首页 > 文献资料
-
帕米膦酸二钠与唑来膦酸对体外培养人γδT细胞的杀伤功能影响比较
目的 比较帕米膦酸二钠与唑来膦酸体外培养人γδT细胞的杀伤功能.方法 用帕米膦酸二钠与唑来膦酸分别扩增人外周血γδT细胞.用CCK-8检测细胞增殖情况;第10天流式细胞术检测帕米膦酸二钠与唑来膦酸培养的γδT细胞的穿孔素、颗粒酶B、CD107a和CD178的表达情况.CCK8法检测诱导后γεT细胞对肺癌细胞株A549、胃癌细胞株SGC-7901、胰腺癌细胞株SW-1990的杀伤活性.结果 帕米膦酸二钠较唑来膦酸组(P＜0.05)能明显提高γδT细胞的表达.唑来膦酸组在γδT细胞颗粒酶、CD107a和CD178表达明显高于帕米膦酸二钠组,但是穿孔素的表达无显著性差别(P＞0.05).结论 唑来膦酸培养的γδT细胞一些功能表达明显表面高于帕米膦酸二钠组.但在效靶比低于20∶1时,二者培养的γδT细胞对A549、SGC-7901、Sw-1990的杀伤活性上无明显差异(P＞0.05).当效靶比高于20∶1时,唑来膦酸组的杀伤活性高于帕米膦酸二钠组(P＜0.05).
-
CFSE标记结合流式细胞术在研究NK细胞分裂与杀伤功能中的应用
目的 建立并优化CFSE标记结合流式细胞术检测人NK细胞分裂、增殖和杀伤功能的方法.方法 利用CFSE标记磁珠纯化的人NK细胞,加或不加IL-2进行培养.分别在第3、5、7天收集细胞,流式细胞术对NK细胞的分裂增殖进行检测;利用IL-2活化NK细胞作为效应细胞,与靶细胞(K562细胞)按不同效靶比在37℃5%CO_2培养箱共孵育4 h加入碘化丙啶(PI),流式细胞术检测CFSE~+PI~+K562细胞(死亡的靶细胞)的百分率.结果 CFSE标记的NK细胞在IL-2的作用下第5天即可观察到细胞增殖,至第7天80%以上的NK细胞均发生增殖,分裂1～6次.在对NK细胞杀伤功能的研究中,发现IL-2刺激后NK细胞的杀伤功显著增强.此外,当IL-2或IL-12活化的NK细胞作用于不同的靶细胞时,均可有效地杀伤靶细胞.结论 以CFSE标记技术结合流式细胞术可在单细胞水平客观精确地对NK细胞的增殖、分裂和杀伤功能进行分析.本方法灵敏度高、操作简便易行、重复性好,对其他淋巴细胞亚群功能的研究具有重要的借鉴意义.
-
病毒灭活血浆对人CIK细胞功能影响的体外实验研究
目的 利用CIK细胞(细胞因子诱导的杀伤细胞)来研究亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆是否会对免疫细胞产生影响.方法 对10名健康献血者外周血单个核细胞分别采用病毒灭活血浆和新鲜冰冻血浆培养人CIK细胞,观察2组培养体系中CIK细胞的扩增情况；用流式细胞仪(FCM)检测CIK细胞CD3+ CD56+表达；检测经白藜芦醇终浓度为0.8 μmol/L诱导48 h后的CIK细胞穿孔素和颗粒酶B的含量变化；以及用乳酸脱氢酶法测定CIK细胞杀伤SGC-7901细胞活性.结果 新鲜冰冻血浆与病毒灭活血浆比较培养5、10、15 d CIK细胞的增殖倍数,分别为17.62±1.88、26.31±1.95、46.05±2.86与18.10±1.73、25.97±1.55、45.82±1.15,CD3+ CD56+的表达分别为(12.37±1.38)％、(17.39±2.81)％、(24.3±1.72)％与(11.46±1.35)％、(18.36±1.96)％、(24.08±2.21)％,在促进CIK细胞的增殖以及CD3+ CD56+的表达上,2组无统计学意义(P＞0.05)；经白藜芦醇终浓度为0.8 μmol/L诱导培养48 h后,新鲜冰冻血浆与病毒灭活血浆培养的CIK细胞穿孔素、颗粒酶B、杀伤活性分别为(37.17±1.95)％、(38.79±1.91)％、(46.05±2.86)％和(32.04±1.92)％、(33.50±1.17)％、(45.82±1.15)％,2组无统计学意义(P＞0.05).结论 病毒灭活血浆对人CIK细胞的增殖、细胞穿孔素和颗粒酶B含量变化以及体外杀伤功能均无明显影响.
-
IL-12依赖于TRAIL途径增强NK细胞对Jurkat细胞的杀伤功能
目的:探讨IL-12增强正常人NK细胞对Jurkat细胞杀伤功能的相关机制.方法:纯化正常人NK细胞,分为加或不加IL-12两个刺激组,通过基因芯片筛选差异基因,并通过流式细胞术在单个细胞水平检测相关杀伤分子的表达.结果:基因芯片系统结果显示IL-12刺激组和未刺激组相比,17种基因具有显著性差异(fold change≥10),其中5种基因上调,12种基因下调.在IL-12的刺激作用下,TRAIL的表达在CD56+ CD16+和CD56-CD16+ NK细胞上显著增加.同时,Jurkat细胞亦高表达TRAIL受体TRAIL-R2( DR5).TRAIL中和抗体RIK-2可以阻断IL-12诱导的NK细胞对Jurkat细胞的杀伤功能.结论:TRAIL是IL-12增强正常人NK细胞对Jurkat细胞杀伤功能的主要途径之一.
-
HIV-1感染鼠巨噬细胞功能的检测
目的 探讨HIV-1感染鼠单核/巨噬细胞杀伤功能.方法 建立HIV-1感染小鼠模型,分离各组小鼠巨噬细胞,检测巨噬细胞杀伤功能,用ELISA检测巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子a(TNFa)水平.结果 HIV-1感染鼠巨噬细胞杀伤功能明显低于对照组(P＜0.01),巨噬细胞分泌TNFa水平明显高于对照组.结论 检测AIDS小鼠巨噬细胞杀伤功能,在探讨AIDS患者的非特异性免疫功能及继发感染的原因、疾病预后和控制有非常重要的意义.
-
骨肉瘤免疫治疗的研究现状及未来方向
经过20年的努力,骨肉瘤的治疗已经达到了一个全新的水平.尽管辅助化疗和肺部转移灶的手术切除有确定临床治疗效果.但是仍有部分细胞逃逸化疗的杀灭作用而发生肺部转移,是患者死亡的主要原因,因此骨肉瘤治疗研究的重点在于提高非特异性免疫的肿瘤杀伤功能,建立过继性免疫治疗和骨肉瘤的基因治疗3个途径.
