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异种脱蛋白组织工程骨支架材料的制备及理化特性研究
目的 制备及研究可供临床使用的异种脱蛋白组织工程骨支架材料.方法 对猪肋骨进行一系列理化处理,制成脱蛋白骨,并对其进行组织学、扫描电镜、红外光谱、X射线衍射分析,X射线能量散射分析、微量凯氏定氮及力学性能测定.结果 脱蛋白骨间质胶原纤维染色阳性,黏蛋白染色阴性,而新鲜骨组织黏蛋白及胶原染色均阳性.脱蛋白骨保持原骨组织的天然网状孔隙系统,孔径为(472.51±7.02)μm,孔隙率为(78.15%±6.45%),脱蛋白骨红外光谱显示胶原存在,无脂肪.新鲜骨与脱蛋白骨皆为曲线型羟基磷灰石图谱,Ca/P比分别为(1.71±0.95)、(1.68±0.76),二者差异无显著性(P＞0.05),蛋白质含量分别为(26.6%±2.23%)、(19.1%±2.14%),二者差异有显著性(P＜0.05).脱蛋白骨除弹性模量比新鲜骨升高外,压缩破坏载荷及破坏极限载荷与新鲜骨差异无显著性(P＞0.05).结论 制备的脱蛋白组织工程骨支架材料的理化性质及力学强度符合理想支架材料要求.其免疫原性有待于进一步实验观察.
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异种脱蛋白骨的生物相容性研究
目的 评价制备的异种脱蛋白骨植入体内的生物相容性,为临床应用提供实验依据.方法 对猪肋骨进行一系列理化处理后,制成10 mm长脱蛋白骨及浸提液.然后采用标准的毒理学实验方法进行急性、亚急性毒理实验、溶血实验、热源实验、皮内注射实验、肌肉埋植实验及细胞毒性实验.结果 异种脱蛋白骨的毒性程度为无毒,溶血率＜5%,无热源性,对皮肤无刺激,肌肉内埋植后无明显炎症反应,对细胞无明显毒性作用,细胞的毒性均为0级.结论 异种脱蛋白骨具有良好的生物相容性,可满足作为组织工程骨支架材料生物相容性的要求.
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石墨炉原子吸收光谱法在测定血中铅镉的应用
目前血铅、血镉的测定采用中国卫生行业标准(WS/T174-1999),此方法的要点是血液样品用酸脱蛋白,离心取上清液上石墨炉原子吸收光谱仪分析,具有灵敏度高,需样量少,简单快速的特点.我们在此行业标准基础上通过试验,在血标准系列配制等方面进行适当改良,使之更快速、简便,取得满意的结果.
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脱蛋白对异种骨中骨形成蛋白影响的实验研究
目的 研究脱蛋白对异种骨中骨形成蛋白的影响.方法 取猪骨制成骨块脱脂后,用双氧水和胰蛋白酶脱蛋白,免疫组化检测骨中骨形成蛋白表达情况.结果 双氧水脱蛋白后,骨中的骨形成蛋白表达较低,而胰蛋白酶脱蛋白后骨形成蛋白表达与新鲜骨类似.结论 使用酶法脱蛋白既能有效的去除骨中具有抗原性的胶原蛋白成分,又能保留骨中的骨诱导活性物质.
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新型天然骨材料的制备方法及其表征
探讨一种通过以超临界萃取脱脂和化学超声浸泡脱蛋白为主处理天然骨的新方法,制备一系列天然骨材料,并对其进行了扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射(XRD)及热失重(TGA)表征.研究结果表明,处理后骨材料的性能与样品的体积、处理步骤的顺序及处理时间有密切的关系,得到的天然骨保持了多孔结构,孔壁干净光滑,未见其它残留物质,骨中羟基磷灰石晶体结构保持良好,且有机成分大大减少.更重要的是本研究的处理方法与传统的处理方法相比较,不仅能较彻底地脱脂,而且还避免了有机溶剂的使用,是一种新型的异种骨处理方法.
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淫羊藿多糖的提取及其蛋白的脱除
目的 研究淫羊藿多糖提取及脱蛋白工艺.方法 采用不同提取温度、提取时间和料液比进行单因素试验,并采用正交试验优化提取条件.以蛋白质脱除率和多糖损失率为考察指标,比较Sevage法、氯化钠法、氯化钙法、鞣酸法及盐酸法的脱蛋白效果.结果 淫羊藿多糖提取的优工艺参数为;提取温度90℃、提取时间4 h、料液比1;40.Sevage法的蛋白脱除率高达68.71%,多糖损失率仅为21.5%.结论 淫羊藿多糖提取工艺稳定可行,Sevage法脱蛋白效果较好且多糖损失率低.
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基于超临界二氧化碳萃取的复合技术在同种异体骨体外处理的应用
目的:探讨基于超临界二氧化碳萃取的复合技术处理猪股骨松质骨的效果,旨在分析该新技术用于同种异体骨修复材料的制备可行性.方法:足量加工后的猪股骨松质骨骨块被随机分为三组:①非超临界组(对照组),即猪股骨松质骨经过高压水枪彻底冲洗,再经3％双氧水脱脂灭菌,制备出猪股骨松质骨修复材料,经冷冻干燥后获得1号材料;②超临界复合超声波组(实验组1),即猪股骨松质骨依次由超声波清洗离心、超临界二氧化碳萃取脱脂以及化学清洗(过氧化氢、氢氧化钠)等组成的复合清洗技术处理,制备出的猪股骨松质骨修复材料,经冷冻干燥后获得2号材料;③超临界复合高压水枪组(实验组2),即猪股骨松质骨依次由高压水枪冲洗、超临界二氧化碳萃取脱脂以及化学清洗(过氧化氢、氢氧化钠)等组成的复合清洗技术处理,制备出的猪股骨松质骨修复材料,经冷冻干燥后获得3号材料.根据实验需要将1、2、3号材料或原材料进行Micro-CT、压缩力学、细胞毒性等检测.结果:①从2号材料和3号材料的外观及重量变化可认为实验组1和实验组2对猪股骨松质骨的清洗效力无明显差别;②1、2、3号材料经Micro-CT扫描获得CT三维重建图像提示骨小梁结构完好,提示三组方法(对照组、实验组1和实验组2)未明显破坏猪股骨松质骨修复材料的微观结构;③1、2、3号材料与猪股骨松质骨原材料进行压缩力学比较,提示强度极限、大载荷和弹性模量无统计学差异(P>0.05),可认为三组方法不会引起猪股骨松质骨压缩力学改变.4.1、2、3号材料细胞毒性实验OD值结果(MTT法)与阴性组OD值结果比较无统计学意义(P>0.05).结论:基于超临界二氧化碳萃取的复合技术处理后的猪松质骨孔隙结构较为完整,抗压性好,无毒性试剂残留,有利于细胞生长.因此,该技术是一种安全、有效、绿色的复合清洗技术,不仅可用于异种骨修复材料的制备,亦可用于同种异体骨修复材料的制备.
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Box －Behnken 响应面法优化亚贡多糖的脱蛋白工艺研究
目的：筛选亚贡多糖的脱蛋白工艺。方法：采用酶法脱蛋白，应用 Box －Behnken 响应面法优化佳工艺，以多糖质量分数和蛋白脱除率为评价指标，考察温度、反应时间及酶浓度对指标的影响。结果：优工艺条件为：反应温度为56．2℃，反应时间为1．27 h，酶终浓度3．7％；多糖质量分数达67．5％，蛋白脱除率为80．4％。结论：该工艺简单可行，可用于亚贡多糖的纯化。
关键词： 亚贡 多糖 脱蛋白 Box -Behnken 响应面法 -
腭骨成形术——复合骨植入对延长硬腭的作用
不同类型的腭裂，均伴有不同程度的软腭和硬腭骨质的缺损畸形。腭裂术后语言的功能活动，既需要有足够长度的软腭，形态完整、正常的硬腭使软腭是否处于功能位置也至关重要。本文提出并设计了部分脱蛋白猪骨和脱钙异体胚胎骨复合（以下简称复合骨）移植修复腭骨，使腭骨的形态接近正常，从而使软腭上抬处于正常的功能位置，以利于恢复正常的腭咽闭合功能。1 材料与方法1.1 复合骨的制备 部分脱蛋白猪骨的制备方法同实验研究之制备（中华实验外科学杂志1993，10（1）：4）；同种异体胚胎骨系采用母体健康、6～9 月胚龄的胎儿四肢长骨骨干，去净周围软组织剖开洗净，按实验研究制备脱钙骨方法处理和贮存。
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沙枣多糖的提取工艺研究
目的:研究沙枣多糖提取工艺,并通过对沙枣粗多糖中蛋白质的除去方法进行比较研究,探讨不同方法对多糖的提取率及纯度的影响.方法:煎煮法提取；采用三氯乙酸法、鞣酸活性炭法脱蛋白；分光光度法测定多糖含量；考马斯亮蓝G-250比色法测蛋白质含量.结果:3％的三氯乙酸脱蛋白率为58.3％,多糖得率为65.4％；15％的三氯乙酸脱蛋白率为14.8％,多糖得率为66.4％；1％鞣酸脱蛋白率19.9％,多糖得率28.8％.结果显示3％的三氯乙酸法脱蛋白率较15％的三氯乙酸及鞣酸法高出近40％.结论:沙枣多糖的脱蛋白可优先选择3％的三氯乙酸法.
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黑果枸杞多糖提取及脱蛋白、脱色佳工艺的研究
目的 研究黑果枸杞多糖超声提取、脱蛋白和脱色的佳工艺,为进一步纯化提供依据.方法 采用正交试验法,考察料液比、超声时间、超声功率对黑果枸杞多糖提取率的影响,考察Saveg试剂与粗多糖药液比、处理时间、处理温度对多糖保留率、蛋白脱除率的影响.采用正交试验法,考察过氧化氢加入量、处理时间、处理温度对多糖保留率和脱色率的影响,确定黑果枸杞多糖提取、脱蛋白、脱色的优条件.结果 超声波提取黑果枸杞多糖料液比为1:10、超声时间为30 min、超声功率为70W时,多糖提取率为7.01％;当Saveg试剂与粗多糖比例为1:2,处理时间为60 min,处理温度为95℃时,多糖脱蛋白率为75.46％;过氧化氢加入量为1.0％,处理时间为2.0 h、处理温度为45℃时,多糖脱色率为62.34％.结论 本方法工艺结果稳定、可靠、影响因素较少,适用于黑果枸杞多糖的提取、脱蛋白、脱色.
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脱蛋白技术应用于钙化不良型釉质发育不全的临床效果
目的:在口内条件下.以钙化不良釉质发育不全恒牙为样本.研究脱蛋白技术对复合树脂冠成功率的影响.方法:总计4个健康儿童32颗釉质发育不全的恒牙,通过赛璐珞冠(strip crowns)和复合树脂修复.左侧牙为对照.右侧牙为实验组.在实验组中,牙齿表面酸蚀后用5%次氯酸钠溶液处理1min.36个月后按照Ryge修改的USPHS标准检查临床效果.结果:脱蛋白处理对修复体解剖形态没有影响.36个月后两组修复体的颈部密合性与基线比较都不佳.两组都未发现新龋.讨论:脱蛋白技术不能显著地改变粘结修复的效果,然而长期随访显示.临床上对钙化不良型釉质发育不全应用树脂修复是成功的.
