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裙带菜多糖中蛋白质的含量测定
目的:根据不同方法处理后的多糖含量及脱蛋白率,确定佳的脱蛋白方法.方法:采用SeVag/酶法和三氯乙酸/酶法对裙带菜多糖脱蛋白.结果:Sevag/酶法的多糖含量为40.8％,脱蛋白率为75.1％；三氯乙酸/酶法的多糖含量为51.3％,脱蛋白率为75.8％.结论:三氯乙酸/酶法脱蛋白效果较好.
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大孔树脂法脱除款冬花多糖蛋白的工艺研究
目的 研究款冬花多糖脱蛋白工艺.方法 以款冬花多糖的脱蛋白率和多糖保留率为考察指标,通过静态试验和动态试验确定款冬花多糖的树脂法脱蛋白工艺.结果 优的款冬花多糖脱蛋白工艺条件:选择LS-206树脂,上柱高径比为15,上样液温度30℃,上柱体积数为2 BV,款冬花多糖溶液浓度6 mg/ml,上柱速率1.5 BV/h进行动态吸附.此工艺条件下的款冬花多糖的脱蛋白率为87.70%,多糖保留率为87.89%.结论 LS-206树脂适用于款冬花多糖的脱蛋白处理.
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龙葵多糖脱蛋白工艺的比较研究
目的 优选龙葵多糖脱蛋白的佳工艺.方法 以多糖保留率、蛋白脱除率为指标,采用正交试验确定Sevag法、三氯乙酸法(TCA法)、酶法的佳工艺条件,并进行比较.结果 三氯乙酸法(TCA法)为佳脱蛋白方法,佳工艺条件为用3％ 的三氯乙酸溶液调节pH至2.5,萃取时间20分钟,萃取次数1次,此时蛋白脱除率87.118％,多糖保留率88.983％.结论 TCA法对龙葵多糖具有较好的脱蛋白效果,且操作简便,工艺稳定,多糖保留率高,可在龙葵多糖的分离纯化中推广使用.
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六味地黄生物制剂中多糖脱蛋白方法对比
目的:对六味地黄生物制剂粗多糖中蛋白质的去除方法进行比较研究,探讨不同方法对多糖的提取率及纯度的影响.方法:利用Sevage法、TCA-正丁醇沉淀法、鞣酸沉淀法对六味地黄生物制剂脱蛋白,通过蛋白清除率和多糖保存率比较3种方法的优劣.结果:TCA-正丁醇法脱蛋白时效果好,佳条件为TCA-正丁醇试剂的体积比1∶2,TCA-正丁醇试剂的配比1∶5,振摇时间30 min,静置时间1.0h,多糖脱蛋白效率高,多糖保存率大.结论:TCA-正丁醇法是目前六味地黄生物制剂脱蛋白效果好的工艺.
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黄芪多糖的脱蛋白工艺考察
目的:优选黄芪多糖的脱蛋白工艺,提高黄芪多糖的纯度,为该有效部位的后续药理研究奠定基础.方法:采用水提醇沉法提取黄芪多糖,以黄芪多糖的含量和蛋白质的脱除率为考察指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察酶解时间、酶底比、酶解液pH和酶解温度对黄芪多糖脱蛋白工艺的影响,利用酶-Sevage法除蛋白.结果:佳脱蛋白工艺为酶底比2.0％,pH 5.0,50℃水浴酶解24 h;在该工艺条件下,蛋白脱除率87.80％,黄芪多糖质量分数83.47％.结论:优选的脱蛋白工艺条件稳定可行,酶-Sevage法可显著提高黄芪多糖的纯度.
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响应面法优选铁皮石斛总多糖脱蛋白工艺
目的:优选铁皮石斛总多糖的胰蛋白酶联合Sevage法脱蛋白工艺,为该有效部位的深度开发和综合利用提供参考.方法:以总多糖保存率和蛋白脱除率为评价指标,通过单因素试验比较Sevage法、木瓜蛋白酶法、胰蛋白酶法和胰蛋白酶联合Sevage法;以蛋白脱除率为指标,酶解时间、酶用量、酶解温度和粗多糖溶液与Sevage试剂体积比为考察因素,利用Box-Behnken响应面法优化条件.结果:胰蛋白酶联合Sevage法具有较高的总多糖保存率及蛋白脱除率;佳工艺条件为酶解时间1.5h,酶用量0.21 g·mL-1,酶解温度63.25℃,总多糖溶液-Sevage试剂(4.27∶1);蛋白脱除率(87.15±7.93)％,总多糖保存率(81.32±8.54)％.结论:不同方法对铁皮石斛总多糖的脱蛋白效果有明显差异,胰蛋白酶联用Sevage法的效果佳.
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脱蛋白液对异种骨移植替代物生物学特性影响
目的 研究不同脱蛋白时间对异种骨移植替代物细胞毒性、生物相容性和体内降解性的影响.方法 采用脱蛋白液分别浸泡牛松质骨0、24、36、48和60h,通过与细胞共培养观察异种骨对骨髓基质细胞的细胞毒性,通过异种动物体内埋置观察其生物相容性和降解性.结果 脱蛋白液处理48h和60h组细胞相对增殖率与空白对照组间无显著性差异(P>0.05),细胞相容性好,细胞毒性分级为0级;扫描电镜和组织学观察结果显示脱蛋白液处理48h组早期(4周内)即出现细胞长入软组织,具有良好的生物相容性.X线片、扫描电镜、能谱分析和显微CT观察显示48h组支架结构降解性明显优于其他组(P<0.05),12周后48h组支架几乎完全降解.结论 脱蛋白液处理48h后,异种骨移植替代物的细胞毒性低,生物相容性和降解性达到佳状态.
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苦豆子多糖脱蛋白工艺比较
目的:优选苦豆子多糖的除蛋白工艺,确定佳的除蛋白质方法.方法:以多糖损失率和蛋白脱除率为评价指标,比较Sevage法、三氯乙酸法和酶法对苦豆子多糖的脱蛋白效果.结果:Sevage法、三氯乙酸法和酶法的蛋白脱除率分别为85.80％,72.47％,91.99％,多糖损失率分别为23.76％,9.86％,1.99％.酶法脱蛋白效果佳,佳脱蛋白工艺为:木瓜蛋白酶用量2.0％(v/v),pH值7.0,温度60℃,时间4h.结论:酶法是苦豆子多糖脱除蛋白质的佳方法,此法可以较好地脱除游离蛋白,并使多糖损失较少.
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红芪多糖的脱蛋白及脱色素工艺
目的:研究红芪多糖(HPS)的脱蛋白、脱色工艺.方法:采用L9(34)正交试验和单因素试验分别优选Sevage法脱蛋白工艺与过氧化氢脱色素工艺.结果:Sevage法脱蛋白工艺为:样液与试剂的体积比为1:1,氯仿与正丁醇的体积比为4:1,振摇30 min,静置20 min.过氧化氢脱色素条件是脱色时间为2～ 4 h,用量为5～ 20 ml过氧化氢每50 ml样液.结论:优化后的条件适合于红芪多糖的脱蛋白、脱色素.
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乌骨藤多糖脱蛋白工艺的研究
目的：优选乌骨藤多糖脱蛋白工艺。方法以蛋白脱除率和多糖保留率为评价指标，考察酶-Sevage法对乌骨藤多糖脱蛋白的效果。结果酶-Sevage法的蛋白脱除率分别为75.09%，多糖保留率分别为89.83%。结论酶-Sevage法脱蛋白的方法可行。
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GPC法测定仙人掌多糖相对分子质量以及HPLC-ELSD法测定其单糖组成
多糖类的活性与其相对分子质量大小、聚合度、分支度以及溶液中高级构象等都有关,多糖相对分子质量太大或太小均会引起活性的下降.因此,多糖的结构是其生物活性的基础,多糖的一级结构和高级结构与其生物活性间的构效关系是当前糖化学和糖生物学共同关注的焦点问题.多糖结构研究的主要内容有相对分子质量测定、多糖的单糖组成、糖苷键构型、聚合度、分支度等基本结构以及多糖的溶液构象等[1].本研究用热水提取的仙人掌粗多糖,提取液经Savag法脱蛋白后,采用Sephacryl S-400柱色谱纯化,得到仙人掌多糖(OP),经过高效凝胶渗透色谱和常压凝胶柱色谱分析表明,OP为均一多糖.
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一种在多糖分离纯化过程中新的脱蛋白方法
目的寻找一种在多糖(香菇多糖)分离纯化过程中适宜的脱蛋白方法.方法以正交试验法为主.结果通过正交试验法找到了一种在多糖(香菇多糖)分离纯化过程中新的脱蛋白方法.5因素3水平正交试验的结果表明,影响脱蛋白率(DPR)的主要因素是B(正丁醇)、次主要因素是D(乙醇),而因素C(甲醇)和E(氯化钠)的影响则较小;影响DPR的主次顺序为B＞D＞A(氯仿)＞E＞C.DPR随着正丁醇浓度的增加而变化很大,开始缓慢上升,然后迅速降低;随着乙醇浓度的增大,DPR逐渐降低;而当氯仿浓度增大时,DPR则开始上升,然后下降;当甲醇浓度增大时,DPR则变化很小.脱蛋白的佳条件是A2B2C1D1Ez,即在氯仿40%、正丁醇10%、甲醇2%、乙醇40%、氯化钠0.01%的条件下,杂蛋白的去除率高.验证性试验结果表明,在此条件下,杂蛋白的去除率达99.98%.通过反复试验,还找到了适用于工业化生产的包括香菇原料的蒸煮、煮沸样品的浓缩、粗多糖的沉淀和脱色、粗多糖的干燥等在内的原料预处理的佳工艺.结论这种新的脱蛋白方法具有工艺简单、无需贵重设备、加工成本低、容易放大等特点,特别适合于多糖类产品的精制或其他需要去除杂蛋白的单元操作.
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金银花多糖脱蛋白方法的研究
目的 优选金银花多糖除蛋白工艺.方法 以多糖损失率和蛋白脱除率为评价指标,选用了3种方法:Sevag法、酶法和酶-Sevag法对金银花多糖提取物进行脱蛋白处理.结果 Sevag法、酶法、酶-Sevag法的蛋白脱除率分别为85.72%、73.28%、84.50%,多糖损失率分别为56.57%、31.22%、29.35%.结论 酶-Sevag法是金银花多糖除蛋白有效,可行方法.
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黄芪多糖中脱蛋白方法的研究
目的:为了筛选佳的黄芪多糖的脱蛋白效果.方法:比较sevage法,蛋白酶法,乙酸铅法和732树脂法脱除黄芪多糖中的蛋白质的效果.结果:蛋白酶法和732树脂法都可以较好的除去黄芪多糖中的蛋白质.尤其以732树脂静态吸附效果为佳.多糖得率达88.6%,蛋白质含量降低至0.91%.而且732树脂成本低,快速,吸附效果好,样品损失小,便于在黄芪多糖的制备中推广使用.结论:732树脂静态吸附法是佳的黄芪多糖脱蛋白方法.
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山茱萸多糖提取中蛋白质去除方法的研究
目的:比较Sevag法、酶法、酶法-Sevag法,选择优的脱蛋白方法,为山菜萸多糖的分离纯化、结构鉴定提供实验基础.方法:以多糖损失率、蛋白质脱除率和蛋白质含量为评价指标,选用Sevag法、酶法和酶-Sevag法分别对山茱萸粗多糖进行脱蛋白.对酶法进行正交试验,筛选优的工艺.结果:Sevag法、酶法、酶-Sevag法的蛋白脱除率分别为84.50％、78.55％、81.24％,多糖损失率分别为61.30％、28.54％、10.13％；酶法优工艺条件是酶量4.0％、时间2h、温度60℃、pH值6.8.结论:酶-Sevag法是山茱萸粗多糖脱蛋白有效方法.
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异种脱蛋白松质骨支架在脊柱横突间融合中应用的可行性
背景：现如今关于组织工程骨的相关研究大多集中在骨干临界性骨缺损方面，关于其在脊柱融合中的相关研究和报道相对较少。目的：探讨在脊柱横突间融合治疗中异种脱蛋白松质骨作为骨组织工程支架的应用可行性。方法：取成年猪股骨远端松质部分，制备异种脱蛋白松质骨材料，与重组人骨形态发生蛋白复合后，再复合骨髓间充质干细胞制备组织工程骨。取24只山羊，制备横突间植骨床，随机均分为2组，观察组左侧植入组织工程骨，右侧植入载重组人骨形态发生蛋白的异种脱蛋白松质骨；对照组左侧植入自体髂骨，右侧植入异种脱蛋白松质骨。植入后4，8，12周获取融合节段，进行大体观察、X射线观察、组织学观察及生物力学检测。结果与结论：X 射线显示，两组植入材料均固定良好，固定效果可靠。植入后不同时间点，各组植入材料均处于良好位置，材料周围组织未出现化脓或者坏死等，且均出现软组织长入、包裹，植入材料周围均未出现积液和坏死等，其中组织工程骨组影像学表现与组织学表现优于载重组人骨形态发生蛋白异种脱蛋白松质骨组、异种脱蛋白松质骨组，与自体骨接近。植入后12周，组织工程骨组大弯曲载荷接近自体髂骨组，两组间比较差异无显著性意义。表明在脊柱横突间融合治疗中，异种脱蛋白松质骨作为骨组织工程支架具有一定的应用可行性。
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甘蔗渣多糖脱蛋白方法研究
目的:比较Sevag法、酶法对甘蔗渣多糖脱蛋白的效果.方法:以蛋白脱除率、多糖含量为考察指标,选用Sevag法和酶法对甘蔗渣多糖进行脱蛋白处理.结果:进行8次Sevag法脱蛋白后蛋白的脱除率与多糖的含量分别达到77.47％、63.6％.酶法佳条件下蛋白脱除率达到71.84％.结论:Sevag法进行8次脱蛋白对甘蔗渣多糖脱蛋白效果佳；酶用量2％、温度50℃、时间3h对甘蔗渣多糖脱蛋白效果佳.
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麻黄多糖中蛋白含量测定及脱蛋白方法的比较
目的:建立麻黄多糖中蛋白的含量测定方法,比较不同脱蛋白方法的蛋白脱除效果.方法:水提醉沉提取麻黄多糖,Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-Sevag法去除蛋白,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量.结果:麻黄多糖脱蛋白前的蛋白含量为26.30%,Sevag法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白后的蛋白含量分别为15.00%,6.80%和1.70%;三种方法的蛋白脱除率分别为42.97%,74.14%和93.54%.结论:木瓜蛋白酶-Sevag法的脱蛋白效果较好,考马斯亮蓝G-250染色法操作简便,准确性好,不失为多糖中蛋白含量测定的一种好方法.
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灰兜巴粗多糖提取液的脱蛋白工艺研究
目的 研究民间治疗糖尿病药物灰兜巴粗多糖提取液的佳脱蛋白工艺条件.方法 采用十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法、Sevag法、盐酸法、三氯乙酸(TCA)法,以多糖总糖量的保留率和总固体质量的下降率为双重指标,对灰兜巴粗多糖提取液的脱蛋白工艺进行研究,并对脱蛋白效果较好的TCA法进行正交试验优选,终确定灰兜巴粗多糖提取液的佳脱蛋白工艺.结果 灰兜巴粗多糖提取液的佳脱蛋白工艺为TCA法,冰水浴静置时间2h、TCA终质量分数为3％、醇沉静置时间为0h.结论 优化后的TCA法,操作简单,重现性好,可用于灰兜巴粗多糖提取液的脱蛋白工艺.
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亮菌多糖提取中脱蛋白和脱色方法比较
目的:探讨亮菌多糖提取过程中的脱蛋白和脱色方法.方法:以蛋白质脱除率和多糖保留率为考察指标,比较Sevage法、氯化钠法、氯化钙法、三氯乙酸法及盐酸法脱蛋白效果.以色素脱除率作为考察指标,比较过氧化氢和活性炭的脱色效果.结果:Sevage法脱蛋白效果较好且多糖得率高;过氧化氢的脱色效果优于活性炭.结论:确定Sevage法和过氧化氢法为亮菌多糖提取的脱蛋白和脱色的方法.
