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二氮嗪对兔膝关节骨关节炎进展的影响的研究
目的 研究二氮嗪对兔膝关节骨关节炎进展的影响,并探索其可能的作用机制.方法 成年雄性新西兰大白兔20只,通过切断兔双侧膝关节的前交叉韧带和内外侧半月板建立兔膝关节骨关节炎模型;分为二氮嗪组和对照组各10只,术后每周向二氮嗪组关节腔内注射二氮嗪溶液1 mL,对照组关节腔内注射蒸馏水1 mL.在第4周时解剖兔膝关节,进行对比观察.结果 4周后,从实验动物活动表现和大体标本观察,二氮嗪组较对照组骨关节炎病变较轻(P＜0.05).结论 二氮嗪对兔膝关节骨性关节炎的进展有一定的对抗作用.
关键词： 二氮嗪 骨关节炎 氧化损伤 线粒体ATP敏感钾通道 -
地佐辛后处理对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的影响
目的：探讨地佐辛后处理对大鼠肠缺血再灌注所致急性肺损伤的影响以及可能的机制。方法选取健康成年雄性SD大鼠32只，采用随机数字表法分为4组：CON组为假手术组；II／R组制备肠缺血再灌注模型；Dez组于缺血1 h经股静脉注射地佐辛3 mg 0．6 mL，再灌注1 h；5?HD组于缺血前30 min腹腔注射5?羟基葵酸钠10 mg／kg，随后制备肠缺血再灌注模型，后续处理同Dez组。再灌注1 h即刻，取部分肠组织，观察肠粘膜形态并进行肠粘膜损伤评分；取左肺组织，观察肺组织形态并进行肺损伤评分；取右肺组织测定丙二醛MDA的含量、超氧化物岐化酶SOD活性及髓过氧化物酶MPO的活性，取动脉血检测血清中TNF?a和IL?6的水平。结果地佐辛后处理能减轻肠缺血再灌注引起的远隔脏器肺的损伤，降低肠粘膜损伤评分、肺损伤评分，使肺组织丙二醛MDA的含量降低，超氧化物岐化酶SOD活性上升，髓过氧化物酶MPO的活性下降，血清TNF?a和IL?6的浓度明显下降。使用线粒体ATP敏感钾通道抑制剂5?羟基葵酸钠处理后可以减弱地佐辛对肺损伤的保护效应。结论地佐辛后处理可改善大鼠肠缺血再灌注对远隔脏器肺的损害，激活线粒体ATP敏感钾通道可能是保护机制之一。
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线粒体ATP敏感钾通道与钙激活钾通道激活对正常与缺血脑线粒体通透性转变的影响
目的:明确线粒体ATP敏感钾通道与钙激活钾通道对正常和缺血脑线粒体渗透性转变的作用.方法:实验采用分光光度法,在分离的线粒体上分别观察两种线粒体钾通道激动剂对正常与缺血脑线粒体肿胀的影响.结果:在正常脑线粒体,diazoxide与NS1619能有效抑制由钙诱导的线粒体A520下降,但其效应可被atractyloside所阻断.与正常相比,缺血损伤后的脑线粒体在钙离子诱导下线粒体A520下降较快,diazoxide与NS1619仍可抑制由钙诱导的线粒体A520下降,其作用同样为atractyloside所阻断.结论:线粒体ATP敏感钾通道与钙激活钾通道激活在离体条件均具有保护脑线粒体的作用,其作用可能是通过影响线粒体通透性转变而实现.
关键词： 线粒体ATP敏感钾通道 线粒体钙激活钾通道 线粒体通透性转变 脑缺血 -
5-HD对慢性低氧肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌PKC-α表达的作用
目的:研究线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)抑制剂5-羟基癸酸盐(5-HD)对慢性低氧肺动脉高压大鼠的影响及其潜在机制.方法:雄性SD大鼠48只,随机分成4组(n=12):①正常对照组;②慢性低氧组;③慢性低氧+ 5-HD组;④慢性低氧+ Diazoxide(mitoKATP开放剂)组;除正常对照组外,其余3组置于氧舱内(氧浓度10% ±0.3%),每天低氧8h,并接受不同的干预,共4周.干预结束后右心导管法测各大鼠肺动脉压,RT-PCR和Western blot检测各组大鼠肺动脉PKC-α蛋白和mRNA的表达.结果:①慢性低氧组肺动脉压显著高于正常组(P＜0.01),同时慢性低氧+ Diazoxide组与慢性低氧+ 5-HD组肺动脉压较慢性低氧组显著减低(P<0.01).②慢性低氧组PKG-α蛋白及mRNA的相对表达显著高于正常组(P<0.05).结论:5-HD对慢性低氧肺动脉高压起保护作用,其机制可能是抑制线粒体ATP敏感钾通道.
关键词： 慢性低氧肺动脉高压 PKC-α 线粒体ATP敏感钾通道 5-HD -
活性氧、NO和线粒体ATP敏感钾通道在TNF-α预处理对缺血/再灌注心肌保护中的作用
目的: 观察TNF-α预处理对缺血/再灌注心脏功能和酶学指标的影响及其可能机制.方法: 采用心脏Langendorff灌流模型.结果:与单独缺血/再灌注组相比,TNF-α(104U/L)预处理明显减弱缺血/再灌注对左室发展压、左室舒张末压、大收缩/舒张速率和左室发展压与心率乘积的抑制作用(P<0.05),并显著降低复灌后冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,增加线粒体中锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性(P<0.05);分别使用抗氧化剂2-MPG(0.3 mmol/L)、一氧化氮合酶抑制剂L-NAME(0.5 mmol/L)或线粒体ATP敏感钾通道抑制剂5-HD(100 μmol/L)预处理,减弱了TNF-α改善缺血/再灌注后心功能、抑制心肌LDH释放和诱导Mn-SOD活性增高的作用.结论: TNF-α预处理具有减轻心脏缺血/再灌注损伤的作用,这一作用可能与其诱导Mn-SOD活性增高有关,活性氧、一氧化氮和线粒体ATP敏感钾通道参与介导TNF-α的心肌保护作用.
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线粒体ATP敏感钾通道调控哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖
本文旨在探讨线粒体ATP敏感钾(mitochondrial ATP-sensitive K+,MitoK,ATP)通道对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airwaysmooth muscle cells,ASMCs)增殖的影响及其调控机制.36只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为哮喘组(n=18)和正常组(n=18),哮喘组大鼠采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)敛敏及激发的方法制备哮喘模型,正常组大鼠吸入等量生理盐水.取各组大鼠肺组织,分离出ASMCs进行培养,将样本分6组分别进行干预:(1)正常组;(2)正常+MitoK,ATP通道开放剂diazoxide组(diazoxide组);(3)正常+MitoK,ATP通道阻断剂5-HD组(5-HD组);(4)哮喘(asthma)组;(5)asthma+diazoxide组;(6)asthma+5-HD组.利用罗丹明(Rhodamine123,R-123)荧光染色、激光共聚焦显微镜成像检测线粒体膜电位(△Ψm),DCFH-DA荧光染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,RT-PCR检测核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡和MTT法检测细胞增殖情况.结果显示:(1)Diazoxide组与正常组相比,R-123荧光强度增强,△Ψm去极化,ROS及NF-κB的表达增高,细胞增殖增多、凋亡减少(P0.05).而5-HD组与正常组相比,上述指标均无显著差异;(2)与正常组相比,Asthma组R-123荧光强度增强,△Ψm去极化,ROS及NF-κB的表达增高,细胞增殖增多、凋亡减少(P0.05);Asthma+diazoxide组与Asthma组相比,R-123荧光强度和△Ψm去极化增强,ROS及NF-κB表达增高,细胞增殖增多、凋亡减少(P0.05):Asthma+5-HD组与Asthma组相比,R-123荧光强度和△Ψm去极化减弱,ROS及NF-κB表达降低,细胞增殖减少、凋亡增多(P0.05);(3)各组大鼠ASMCs的R-123荧光强度,NF-κB mRNA表达革与ROS含量均呈正相关;MTT的吸光度值与NF-κB mRNA表达量呈正相关,凋亡细胞百分比与NF-κB mRNA表达量呈负相关.以上结果提示,哮喘可引起大鼠ASMCs的MitoK,ATP通道开放及△Ψm去极化,△Ψm去极化促进ROS的表达,ROS可能作为信号分子刺激NF-κB表达增加,进而促进ASMCs增殖,参与气道重构.
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活性氧和线粒体ATP敏感钾通道介导肿瘤坏死因子α对缺氧/复氧心肌的保护作用
在培养的乳鼠心肌细胞上, 研究肿瘤坏死因子α (TNF-α)对缺氧/复氧损伤心肌的保护作用的机制.结果发现: (1) 用TNF-α (10-500 U/ml)预处理, 缺氧/复氧后心肌细胞内锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性增高、乳酸脱氢酶(LDH)释放量减少(P<0.05); (2) 用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸 (NAC, 1 mmol/L)、抗霉素A (antimycin A, 50 μmol/L)、2-巯基丙酰氨基乙酸(2-MPG, 400 μmol/L)和铜/锌超氧化物歧化酸(Cu/Zn-SOD)抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸盐(DDC, 100 nmol/L)预处理, 可取消TNF-α的抑制缺氧/复氧心肌细胞LDH释放和诱导Mn-SOD活性增高的作用; (3) mitoKATP通道抑制剂5-羟基GB9EF酸(5-HD)预处理可阻断TNF-α对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用; 选择性mitoKATP通道开放剂diazoxide (50 μmol/L)预处理可减少复氧后心肌细胞LDH的释放(P<0.01), 其作用可被5-HD (100 μmol/L)和NAC所抑制.上述结果表明, 活性氧和线粒体ATP敏感钾通道参与介导TNF-α对缺氧/复氧损伤的心肌保护作用.
关键词： 心肌细胞 肿瘤坏死因子α (TNF-α) 缺氧 复氧 活性氧 线粒体ATP敏感钾通道 -
缺血及药物预处理的研究进展
早期研究中,人们对组织器官保护的尝试在钙通道拮抗剂、β-肾上腺素受体阻断剂和氧自由基清除剂方面的结果令人失望.
关键词： 预处理 蛋白激酶C 酪氨酸激酶 有丝分裂活性蛋白激酶 线粒体ATP敏感钾通道 核因子κB -
线粒体ATP敏感钾通道与心血管疾病
随着人口老龄化的加剧以及生活方式的改变,心血管疾病成为严重威胁人类健康的重要疾病之一,而心血管死亡在近几年的流行病调查中也一直高居全因死亡的榜首,因此,心血管疾病的预防和治疗便成为现阶段各国科研和临床研究的重点.线粒体ATP敏感钾通道是位于线粒体内膜上的内向整流钾通道,具有改善能量代谢、抑制凋亡、减轻Ca2+超载、稳定内环境等作用.近期的研究发现,线粒体ATP敏感钾通道可通过不同的途径影响心血管疾病的发展.该文对线粒体ATP敏感钾通道的结构、功能及其与多种心血管疾病的关系进行了综述,明确其在心血管疾病发展中的作用.
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姜黄素对人子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨
目的 观察姜黄素对人子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将对数生长期的人子宫肌瘤细胞分为两组,观察组加入终浓度分别为10、50、100 μmol/L的姜黄素,对照组加入1‰的二甲基亚砜(DM-SO),分别于培养12、24、48、72 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,用流式细胞术检测细胞凋亡率.将对数生长期的细胞随机分为3组,A组加入终浓度100μmol/L的姜黄素,B组加入100 μmol/L的线粒体ATP敏感钾通道开放剂二氮嗪及100μmol/L的姜黄素,C组加500 μmol/L的线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-羟基癸酸脱氢酶(5-HD)及100μmol/L的姜黄素；培养48 h后,分别采用MTT法和流式细胞仪测算细胞增殖抑制率和凋亡率.结果 随着姜黄素浓度的增加和作用时间的延长,细胞增殖抑制率逐渐减低(P均＜0.05),而细胞凋亡率逐渐增加(P均＜0.05).A组细胞增殖抑制率和凋亡率分别为75.65％±9.42％、41.82％±6.12％,B组分别为17.66％±2.45％、32.46％±6.71％,C组分别为40.67％±5.46％、74.42％±8.47％,B组与A、C组比较,P均＜0.05.结论 姜黄素可抑制人子宫肌瘤细胞增殖并促进其凋亡,该作用可能与姜黄素抑制线粒体ATP敏感钾通道有关.
关键词： 姜黄素 线粒体ATP敏感钾通道 细胞凋亡 细胞增殖 人子宫肌瘤细胞 -
线粒体ATP敏感钾通道对哮喘大鼠气道平滑肌细胞表型转化的影响
目的 研究线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)对哮喘气道平滑肌细胞(ASMCs)表型转化的影响.方法 腹腔注射和雾化吸人制备哮喘大鼠模型.取哮喘及正常大鼠ASMCs,分为以下6组进行干预:正常对照组;正常+mi-toKATP开放剂diazoxide组;正常+mitoKATP阻断剂5-HD组;哮喘对照组;哮喘+diazoxide组;哮喘+5-HD组.激光共聚焦显微镜检测各组ASMCs R-123荧光强度以反映线粒体膜电位(△ψm),Western blot法检测各组细胞α一肌动蛋白(ractin)表达量.结果 ①与正常对照组比较.哮喘对照组R-123荧光强度明显增强,α-actin表达明显下调(均P<0.05).②diazoxide干预ASMCs 24 h后.正常及哮喘ASMCs R-123荧光强度均明显增强(均P<0.05);正常ASMCs α-actin表达量无明显变化(P>0.05).但哮喘ASMCs α-actin表达量明显增加(P<0.05).结论 diazoxide引起mitoKATP开放,并逆转哮喘ASMCs由收缩型向合成型发生的表型转化.
关键词： 气道平滑肌细胞 哮喘 线粒体ATP敏感钾通道 线粒体膜电位 表型转化 -
线粒体ATP敏感钾通道在低氧预处理抗低氧性肺损伤中的作用
目的 探索线粒体ATP敏感钾通道在低氧预处理抗低氧性肺损伤中的作用.方法 利用线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-HD和开放剂DE采用离体肺灌流方法造成大鼠肺预缺氧/缺氧损伤模型.30只大鼠随机分成5组:对照组、缺氧组、低氧预处理(HPC)+缺氧组、Diazoxide(DE)+缺氧组、5-HD+HPC+缺氧组.通过形态学观察,灌流液总蛋白含量测定,以及肺干湿重比测定,反映各组肺受损程度.结果 与单纯缺氧组相比, DE+缺氧组及HPC+缺氧组肺泡及肺组织充血水肿和红细胞渗出明显减轻,肺干/湿重比较大,灌流液蛋白含量较低(P＜0.05),而5-HD+HPC+缺氧组与缺氧组无显著差异(P＞0.05).结论 肺线粒体ATP敏感钾通道在低氧预处理抗低氧性肺损伤中具有保护作用.
关键词： 线粒体ATP敏感钾通道 低氧预适应 肺损伤 大鼠 -
mitoKATP通道开放剂对高氧诱导人A549细胞凋亡的保护作用
目的 探讨mitoKATP通道开放剂二氮嗪对高氧诱导人A549细胞凋亡的保护作用和机制.方法 体外培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),随机分为对照组、高氧组(换液后通人900 mL/L氧气和50 mL/L二氧化碳高纯混合气,10 min后密闭培养)和二氮嗪组(用终浓度为100 μmol/L的二氮嗪培养液预处理24 h再进行高氧诱导).3组分别于处理后12、24、48 h收集细胞进行检测.倒置相差显微镜下观察A549细胞形态,流式细胞仪检测48 h的细胞凋亡,免疫组化法检测细胞内Omi/HtrA2的表达.结果 与对照组相比,高氧组细胞受损明显,形态改变,细胞凋亡率增加(P<0.05),胞浆Omi/HtrA2表达增多(P<0.05).与高氧组相比,二氮嗪组细胞损伤状况明显得到改善,细胞生长状况明显好转,形态明显变好;胞浆Omi/HtrA2表达减少(P<0.05),细胞凋亡率减少(P<0.05).结论 mitoKA7P通道开放剂二氮嗪具有降低Omi/HtrA2表达和A549细胞凋亡,从而减轻高氧诱导的肺损伤的作用.
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蛋白激酶C在线粒体ATP敏感钾通道开放保护肺缺血再灌注损伤中的作用
目的 探讨线粒体ATP敏感钾通道开放对大鼠肺缺血再灌注(ischemia-reperfusion, I/R)损伤的保护作用及蛋白激酶C(PKC)的作用.方法 建立大鼠肺I/R损伤模型,设立假手术组、I/R组、二氮嗪(DE)+I/R组(DE组)、5-羟基葵酸(5-HD)+DE+I/R组(5-HD+DE组)、白屈菜季铵碱(CHE)+DE+I/R组(CHE+DE组)、5-HD+豆蔻酸佛波酰乙酯(PMA)+I/R组(5-HD+PMA组).观察肺组织病理形态学改变,测定肺湿/干重比,免疫组化染色法检测肺组织细胞色素C的阳性细胞率,TUNEL法观察肺细胞凋亡,非放射性荧光底物法检测肺组织PKC活性.结果 与I/R组相比,DE组肺组织病理学改变明显减轻,肺组织湿/干重比、肺组织细胞色素C水平和细胞凋亡指数均降低(P<0.05),且PKC活性明显上调.CHE+DE组各指标与I/R组均无明显差异.5-HD+DE组、5-HD+PMA组仅PKC活性上调,其余指标与I/R组比较无明显差异.结论 线粒体ATP敏感通道开放可保护肺I/R损伤,该作用依赖于PKC的激活.
关键词： 肺 缺血再灌注损伤 线粒体ATP敏感钾通道 蛋白激酶C 大鼠
