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红花黄色素对老龄小鼠肝线粒体氧化损伤保护作用的实验研究
目的:探讨老龄小鼠肝线粒体结构和功能的增龄性改变和红花黄色素(Safflower Yellow Pigment, SYP)对肝线粒体抗氧化损伤的保护作用.方法:以衰老小鼠为研究对象,测定了肝线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性,Ca2+-ATPase活性、复合体Ⅰ及复合体Ⅱ+Ⅲ活性,观察不同剂量SYP对上述各指标的影响.结果:老年组肝线粒体Mn-SOD活性、Ca2+-ATPase活性、复活体Ⅰ和复合体Ⅱ+Ⅲ活性显著降低,而MDA含量升高;SYP大、中剂量组可升高Mn-SOD、Ca2+-ATPase、复合体Ⅰ及复合体Ⅱ+Ⅲ活性.结论:红花黄色素通过提高机体抗氧能力、保护复合体酶活性、改善细胞内钙离子超载而起到延缓衰老的作用.
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ZMS对自然衰老小鼠脑M受体调整作用的时效和量效研究
目的:观察滋阴中药知母中活性成分ZMS的不同剂量和不同疗程对老龄小鼠脑M受体的调整作用.方法:纯系老年Balb/c小鼠,每天胃管灌服一定剂量ZMS,以对M受体无选择性3H-QNB为放射配基,用单点放射配基结合分析法测定脑M受体密度,和灌服溶媒的平行老年小鼠做统计比较.结果:ZMS 0.5-5.0mg/d 2个月后能使老年小鼠脑M受体密度明显高于不服药的同龄对照鼠.ZMS 0.5mg/d剂量下,随用药时间延长,对老龄小鼠脑M受体的上调作用越来越明显,用药60d和160d组与对照组比较有显著差异.上述大、中、小三种剂量组的死亡率与老年对照组做x2检验,均明显降低.结论:知母甙元ZMS对老龄小鼠脑M受体具有上调作用,并与剂量和疗程成正相关.
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益气补肾方药对老年小鼠T细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响
为了进一步探讨益气补肾方药延缓免疫衰老的分子机制,我们于2001年11月～2002年6月用自然衰老小鼠为模型,观察了老年小鼠T细胞对抗CD3抗体和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导细胞凋亡的敏感性变化及益气补肾方药的调节作用,报道如下.
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七氟烷与高浓度氧对老年小鼠海马caspase-3的表达及认知功能的影响
目的 探讨七氟烷与高浓度氧对老年小鼠海马半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达及认知功能的影响.方法 健康雄性C57/BL6老年小鼠(14月龄)33只,采用数字表法将其随机分为3组:高浓度氧组(HO组,n=ll):吸100％(体积分数)氧4h;高浓度氧+七氟烷组(HS组,n=11):吸100％(体积分数)氧+2.5％(体积分数)七氟烷4h;对照组(Con组,n=11):吸空气4h.24 h后采用Morris水迷宫法研究3组小鼠麻醉后连续5d找到平台所用的时间(逃避潜伏期)和第5天去除平台后,90 s内穿过原平台的次数.利用蛋白质印记(Western blotting)法检测小鼠海马caspase-3的表达.结果 与Con组相比,HO组的caspase-3表达差异无统计学意义(P＞0.05);HS组的穿越平台次数降低(P =0.023),caspase-3表达显著增加(P =0.036).结论 吸入100％(体积分数)氧对老年小鼠认知功能无影响,2.5％(体积分数)七氟烷与100％(体积分数)氧同时吸入增加老年小鼠海马caspase-3的表达,与老年小鼠产生认知功能障碍有关.
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川芎嗪对异氟烷致老年小鼠记忆障碍的影响
目的:研究川芎嗪对异氟烷致老年小鼠记忆障碍的影响.方法:按分层随机分组将40只老年小鼠分为两大组(即跳台实验和避暗实验大组),每大组各分为两小组(n=10),即NS组(0.9%氯化钠溶液组)、C组(川芎嗪组),用跳台实验和避暗实验分别测定给药当天、给药后第3天的错误次数和潜伏期.结果:避暗实验中,给药当天,与NS组相比,C组潜伏期增加(P<0.05),错误次数减少(P<0.05);给药后第3天.C组的潜伏期及错误次数和NS组无明显差异(P均>0.05).跳台实验中,给药当天,与NS组相比,C组潜伏期增加(P<0.05),错误次数减少(P<0.05);给药后第3天,C组的潜伏期及错误次数和NS组无明显差异(P均>0.05).结论:川芎嗪可以改善异氟烷致老年小鼠近期记忆障碍,而对改善异氟烷致老年小鼠远期记忆障碍无明显作用.
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炎症因子风暴对老年小鼠感染免疫应答的影响
目的 高致病性禽流感感染小鼠后,肺内检测出过量表达的炎症因子,即炎症因子风暴.老年感染者体内更加常见高水平的炎症应答.本文探讨了炎症风暴对老年宿主肺内抗感染免疫应答的影响.方法 采用老年小鼠(18～24月龄)以流感病毒H9N2攻毒,建立了老年小鼠感染模型.对照组为H9N2感染的成年小鼠(6～8周).分别定量分析了H9 N2感染的老年小鼠肺原位和外周血中炎症因子的表达,并在感染的急性期内,收集的小鼠肺组织,分别制备成切片和消化为单细胞悬液.其中,肺组织切片用于免疫组化原位定量分析免疫细胞分布;从细胞悬液中分选出T细胞,进行染色计数.结果 与成年小鼠相比,老年小鼠感染H9 N2病毒后,体重下降显著,生存率仅为50％.但是,与成年小鼠感染后肺组织很少检出炎症因子相比,老年小鼠肺内出现炎症因子风暴,炎症因子IL-6和趋化因子MCP-1异常高表达,且在感染后第2天达到峰值(超过4000 pg/mL),是成年对照小鼠的100～1000倍.老年小鼠感染H9N2病毒后,与成年对照相比,其肺巨噬细胞应答更低,肺中性粒细胞的迁徙能力更弱,感染后第3～7天内更多地滞留在肺内.此外,老年小鼠感染H9N2后第7天,肺内CD8+T细胞数量显著下降,CD4+T细胞数量与比例则维持正常.结论 老年小鼠感染H9N2病毒后肺组织出现炎症因子风暴.参与抗感染免疫应答的细胞种类虽然与成年小鼠无显著差异,但是免疫细胞的迁徙能力降低,参与应答的获得性细胞免疫强度也显著降低.
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天泰1号对自发阿尔茨海默病鼠相关脑区超氧化物歧化酶和脂褐素的定量研究
背景:阿尔茨海默病发病的自由基学说以及氧化损害与阿尔茨海默病发病的关系使抗氧化药物研究成为热点,天然中药中的抗氧自由基损伤作用是否可产生对阿尔茨海默病的干预效应?目的:观察天然中药科研制剂天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能及氧自由基代谢的影响.设计:以实验动物为研究对象,完全随机分组设计的实验研究.单位:一所市级中西医结合临床研究所.材料:实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成.实验动物为昆明种小鼠,清洁级,雄性,13月龄,体质量40～50 g,购自中山医科大学实验动物中心(合格证号:粤检证字第95A07号).干预:实验动物饲养至21月龄,按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选阿尔茨海默病小鼠;实验动物随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号小剂量组、天泰1号大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组,下同).西药对照组给以甲磺酸双氢麦角毒碱片(Hydergine)0.6 mg/kg,天泰1号小、大剂量组分别予天泰1号6.80 g/kg及20.41 g/kg,连续60 d,空白对照组和老年正常组均灌以等量双蒸水.主要观察指标:用跳台实验检测学习记忆成绩;脑组织冰冻切片,免疫组织化学法示大脑皮质及海马超氧化物歧化酶活性;海马CA1区脑组织超薄切片,透射电镜法观察神经元细胞脂褐素;全自动显微图像分析系统定量检测超氧化物歧化酶及脂褐素.结果:阿尔茨海默病鼠学习记忆能力显著降低(P＜0.01);天泰1号能显著改善自发阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆障碍(P＜0.05～0.01),并明显增强中枢大脑皮质和海马超氧化物歧化酶活性(P＜0.05～0.01),降低其神经元细胞脂褐素含量(P＜0.05～0.01),且其作用呈现出一定的量效关系.结论:自发老年痴呆鼠学习记忆相关脑区神经元超氧化物歧化酶活性明显降低,脂褐素显著增多;天泰1号具有显著的抗氧自由基损伤的药效学作用,能显著提高阿尔茨海默病鼠皮质和海马神经元超氧化物歧化酶活性,并降低其脂褐素含量,改善其超微结构.
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鹿茸胶囊对青年及老年小鼠丙二醛含量的影响
鹿茸胶囊是由鹿茸、人参、五味子等中药组成,具有补肾养心、健脑益智、延年益寿等功效.我们的研究证明,鹿茸、五味子对老年小鼠具有抗衰老作用[1、2].本文研究鹿茸胶囊对青年及老年小鼠脂质过氧化产物--丙二醛(MDA)的影响,并探讨其抗衰老的作用机制.
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CpG ODN增强乙肝疫苗在老年小鼠中的免疫应答
目的:探讨CpG ODN对老年小鼠的体液和细胞免疫应答的增强作用.方法:选用老年C57BL/6小鼠,将乙肝疫苗和10 μg、20 μg CpG ODN同时或单独肌注到小鼠体内,两周后以同样剂量加强免疫一次,再过3周后摘除眼球取血,用ELISA方法检测抗HBs IgG抗体和IL-12;无菌取脾脏作HE染色,观察脾脏淋巴细胞变化.结果:10 μg和20 μg CpG ODN与疫苗同时注射组产生的抗体绝对量分别是单独注射疫苗组的3倍和4倍;产生的IL-12水平较对照组有明显升高,且20 μg比10 μg CpG组产生的IL-12水平更高.光镜下各组的脾脏淋巴细胞的变化如下:正常老年鼠组脾脏淋巴细胞较正常青年鼠组明显稀少;老年鼠+10 μg CpG组脾脏淋巴细胞较正常老年鼠组有了明显增加,且细胞核也明显增大;20 μg CpG组增加的更加明显.结论:CpG ODN能增强乙肝疫苗在老年小鼠中的体液和细胞免疫应答.
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枸杞多糖对衰老小鼠IL-2、IL-2R的效应
枸杞子是茄科落叶灌木植物宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)和枸杞(L.chinense Mill.)的成熟干燥果实，具有滋补肝肾、益精明目之功。枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides，LBP)是枸杞子的主要活性成分。现代药理学研究发现，枸杞多糖具有广泛的药理学作用：增强免疫，抗癌抑瘤，抗过氧化、抗衰老，促进造血等[1-4]。近些年有关从枸杞多糖对IL-2影响来探讨其免疫调节机理的报道很多[1,5-7]，但对IL-2R的研究则少见。本文采用老年小鼠和目前应用得较成熟的D-半乳糖致衰老小鼠模型，研究了其IL-2活性、IL-2R表达的变化以及枸杞多糖的作用。
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玉米须对老年小鼠脾脏免疫细胞功能影响的实验研究
目的研究玉米须水煎剂及玉米须粗多糖对老年小鼠脾脏免疫细胞功能的影响.方法用称重法测定小鼠脾脏指数,中性红比色法测量脾脏中巨噬细胞的吞噬功能,MTT法测量脾脏B淋巴细胞增殖能力,以玉米须水煎剂及其粗多糖灌胃老年小鼠30 d,观测其对老年小鼠上述指标的影响.结果老年组小鼠脾脏指数下降,脾脏中巨噬细胞的吞噬功能下降,脾脏B淋巴细胞增殖能力下降;与老年组比较,药物治疗组脾脏指数升高,脾脏中巨噬细胞的吞噬功能升高,脾脏B淋巴细胞增殖能力提高,且玉米须水煎剂与粗多糖对上述指标的影响无差别.结论玉米须水煎剂有提高老年小鼠脾脏免疫细胞免疫功能的作用,其功效成份为粗多糖.
关键词： 玉米须水煎剂/粗多糖 老年小鼠 脾脏免疫细胞 -
玉米须对老年小鼠细胞免疫功能的影响
目的研究玉米须水煎剂及粗多糖对老年小鼠细胞免疫功能的影响.方法用称重法测定小鼠胸腺指数,间接荧光免疫法测量脾脏T淋巴细胞亚群,放射免疫测定法测量血清IL-2含量.以玉米须水煎剂及粗多糖灌胃老年小鼠30 d,观测其对老年小鼠上述指标的影响.结果老年小鼠模型组胸腺指数下降,脾脏T淋巴细胞亚群比例失调,血清IL-2含量下降;与老年小鼠模型组比较,药物治疗组胸腺指数升高,脾脏T淋巴细胞亚群比例由失衡恢复到平衡,血清IL-2含量提高.玉米须水煎剂与粗多糖对上述指标的影响无差别.结论玉米须有恢复老年小鼠细胞免疫功能的作用,玉米须水煎剂中发挥免疫增强作用的成份为粗多糖.
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甲肝-麻疹-水痘联合疫苗对老年小鼠体液免疫功能的影响
目的 研究甲肝-麻疹-水痘联合疫苗对老年小鼠体液免疫功能的影响.方法 将甲肝-麻疹-水痘联合疫苗、甲肝疫苗、麻疹疫苗、水痘疫苗分别注射老年小鼠,观察抗体的阳转率及在不同时间内抗体的消长情况.结果 阳转实验显示,联合疫苗与单价疫苗具有同样良好的免疫原性.抗体检测结果中,联合疫苗产生的甲肝抗体、麻疹抗体与单价疫苗相比,具有显著性差异(P<0.05);水痘抗体与单价疫苗相比,没有显著差异,但抗体产生的时间早于单价疫苗.补体总活性结果中,联合疫苗与单价疫苗相比,具有显著性差异(P<0.05).结论 甲肝-麻疹-水痘联合疫苗中的三种病毒对抗体产生具有正协同作用,联合疫苗对增强老年小鼠体液免疫功能的作用强于单价疫苗.
关键词： 甲肝-麻疹-水痘联合疫苗 老年小鼠 体液免疫功能 -
白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞凋亡作用的实验研究
目的研究白术、附子、肉桂合剂对老年小鼠脑细胞凋亡作用及相关基因表达的影响.方法用TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率,并用免疫组织化学法检测相关基因表达,比色法测定脑线粒体细胞色素C(cytC).以白术、附子、肉桂合剂灌胃老年小鼠30 d,观察合剂对老年小鼠脑细胞凋亡的影响.结果老年小鼠有典型的凋亡特征, bcl-2表达下调,线粒体cytC明显降低.结论白术、附子、肉桂合剂对老龄小鼠脑神经细胞凋亡有明显的抑制作用.
关键词： 老年小鼠 细胞凋亡 线粒体 细胞色素C(cytC) Bcl-2 -
韭子对老年小鼠免疫功能影响的实验研究
目的 研究韭子水煎剂对老年小鼠免疫功能的影响.方法 以韭子水煎剂灌胃老年小鼠30 d,应用流式细胞技术检测小鼠T淋巴细胞亚群、放射免疫方法检测血清白介素-2(IL-2)含量,ELISA方法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)的含量.结果 老年组脾脏T淋巴细胞亚群比例失调,血清IL-2和IgG含量下降;老年韭子水煎剂治疗组脾脏T淋巴细胞亚群由失衡恢复到平衡,血清IL-2和IgG含量提高.结论 韭子水煎剂具有恢复老年小鼠免疫功能的作用.
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人参二醇组皂苷20(s)对大脑中动脉梗死老年小鼠MAPK蛋白表达的影响
目的 探讨人参二醇组皂苷(PDS) 20(s)对大脑中动脉梗塞(MCAO)老年小鼠p-erk1/2、p-JNK2、P-38蛋白表达的影响及其机制.方法 C57BL/6老年小鼠40只,制备老年小鼠MCAO模型,随机分为4组:90 min MCAO组、PDS小剂量组、PDS中剂量组、PDS大剂量组,应用激光多普勒血流仪进行术中脑血流监测,应用Western印迹方法观察各组p-erk1/2、p-JNK2、P-38蛋白表达的变化.结果 与90 min MCAO组比较,中、大剂量PDS组p-erk 1/2、p-JNK2蛋白表达明显增高,P-38蛋白表达无变化.结论 PDS促进MCAO老年小鼠脑p-erk1/2、p-JNK2蛋白表达早期明显升高.
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灵芪安神口服液抗疲劳、耐缺氧、增强记忆力和兴奋性的实验研究
目的观察灵芪安神口服液(LQASL)对老年小鼠耐缺氧、抗疲劳、增强记忆力和兴奋性的作用.方法分老年小鼠组、青年小鼠组、LOASL 20 g/kg*d组和LQASL 40 g/kg*d组,采用灌胃给药途径连续30 d,分别用耐缺氧、游泳、电迷宫实验和旷场分析对小鼠耐缺窒息死亡时间,抗疲劳和记忆能力以及兴奋性进行评价.结果 LQASL能显著提高小鼠耐缺氧、抗疲劳和记忆能力以及中枢兴奋性(P＜0.01),且有一定的量效关系.结论 LQASL能有效地改善机体衰老功能,而有效的延缓衰老.
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老年小鼠淋巴结T淋巴细胞的功能变化
目的 探讨老年小鼠淋巴结T淋巴细胞的功能。方法 采用3 H-TdR掺入法测定淋巴细胞的增殖；3 H-缬氨酸掺入法测定总蛋白合成；以依赖株细胞增殖反应测定法检测IL-2活性；3 H-缬氨酸掺入IL- 2单克隆抗体-IL-2复合物，检测IL-2蛋白合成能力。结果 20月龄老年小鼠和27月龄老年小鼠与4月龄青年小鼠相比，其淋巴结细胞的增殖能力分别下降65.6% 和32.8%；总蛋白合成下降40.2%和48.9%；IL-2活性下降36.6%和71.5%；IL-2蛋白合成能力下降32.9%和57.1%。结论 老年小鼠淋巴结细胞对ConA刺激的增殖能力、总蛋白合成水平、IL-2活性及IL-2蛋白合成水平与青年小鼠相比显著下降。
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葆春丸对老年小鼠免疫功能的实验研究
免疫是一个与衰老有着密切联系的问题.随着年龄的增长,免疫器官和功能随之发生衰老变化,并且反馈性加速了机体的衰老进程.中医学认为肾中所藏"元气"为一身"正气"之根本,有固本御邪的功能,通过补肾可以达到提高机体抗病能力的目的.为此我们选择了补肾填精方"葆春丸",实验观察对胸腺及其几项免疫功能的影响作用.
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山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠大脑衰老影响的研究
目的:探讨山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠大脑衰老的影响.方法:取青年组、老年组、用药组(山茱萸制品几种溶剂萃取部位)小鼠的大脑,检测脑匀浆T-AOC、SOD、NO、T-NOS、ChAT、AChE等指标.结果:老年组与青年对照组相比, ChAT、SOD、AChE、T-AOC、NO、T-NOS等指标差异显著,而用药组尤其是山茱萸制品石油醚萃取部位有一定的改善作用,几组数值均与老年组有显著差异,表现出较好的生物活性.结论:山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠大脑衰老有一定的保护作用,可能是益智作用的表现.
