进急性脊髓损伤后大鼠运动功能的恢复,对脊髓损伤后Nogo-A蛋白表达量的升高具有明显的抑制作用.
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炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化
目的 评价炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化.方法 健康成年雄性SD大鼠120只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为两组(n=60):对照组(C组)和炎性痛组(F组).F组大鼠左侧后肢趾部皮下注射3％福尔马林0.1 ml,C组注射等容量的生理盐水.于注射后1h、1、2、3和7d时采用yon Frey纤毛测定左侧后爪机械痛阈.于各时点随机取12只大鼠处死后取损伤侧L5背根神经节和L4,5脊髓背角,分别采用免疫荧光标记法和Western blot法检测Nogo-A蛋白的表达.结果 与C组比较,F组大鼠注射后1h、1、2、3和7d时机械痛阈降低,注射后1h、2、3和7d时背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调(P＜0.05).结论 背根神经节及脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调可能在福尔马林致大鼠炎性痛形成过程中发挥重要作用.
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血府逐瘀汤对外伤性视神经损伤模型大鼠Nogo-A、GAP-43偶联蛋白组表达的影响
目的：运用血府逐瘀汤干预外伤性视神经损伤（TON）大鼠模型，观测不同时间节点视网膜神经节细胞（RGCs）数量和形态，视网膜轴突生长抑制因子-A（Nogo-A）、生长相关性蛋白-43（GAP-43）偶联蛋白组的表达变化，从而探讨该方治疗TON的作用机制。方法：健康SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、中药组、神经营养因子组和中西医结合组，分别治疗4、7、14、21、28d后处死，HE染色观察视网膜神经节细胞（RGCs）变化，免疫组化法观察视网膜Nogo-A和GAP-43蛋白表达情况。结果：治疗7d后，神经营养因子组、中西医结合大鼠视网膜节细胞数量均明显高于模型组（P＜0.01）；治疗7、14、28d，中药组大鼠视网膜节细胞数量明显高于模型组（P＜0.01）。神经营养因子组、中西医结合组大鼠治疗7d后，中药组大鼠治疗14d后，视网膜Nogo-A表达均较模型组明显降低（P＜0.01），GAP-43表达均较模型组明显升高（P＜0.01）。结论：血府逐瘀汤原方对外伤性视神经损伤大鼠有治疗作用，能够增强损伤视网膜组织中GAP-43蛋白的表达，抑制损伤相关因子Nogo-A表达，提高RGCs的存活率。
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甲基泼尼松龙对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠脑组织 Nogo-A 及其受体 NgR 蛋白表达的影响
目的 探讨甲基泼尼松龙(MP)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑组织Nogo-A及其受体(NgR)蛋白表达的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(50只).实验组大鼠通过皮下注射粗制髓磷脂碱性蛋白建立EAE模型,24只造模成功大鼠随机分为EAE组、大剂量MP(MP-H)组和小剂量MP(MP-L)组,每组8只.发病后第7 d MP-H组及MP-L组大鼠通过尾静脉注射MP(30 mg/kg,10 mg/kg),取脑前18 h、6 h各注射1次.发病后第8 d取各组大鼠脑组织,HE染色观察脑组织的细胞形态学变化;免疫组化染色检测Nogo-A及NgR蛋白的表达.结果 (1)正常对照组大鼠脑组织未见异常;EAE组大鼠脑组织可见炎性细胞浸润、血管套、脱髓鞘改变及胶质细胞增生.(2)与正常对照组比较,EAE组大鼠脑组织Nogo-A及NgR蛋白表达明显增加(均P＜0.05);与EAE组比较,MP-H组Nogo-A及NgR蛋白表达明显降低(均P＜0.05),而MP-L组Nogo-A及NgR蛋白表达尤明显变化.结论 MP治疗EAE的作用机制可能与抑制了脑组织Nogo-A及NgR蛋白的表达有关.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 甲基泼尼松龙 Nogo-A蛋白 NgR蛋白 -
针刺在促进神经再生中与Nogo-A蛋白关系初探
成熟的中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤后几乎无再生能力,其再生修复问题一直是国内外医学界研究的难题.目前公认的是由于CNS神经元所生存的外部微环境中,存在各种外源性生长促进性和抑制性因子,这些因子均能诱导生长锥塌陷,导致轴突再生失败.神经再生抑制因子中Nogo蛋白作为抑制CNS再生的重要的物质[1],在脑损伤中的作用越来越受到学者重视,被认为是造成CNS损伤后难以修复的重要原因.针刺能够加加强神经重构,促进神经功能的恢复,已广泛应用于脑缺血损伤后神经功能恢复的治疗当中.
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针刺联合丰富康复训练对脑缺血大鼠神经功能、勿动蛋白及其受体的影响
目的:探讨针刺联合丰富康复训练对脑缺血大鼠神经功能的影响及对神经再生抑制因子勿动蛋白(Nogo-A)、勿动蛋白受体(NgR)的调控作用.方法:健康雄性SD大鼠120只,按照随机数字表分为造模组96只和假手术组24只,造模组采用颈外动脉线栓法制作局灶性大脑中动脉阻塞大鼠模型,术后4h选择神经功能缺损评分为1～3分的大鼠96只,随机分为模型组、针刺组、丰富康复训练组、针刺+丰富康复训练组,每组24只.比较术后4h、3d、7d、14d5组神经缺损体征评分和感觉、运动功能评分,采用免疫组化法检测Nogo-A蛋白及NgR在大鼠脑梗死区海马中的表达.结果:术后7d、14d,神经缺损体征评分和感觉、运动功能评分比较,针刺组、丰富康复训练组、针刺+丰富康复训练组均低于模型组(P＜0.01或P＜0.05);其中针刺+丰富康复训练组低于针刺组、丰富康复训练组(P＜0.01或P＜0.05).术后3d、7d、14d,Nogo-A、NgR蛋白表达比较,模型组、针刺组、丰富康复训练组、针刺+丰富康复训练组均高于假手术组(P＜0.01或P＜0.05),针刺组、丰富康复训练组、针刺+丰富康复训练组低于模型组(P＜0.01或P＜0.05),针刺+丰富康复训练组低于针刺组、丰富康复训练组(P＜0.01或P＜0.05).结论:针刺联合丰富康复训练可改善脑缺血大鼠海马病理性损害,促进感觉、运动功能恢复,且针刺联合丰富康复训练效果优于单纯针刺治疗和单纯丰富康复训练.
关键词： 脑缺血 丰富康复训练 Nogo-A蛋白 Nogo-A蛋白受体 针刺 -
Nogo-A蛋白在大鼠心肌细胞中的表达变化及其在细胞缺氧性凋亡中的作用
目的 探讨Nogo-A蛋白在心肌细胞中的表达及其在细胞缺氧性凋亡中的作用.方法 ①采用免疫组化法和免疫印记法测定成年大鼠心肌细胞(成熟心肌细胞)Nogo-A蛋白表达.②急性分离大鼠心肌细胞分为空白组、模型组及干预组,模型组及干预组建立心肌细胞缺氧模型,其中干预组制模前采用抗Nogo-A抗体干预.观察三组细胞凋亡情况、Nogo-A蛋白及Caspase-3和Caspase-12表达情况.结果 ①成熟心肌细胞:Nogo-A蛋白表达呈阳性.②缺氧心肌细胞:Nogo-A蛋白表达呈阳性；干预组及模型组均出现凋亡细胞,但干预组明显少于模型组；干预组及模型组Caspase-3和Caspase-12表达阳性率均明显高于空白组,但干预组明显低于模型组,P＜0.05.结论 心肌细胞中存在大量表达的Nogo-A蛋白；Nogo-A蛋白可能参与了心肌细胞的缺氧性凋亡.
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晶状体损伤对视神经损伤后再生影响的研究
目的 观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo-A mRNA及Nogo-A的表达,探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制.方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,6只)、单纯视神经损伤组(B组,30只)和视神经损伤联合晶状体损伤组(C组,30只).分别于造模后7d、14d、21 d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组),光镜下观察视神经的病理变化,免疫组织化学染色检测Nogo-A表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、半定量分析不同组视神经Nogo-A mRNA的表达.结果 大鼠正常视神经中表达Nogo-A mRNA及Nogo-A,但表达量较低；损伤视神经后7 d Nogo-A mRNA的表达量显著升高,至伤后21 dB组及C组均维持较高的水平.B组损伤后7 d Nogo-A表达阳性的细胞数开始增多( 136.80±3.94),与A组比较差异有统计学意义(P＜0.05),并保持高表达；C组损伤后21 d Nogo-A的表达较B组低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 视神经损伤后髓鞘相关抑制因子Nogo-A表达增高,晶状体损伤促进视神经再生的机制可能与Nogo-A有关.
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Nogo-66受体在脂质筏中的定位
目的探讨Nogo-66受体(NgR)在神经元胞膜脂质筏中的定位.方法利用免疫荧光双标法检测NgR和脂质筏特异标志物穴蛋白(Caveolin)在培养的小脑颗粒神经元上的表达,并用Western blot法检测以去垢剂法提取的脂质筏中NgR的表达.结果免疫荧光双标显示NgR和Caveolin有共同的表达部位,Western blot分析发现脂质筏中NgR的表达为阳性.结论在小脑颗粒神经元胞膜脂质筏中有NgR的表达,提示脂质筏有可能促进NgR的信号转导.
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电针治疗对大鼠脊髓损伤后Nogo-A蛋白表达的影响
目的:探讨电针治疗对大鼠脊髓损伤(SCI)后Nogo-A蛋白表达的影响.方法:以96只2月龄Wistar大鼠为受试对象,SCI组于T9处行脊髓全横断,治疗组予电针治疗,采用Western blot测定各时间点及各组脊髓Nogo-A表达及变化,并以苏木精-伊红和免疫组化染色对受损脊髓进行形态学观察.结果:SCI后Nogo-A蛋白表达呈递增趋势,于14 d后强;经电针治疗,Nogo-A表达减少.结论:Nogo-A是SCI后脊髓神经纤维再生的主要抑制因子,电针治疗对Nogo-A表达具有明显的抑制作用.
