首页 > 文献资料
-
TWIST1与卵巢癌转移及化疗抵抗
TWIST1是一种进化上高度保守的碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）转录因子，其功能主要是控制和调节原肠胚形成及中胚叶发育。初认为TWIST1主要与胚胎发育有关，但之后更多的研究发现TWIST1在调节组织稳态及炎症过程中发挥重要作用。近年来研究发现，TWIST1通过调节上皮间质转化（EMT）参与肿瘤转移。本文主要介绍TWIST1的功能以及在肿瘤尤其是卵巢癌发生与发展中的作用。
-
肿瘤干细胞与卵巢癌的复发及耐药
卵巢癌复发率高与耐药性强以及缺乏个体化治疗的有效预测因子,是其治疗的瓶颈.肿瘤干细胞是存在于肿瘤细胞群体中的少数干细胞样癌细胞亚群,能够凭借正常干细胞所赋予的"自我更新"能力和处于静止期的特性、DNA损伤的修复能力以及高表达膜转运蛋白、逃脱药物的杀伤作用,从而在化疗后导致肿瘤的复发、转移和耐药.就肿瘤干细胞与卵巢癌的复发与耐药方面的相关性研究进行综述.
-
Wnt/β-catenin信号通路在卵巢癌干细胞增殖、迁移和侵袭中的作用
背景:在肿瘤细胞中,β-catenin降解障碍导致胞浆内游离的β-catenin聚集并与TCF/LEF结合进入细胞核内,启动下游基因转录,诱发Wnt/β-catenin信号通路异常改变.因此,研究β-catenin与卵巢癌干细胞的关系,可为特异性抑制卵巢癌干细胞提供新的思路.目的:观察β-catenin基因沉默后卵巢癌干细胞增殖、迁移与侵袭能力的变化.方法:采用免疫磁珠法从人卵巢癌细胞A2780中分离CD133阳性卵巢癌干细胞.选取70%-80%融合的CD133阳性细胞,分别转染慢病毒pLKO.1-shRNA-β-catenin(实验组)与pLKO.1-shRNA-ctrl(对照组)质粒,转染后72 h,采用Western blot检测两组细胞β-catenin、上皮表型分子E-cadherin和间质表型分子Vimentin的表达,MTT法检测两组细胞增殖活性,Transwel小室实验检测两组细胞迁移与侵袭能力.结果与结论:①转染后72 h,实验组细胞β-catenin蛋白明显低于对照组(P<0.05);②实验组培养2,3 d的细胞增殖能力低于对照组(P<0.05);③转染后72 h,实验组细胞迁移能力、侵袭能力明显低于对照组(P<0.05);④转染后72 h,实验组上皮表型分子E-cadherin蛋白表达高于对照组(P<0.05),间质表型分子Vimentin蛋白表达低于对照组(P<0.05);⑤结果表明,Wnt/β-catenin信号通路参与了卵巢癌干细胞的迁移与侵袭,沉默β-catenin基因表达可抑制卵巢癌干细胞的增殖、迁移及侵袭能力.
-
ALDH1作为卵巢癌干细胞标志物的实验研究
目的：探讨含生长因子无血清培养基（SFM）培养的卵巢癌细胞株（SKOV3）细胞悬浮球对CD133与乙醛脱氢酶1（ALDH1）表达的影响以及ALDH1是否可作为卵巢癌干细胞（ CSC）的标志物。方法用含生长因子的无血清培养基对卵巢癌 SKOV3细胞进行培养作为实验组，以含血清培养基（ SSM）组作为对照，四甲基偶氮唑蓝比色法（ MTT）及平板克隆形成实验、Transwell 侵袭实验检测两组细胞的自我增殖、克隆形成及侵袭能力，通过流式细胞技术检测卵巢癌 SKOV3细胞和悬浮球中 ALDH1、CD133表达情况；体外化疗实验富集 ALDH1 high细胞初步探索 ALDH1在卵巢癌细胞中的作用。结果实验组自我增殖、克隆形成及侵袭能力明显高于对照组（ P＜0．05）；实验组ALDH1 high、CD133＋细胞比例明显高于对照组（P＜0．05）；体外化疗实验表明顺铂连续作用于卵巢癌 SKOV3细胞72 h后，实验组ALDH1high、 CD133＋细胞比例明显增加，ALDH1high细胞比例增加了3．23倍，CD133＋细胞比例增加了2．34倍，与对照组相比较差异显著（P＜0．05）。结论含生长因子的无血清培养基培养卵巢癌 SKOV3细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1，ALDH1可能是卵巢癌干细胞的标志物之一。
-
熊果酸对卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用
目的 探讨熊果酸对于卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用.方法 选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集干细胞,接种于裸鼠皮下,建立裸鼠人卵巢癌干细胞皮下移植瘤耐药模型.随机分为Skov3贴壁细胞组、干细胞组,熊果酸高、中、低剂量组,顺铂组,顺铂联合熊果酸组.连续给药14天,空白组给予0.9％ NaC1溶液.每天测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率.给药结束后,取肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞形态、结构,免疫组化检测ABCG2的表达,TUNEL法检测凋亡细胞.结果 熊果酸可以抑制肿瘤组织生长,并且抑瘤率随剂量增加而上升,熊果酸与顺铂联用明显优于顺铂(P＜0.01).不同剂量的熊果酸干预后,ABCG2的表达下调,肿瘤干细胞凋亡增多,均具有剂量依赖性.并且熊果酸联合顺铂组较单用顺铂组,ABCG2的表达明显被抑制,细胞凋亡数明显升高.结论 熊果酸可以抑制卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠的瘤体生长,通过下调耐药指标ABCG2,促进细胞凋亡,提高顺铂诱导的细胞凋亡来达到逆转耐药的作用.
-
Hedgehog信号通路在卵巢癌中作用研究进展
卵巢癌的发生是一个多因素多步骤过程,可伴一系列致癌因素所致的基因突变及某些信号通路的异常激活.Hedgehog信号通路不仅与胚胎发育、组织形成、再生及修复相关,同时与多种肿瘤细胞的形成、生长和转移具有相关性.当该信号通路异常激活时,可引起肿瘤的发生、发展.Hedgehog信号通路传导异常可导致卵巢癌的发生,并与肿瘤侵袭、转移相关.探讨Hedgehog信号通路与卵巢癌的关系,有助于进一步揭示卵巢癌的发病机制,为卵巢癌的防治提供新的可能途径及作用靶点.本文就Hedgehog信号通路在卵巢癌中作用的研究进展作一综述.
关键词： 卵巢癌 Hedgehog信号通路 卵巢癌干细胞 -
肿瘤干细胞与卵巢癌
卵巢肿瘤干细胞(OCSCs)是存在于卵巢癌组织中的一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞,表面共表达CD44和CD117分子标记.虽然其起源不是很确定,但目前倾向于认为卵巢表面上皮细胞来源于OCSCs.研究OCSCs自我更新机制和表观遗传学的改变,可为肿瘤发生的机制及新药的开发提供很好的基础.
-
TWIST1基因敲低对DFOG抑制OVCAR3源性球细胞自我更新和FoxM1表达的影响
目的:探讨7-二氟甲氧基-5,4'-二-正辛烷氧基金雀异黄素通过下调Twist1/FoxM1表达抑制OVCAR3源性球细胞自我更新作用分子机制.方法:表达TWIST1 shRNA腺病毒感染OVCAR3源性球细胞敲低TWIST1基因表达.肿瘤球形成试验检查细胞自我更新能力.蛋白质印迹法检测细胞Twist1和FoxM1蛋白表达水平.结果:与OVCAR3细胞比较,OVCAR3源性球细胞具有更强自我更新能力以及高水平表达Twist1和FoxM1蛋白.TWIST1 shRNA有效抑制OVCAR3源性球细胞肿瘤球形成和下调Twist1和FoxM1蛋白表达.TWIST1 shRNA协作DFOG(5μM)抑制OVCAR3源性球细胞肿瘤球形成和Twist1和FoxM1蛋白表达.结论:DFOG可能通过调控Twist1表达抑制FoxM1表达,进而抑制OVCAR3源性球细胞自我更新.
-
DFOG抑制卵巢癌A2780细胞系球形成细胞自我更新与活化FoxO3a相关
目的:研究7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素(DFOG)抑制人卵巢癌A2780细胞系球形成细胞自我更新及其作用机制.方法:体外培养A2780细胞,干细胞条件培养基悬浮培养扩增球形成细胞(sphere forming cells,SFCs).Western blot分析SFCs的CD133和CD44蛋白及磷酸化FoxO3a蛋白表达水平;MTT法测定SFCs增殖活性;肿瘤球形成试验检测SFCs自我更新能力.结果:A2780细胞系SFCs具有自我更新能力.与亲本细胞相比,SFCs高表达CD133及CD44并具有更高的磷酸化FoxO3a蛋白表达水平.DFOG以浓度依赖的方式抑制SFCs增殖与自我更新,并下调SFCs中磷酸化FoxO3a蛋白水平.结论:DFOG抑制人卵巢癌A2780细胞系球形成细胞自我更新与其活化FoxO3a蛋白相关.
关键词： 卵巢癌 7-二氟甲氧基-5 4'-二正辛烷金雀异黄素 卵巢癌干细胞 自我更新 -
7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素对卵巢癌干细胞样细胞自我更新和FoxM1表达的影响
目的:研究7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素(DFOG)抑制人卵巢癌SKOV3细胞系球形成细胞自我更新作用.方法:体外培养SKOV3细胞,干细胞条件培养基悬浮培养扩增球形成细胞(SF-Cs).Western blot分析SFCs的CD133及CD44蛋白及FoxM1表达水平;MTF法测定SFCs增殖活性;肿瘤球形成试验检测SFCs自我更新能力.结果:在干细胞条件培养基中,SKOV3细胞生长为非粘附三维克隆性球体.与亲本细胞相比,SKOV3细胞系SFCs高表达CD133及CD44与FoxM1蛋白.DFOG (0.1,1.0,10.0μmol/L)作用72 h,优先抑制源自SKOV3细胞SFCs增殖与自我更新,并以浓度依赖的方式下调SFCs中FoxM1表达.结论:DFOG抑制卵巢癌干细胞样细胞自我更新与其抑制FoxM1蛋白表达相关.
关键词： 卵巢癌 7-二氟甲氧基5 4'-二正辛烷金雀异黄素 卵巢癌干细胞 自我更新 -
卵巢癌干细胞的分离 、鉴定及初步生物学功能研究
目的 从人卵巢上皮细胞癌建系的SKOV3细胞中分离出CD133CD117表型卵巢癌干细胞 ,探讨其相关生物学特性.方法 利用免疫磁珠技术分选出CD133CD117癌细胞 ,继而进行平皿、软琼脂克隆形成试验 ,无血清培养试验和致瘤试验探讨其初步功能 ;采用反转录聚合酶链反应检测癌细胞Wnt-2基因表达水平.结果 表型CD133CD117癌细胞在平皿、软琼脂和无血清培养基中克隆形成能力明显强于CD133-CD117-癌细胞 ;同时表现出较强致瘤性 ;Wnt-2基因在不同表型癌细胞中存在差异表达.结论 卵巢癌细胞中存在干细胞样癌细胞 ,利用磁珠分选得到的CD133CD117癌细胞具有干细胞的相关特性 ,为卵巢癌干细胞生物学特性的研究及靶向治疗提供依据.
-
卵巢癌干细胞对5种化疗药物的耐药性及其机制
目的 探讨卵巢癌干细胞(Ovarian Cancer Stem cells,OCSCs)针对化疗药物耐药的作用机制.方法 通过免疫磁选方法分离和纯化OCSCs,对比普通卵巢癌细胞(EOC),观察在紫杉醇、卡铂、顺铂、5-FU、阿霉素5种化疗药物作用下OCSCs耐药的情况.通过定量PCR,分析EOC与OCSCs中ABCG2、ABCB1、Nanog、MMP-2和MMP-9基因的表达水平.结果 从HO8910细胞分离的CD44+ CD117+细胞,对卡铂、顺铂、紫杉醇、阿霉素和5-FU等化疗药物的耐药性明显强于HO8910细胞(P＜0.05).定量PCR检测发现CD44+ CD117+细胞中ABCG2、ABCB1、Nanog、MMP-2和MMP-9基因的表达显著高于HO8910细胞(P＜0.05).结论 与EOC相比,OCSCs对多种化疗药物的耐药性更为明显的机制可能与其较高水平表达ABCG2,ABCB1,Nanog,MMP-2和MMP-9基因有关.
-
上皮源性卵巢癌干细胞的研究进展
肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)是肿瘤组织内具有自我更新能力以及无限增殖和多向分化潜能的一群细胞,对化疗药物耐受.卵巢癌干细胞(epithelial ovarian cancer stem cells,EOCSCs)在卵巢癌的发生发展、侵袭转移和耐药复发过程中都起到了重要作用.传统的肿瘤细胞减灭术联合顺铂、紫杉醇全身化疗对减小肿瘤体积,缓解临床症状具有一定的作用,但治疗后残留的EOCSCs能够短时间内重建肿瘤组织,是卵巢癌复发和难治的根本原因.深入了解EOCSCs的生物学特性,探索EOCSCs的发生发展机制,研究针对EOCSCs的靶向治疗药物,是抗肿瘤治疗的关键.
-
缺氧条件下缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1对人卵巢癌Skov3干细胞耐药的逆转作用
目的:探讨缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1在缺氧条件下逆转人卵巢癌干细胞Skov3耐药的机制.方法:选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集肿瘤干细胞.分别于常氧及缺氧条件下检测不同浓度顺铂干预Skov3贴壁细胞及干细胞后测定顺铂对于两种细胞的抑制作用,及缺氧后干性指标、耐药指标ABCG2及HIF-1α的表达.当给予HIF-1α抑制剂YC-1后,测定顺铂对Skov3干细胞的抑制作用.并且检测干细胞干性指标、ABCG2及HIF-1α的mRNA表达.结果:悬浮培养的Skov3干细胞的干性指标CD44、NANOG、OCT-4及耐药指标ABCG2较贴壁细胞升高,且缺氧培养后,随着HIF-1α表达的升高,CD44、NANOG、OCT-4及ABCG2的表达也明显升高,P＜0.05.干细胞的耐药性高于贴壁细胞,且缺氧培养耐药性增加.当给予YC-1后,干细胞耐药性下调,HIF-1α出现抑制,同时其干性指标CD44、NANOG、OCT-4、耐药ABCG2明显下调,P＜0.05.结论:YC-1在缺氧条件下通过抑制HIF-1α下调ABCG2的表达逆转Skov3干细胞耐药.
关键词： 缺氧诱导因子 缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1 卵巢癌干细胞 耐药
