欢迎来到360期刊网!
学术期刊
  • 学术期刊
  • 文献
  • 百科
电话
您当前的位置:

首页 > 文献资料

  • NK细胞用于肿瘤免疫治疗的研究进展

    作者:田志刚;孙氵内;William J.Murphy

    NK细胞是具有多种免疫学功能的淋巴样细胞。NK细胞的描述可以追溯到25年前,但有关NK细胞识别转化细胞和病毒感染细胞的机制至今仍令人困惑。缺乏真正意义的特有标志也是NK细胞研究的一大难题,目前多采用“阳性筛选”(NK细胞具备相对特异的标志)和“阴性排除”(NK细胞绝对不具备的标志)相结合的办法来给NK细胞定性。人类NK细胞为CD56和CD16阳性,CD3、CD4和CD19为阴性。少部分NK细胞可以为CD8阳性。小鼠NK细胞为NK1.1和ASGM1阳性,CD3、CD4和CD8为阴性。NK细胞杀伤肿瘤细胞不受MHC限制,也不需预先与抗原接触或显示任何记忆反应。NK细胞对肿瘤的杀伤优势表现为直接溶解和分泌细胞因子两个方面,其杀伤肿瘤既可通过穿孔素又可通过Fas配基。NK细胞可以产生TNF-α、IFN-γ和IL-1,这些细胞因子在NK细胞抗癌反应中有十分重要地位。NK细胞具有对异体骨髓快速排异的能力,但并不介导实体组织的移植排异〔1,2〕,NK细胞对异体骨髓的排异功能可以追溯到30年前,但NK细胞对造血干/祖细胞杀伤的机制仍不清楚,可以肯定地说并不仅限于NK细胞的杀伤功能〔1〕。

  • 云芝多糖增强人NK细胞杀伤功能的体外研究

    作者:孙飞;陶正中;周忠海;吕小婷;陈娜云;陈玲;姚仁南

    目的 探讨云芝多糖(PSK)对体外培养的人自然杀伤(NK)细胞杀伤功能的影响.方法 采集健康成年人外周血,分离单个核细胞(PBMC),加入含白细胞介素(IL)-2的NK细胞培养液.培养第10天时加入不同质量浓度(100、75、50、25、10、5μg/mL)的PSK诱导NK细胞48 h,收集细胞检测.用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测诱导前后NK细胞穿孔素、颗粒酶B、CD107a及NKG2D受体表达(PSK诱导为实验组,同时设不加药物及无细胞的空白对照孔为对照组).通过CCK-8法检测对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性:取质量浓度25 μg/mL PSK诱导48 h后NK细胞,调整细胞浓度至1×109/L作为效应细胞;调整红白血病肿瘤细胞株K562细胞浓度至5×107/L,按效靶比为5∶1、10∶1、20∶1、40∶1、80∶1的比例混合培养于96板内,同时设单独效应细胞孔、单独靶细胞(实验组)和空白孔(对照组).结果 培养10d后NK细胞纯度达到78.70%左右.经PSK诱导48 h后,NK细胞的增殖及功能具有一定浓度依赖性,PSK质量浓度在25 μg/mL对NK细胞的增殖率(51.62%±3.20%)为明显(P<0.01),之后逐渐下降.在质量浓度0 ~ 100 μg/mL可以促进NK细胞的生长和增加NK细胞表面穿素、颗粒酶B、CD107a和NKG2D受体表达,以及增强对红白血病细胞株K562细胞的杀伤活性;尤其是当PSK质量浓度为25 μg/mL时,颗粒酶B、穿孔素、NKG2D和CD107a表达为55.42%±2.34%、70.49%±1.87%、83.45%±1.77%和85.00%±2.02%,显著高于对照组(25.83%±1.31%、40.79%±1.59%、70.66%±2.39%和72.79%±2.31%)(P<0.01).在效靶比80∶1时,实验组杀伤活性为57.63%±3.42%,高于对照组(24.78%±2.47%)(P<0.01).结论 PSK在一定质量浓度下能促进NK细胞的生长,且增强NK细胞的杀伤功能.

  • 3种不同抗凝剂对外周血培养的NK细胞功能影响

    作者:陈玲;吕小婷;徐涛;周忠海;姚仁南

    目的 探讨外周血经3种不同抗凝剂处理后培养的自然杀伤(NK)细胞的增殖率和杀伤功能的影响研究.方法 采集10例年龄(35±5)岁健康志愿者15 mL外周血,分别置于含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2,EDTA组)、细胞保存液(细胞保存液组)和肝素钠(肝素钠组)的抗凝管中.用淋巴细胞分离液收集单个核细胞,在NK细胞培养液中培养单个核细胞12d,并观察细胞生长情况.在第4、6、8、10、12天时,收集细胞用CCK8法检测NK细胞的增殖情况.在细胞增殖明显的第12天收集细胞,通过流式细胞仪检测各组NK细胞的颗粒酶、穿孔素和CD 107a.台盼蓝染色检测细胞活性.通过CCK8法检测各组对肿瘤细胞株K562杀伤活性.结果 通过细胞增殖发现,EDTA组NK细胞增殖不明显,肝素钠组和细胞保存液组增殖明显.第12天时检测发现,肝素钠组增殖倍数为128.15±6.38,细胞保存液组增殖倍数为107.51±5.70;肝素钠组优于细胞保存液组(t=6.20,P=0.00).肝素钠组NK细胞纯度表达为(84.49±2.35)%,也明显高于细胞保存液组NK细胞表达[(77.63±1.37) %].经台盼蓝染色检测,肝素钠组和细胞保存液组细胞活性率均为100%.通过流式细胞仪检测发现,肝素钠组NK细胞颗粒酶B、穿孔素和CD107a的表达都明显高于细胞保存液组(t=12.76、17.76、5.67,P=0.00、0.00、0.00).对肿瘤细胞株K562杀伤结果显示,肝素钠组NK细胞杀伤活性(50.12%±3.42%)明显高于细胞保存液组(41.88%±2.47 %)(t=4.78,P=0.001).结论 肝素钠和细胞保存液均可用于NK细胞培养的血液抗凝,但肝素钠组NK细胞的杀伤功能明显优于细胞保存液组.

  • 多发性骨髓瘤患者NK细胞杀伤功能异常的研究

    作者:韩文敏;张修文;贾祝霞;何金媛;晁红颖;杨建和;肖溶;卢绪章

    目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)患者NK细胞杀伤功能下降的机制.方法 以13例MM患者为研究对象,以30名健康志愿者为正常对照,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中CD3-CD56+ (NK细胞)表面抑制性受体(CD158a和CD158b)以及活化性受体NKG2D、NCRs (NKp30、NKp44、NKp46)的表达水平;ELISA法检测血清可溶性NKG2D配体水平;流式细胞术检测NK细胞对MM细胞株U266细胞杀伤作用的变化.结果 MM患者外周血中NK细胞比例及绝对数、CD158a和CD 158b表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P值均>0.05),两组NK细胞表面均不表达NKp44;与对照组比较,MM患者NK细胞表面活化性受体(NKG2D、NKp30和NKp46)水平均明显降低,血清中可溶性NKG2D配体水平明显升高,差异均有统计学意义(P值均<0.05);用MM患者血清培养后的正常对照者NK细胞对U266细胞的杀伤能力较共培养前明显下降[(25.4±5.9)%对(38.5±6.5)%],差异有统计学意义(P=0.044).结论 MM患者血清可溶性NKG2D配体水平可能是导致NK细胞杀伤活性下降的原因.

  • 2-脱氧葡萄糖对体外培养人γδT细胞CCR5表达及杀伤功能影响

    作者:郑璐;陈永强;刘军权;吕小婷;张娟;孙蕾清;徐晶;周忠海;陈复兴

    目的:观察糖基化抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对γδT细胞增殖、趋化因子受体CCR5和杀伤功能的影响。方法:从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到γδT细胞完全培养基培养获得γδT细胞。用不同浓度的2-DG诱导培养γδT细胞48 h后,用CCK-8法测定不同浓度2-DG组的γδT细胞增殖和杀伤能力;用流式细胞术检测γδT细胞CCR5的表达和杀伤功能指标的影响。结果:培养10 d后的γδT细胞纯度达到(88.18±3.41)%。2-DG浓度在0~1.0 mmol/L时对γδT细胞的增殖影响不明显,而当浓度大于1.0 mmol/L后能显著抑制γδT细胞的增殖。2-DG浓度在0~2.0 mmol/L范围内能促进CCR5的表达,且在0.5和1.0 mmol/L时能促进杀伤指标CD107a和穿孔素的表达及对结肠癌HCT116细胞的杀伤能力。结论:2-DG能促进γδT细胞表面趋化因子受体CCR5的表达,且在一定浓度范围内能提高γδT细胞的体外杀伤功能。

  • AR-A014418对γδT细胞增殖、凋亡及杀伤功能的影响

    作者:郑璐;孙蕾清;陈复兴;周燏;吕小婷;陈玲;李莹;周忠海;陈永强

    目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的 γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响.方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在 γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞.用不同浓度的AR-A014418诱导培养γδT细胞72 h后,用流式细胞术检测各诱导处理组γδT细胞的增殖、凋亡和杀伤能力;用Western blot检测γδT细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达情况.结果:AR-A014418浓度在0.3~10μmol/L时能促进 γδT细胞的增殖并抑制其凋亡.同时促凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Bax表达逐渐减弱,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达逐渐增强.尤其是在3μmol/L时,γδT细胞增殖活性强,而且体外杀伤人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC-7901细胞活性也显著提高.结论:GSK-3β抑制剂AR-A014418在3μmol/L浓度时,可以抑制体外扩增γδT细胞的凋亡,并能增强其体外增殖和杀伤肿瘤活性,提示AR-A014418具有一定的免疫调节功能,为今后用于体外扩增γδT细胞提供实验依据.

  • 金丝桃苷增强人γδT细胞增殖及杀伤功能研究

    作者:李莹;周燏;孙蕾清;周忠海;吕小婷;徐明;李昳;刘军权

    目的:研究金丝桃苷对人γδT细胞增殖及功能的影响。方法:以异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的金丝桃苷处理,CCK-8法检测细胞增殖。 LDH法检测金丝桃苷对前列腺癌细胞DU-145的杀伤活性。流式细胞仪检测处理前后γδT细胞上穿孔素、颗粒酶、CD107 a、IFN-γ的表达情况。结果:异戊烯焦磷法能在体外成功培养出高纯度的γδT细胞。金丝桃苷在μg/ml范围内可显著促进γδT细胞增殖。金丝桃苷作用于γδT 细胞后杀伤DU-145的能力明显增强,且在3.13~12.5μg/ml浓度时γδT 细胞上颗粒酶、穿孔素、IFN-γ的表达显著升高,与对照组相比有统计学差异。金丝桃苷对γδT细胞上CD107 a的表达无明显影响。结论:金丝桃苷通过增强γδT细胞上颗粒酶、穿孔素、IFN-γ的表达来增强其杀伤DU-145的作用。

  • 靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体T细胞的构建及其对肿瘤细胞的杀伤

    作者:郝瑞栋;田芳;杨振莉;汪敏亮;张大挺;李彦涛;凡鹏程;吴国祥;朱学军;刘根桃

    目的:探索通过嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)以治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的方法.方法:构建基于鼠源BCMA scFv的CAR-BCMA分子,包装为慢病毒载体并感染健康人T细胞构建CAR-BCMA-T细胞;构建BCMA阳性细胞系A549-BCMA、A549-BCMAOFP和K562-BCMA作为靶细胞.将CAR-BCMA-T细胞与构建的靶细胞和人骨髓瘤细胞U266共孵育,CCK-8法和流式细胞术检测其对BC-MA阳性肿瘤细胞的杀伤能力.构建MM患者来源CAR-BCMA-T细胞并检测其杀伤靶细胞A549-BCMA的能力,并采用ELISA和流式细胞术检测CAR-BCMA-T细胞IFN-γ的释放水平.结果:健康人来源的CAR-BCMA-T经过11d培养扩增300倍,阳性率达到43%;成功构建BCMA阳性靶细胞.在5:1效靶比下,CAR-BCMA-T对A549-BCMA、K562-BCMA和U266细胞的杀伤率分别在80%、60%和80%左右,显著高于对BCMA阴性细胞的杀伤率,且杀伤力与靶细胞的BCMA表达强度相关.在效靶比20:1时,MM患者来源CAR-BCMA-T细胞对靶细胞A549-BCMA的杀伤率达到95%以上,并且大量分泌IFN-γ.结论:本研究成功构建了健康人及MM患者来源的靶向BCMA的CAR-T细胞,其能够有效特异杀伤BCMA阳性的肿瘤细胞.

  • 全反式维甲酸对基因免疫应签的调节作用(摘要)

    作者:喻三红

    目的研究全反式维甲酸(ATRA)对TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的特异性细胞免疫与体液免疫应答的调节作用.方法肌肉注射重组质粒TR421-hCGβDNA(每只鼠50 μ/100μl)初次免疫小鼠,以灌胃的方式给予ATRA,并以灌溶剂和TR421质粒免疫为对照;3周与6周后经同样的方式加强免疫各组小鼠,采用ELISA方法对基因免疫小鼠血清中IgG抗体水平进行动态观察,分析小鼠血清中IgG抗体亚类;3H-TdR掺入法测定特异性细胞增殖和细胞杀伤功能.结果ELISA结果表明,TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生较高的抗hCGβ抗体水平,ATRA增强TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的抗hCGβ特异性IgG抗体水平并且伴随IgG2a/IgG1显著性降低;TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生较强的淋巴细胞增殖活性和CTL活性,ATRA抑制TR421-hCGβ质粒基因免疫诱生的特异性细胞增殖和细胞杀伤功能.结论ATRA促进基因免疫诱生的TH2免疫应答,抑制TH1型免疫应答,为改变基因免疫诱生的特异性免疫应答类型提供了一条新的途径.

  • 可溶性NKG2D配体降低NK细胞对骨髓瘤细胞杀伤功能的研究

    作者:韩文敏;贾祝霞;姜玉;朱志超;张修文;肖溶;杨建和;卢绪章

    人自然杀伤细胞(NK细胞)是人体抗肿瘤免疫的第一道防线,NK细胞通过识别自我的MHCⅠ类分子或Ⅰ类分子样的独特受体,可以识别和杀伤体内的肿瘤细胞[1-2].体外实验[3-4]证实NK细胞对骨髓瘤细胞细胞具有很强的杀伤能力,但是肿瘤患者体内的肿瘤细胞可以逃逸免疫细胞的识别和杀伤,而且通过NK细胞输注治疗骨髓瘤患者并没有得到预期的效果,说明MM患者体内环境抑制NK细胞功能.作者以前的研究[5-6]表明NKG2D介导免疫细胞对骨髓瘤细胞的杀伤作用,作者通过检测MM患者血清中可溶性NKG2D配体水平变化,并通过细胞株模型探讨可溶性的NKG2D配体对NK细胞抗骨髓瘤能力的影响.

  • 病毒灭活血浆对人自然杀伤细胞功能影响的体外实验研究

    作者:姚仁南;史高群;王涛;陈玲;周忠海;刘军权;陈复兴

    目的:探讨病毒灭活血浆对人自然杀伤细胞( natural killer cell ,NK细胞)生长、细胞表型以及体外杀伤活性的影响。方法采用病毒灭活血浆和新鲜冰冻血浆分别培养人NK细胞,观察2组培养体系中NK细胞的扩增情况;用流式细胞仪(FCM)检测NK细胞CD3-CD56+表达以及NK细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的含量变化;用乳酸脱氢酶法测定NK细胞杀伤SGC-7901细胞活性。结果病毒灭活血浆与新鲜冰冻血浆比较,在促进NK细胞的增殖以及CD3-CD56+的表达上无明显差异( P>0.05);检测培养10天的NK细胞,病毒灭活血浆培养组细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a以及杀伤活性与新鲜冰冻血浆培养组也无明显差异(P>0.05)。结论病毒灭活血浆对人NK细胞的增殖、细胞表型和体外杀伤功能均无明显影响。

  • 儿童噬血细胞综合征37例临床特点及转归

    作者:赵瑞雪;贺孝良;潘国权;李昌崇

    噬血细胞综合征(HPS)又称噬血细胞淋巴组织细胞增生症,1952年由Farquhar等首次报道.目前已发现HPS患者的T细胞和NK细胞的杀伤功能降低或缺如,体内免疫功能失衡,体内存在高细胞因子血症,从而引起HPS多种复杂的临床表现.该病起病迅速,病程凶险,而且常伴随其它疾病,给诊断和治疗带来了较大困难.现将本院2002年7月至2007年6月收治的37例HPS的临床特点分析如下.

  • 人参皂苷Rb1拮抗达沙替尼抑制NK细胞杀伤卵巢癌的研究

    作者:李红英;陈红霞;汪蕾

    目的 研究抗癌药达沙替尼对自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤卵巢癌细胞的抑制效应,并探讨人参皂苷Rb1拮抗这种免疫抑制效应的作用及其分子机制.方法 分别用达沙替尼、人参皂苷Rb1以及达沙替尼联合人参皂苷Rb1预处理NK细胞,未经药物处理的NK细胞设为对照.采用CFSE/PI双染色法,经流式细胞仪检测与NK细胞混合培养的卵巢癌HO-8910细胞的死亡率来明确NK细胞的杀伤功能;采用Annexin V-FITC/PI双染色法测定NK细胞的凋亡率来明确其生存活力;采用real-time PCR法测定NK细胞颗粒酶B的mRNA表达量;采用免疫印迹法检测NK细胞ERK的蛋白水平.结果 与对照组相比,达沙替尼处理组的NK细胞对卵巢癌HO-8910细胞的杀伤率显著下降(P<0.01),NK细胞的颗粒酶B的mRNA水平和磷酸化ERK(pERK)表达均下调;达沙替尼合并人参皂苷Rb1处理组的NK细胞对卵巢癌HO-8910细胞的杀伤率较达沙替尼组升高(P<0.05),而且颗粒酶B的mRNA水平、pERK表达均较达沙替尼组有所恢复;与对照组相比,人参皂苷Rb1单独处理组的NK细胞的生存活力、颗粒酶B水平、pERK表达量以及杀伤功能均无显著差异(P<0.05).结论 达沙替尼对NK细胞杀伤卵巢癌细胞有抑制效应,可能与下调NK细胞的杀伤介质颗粒酶B和抑制ERK磷酸化有关.人参皂苷Rb1虽然不能直接活化NK细胞,但是能拮抗达沙替尼对NK细胞的上述抑制效应,提示联用人参皂苷Rb1能减少抗癌药物达沙替尼对免疫效应细胞的抑制作用.

  • 不同部位皮下裸小鼠移植瘤特点比较

    作者:邱小华;童波;蒋建红;李羲

    裸小鼠先天性无胸腺,主要的缺陷为:11号染色体上有一个隐性突变基因,毛发生长发育异常,表现为全身形似无毛,呈裸体外表,无胸腺,仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮,这种上皮不能使T细胞正常分化,缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能,因而细胞免疫力低下,不能执行正常T细胞功能.为了比较不同皮下部位裸小鼠移植瘤特点,笔者选用了26只SPF级BalB/CA-nu品系3~4周龄的裸鼠做实验,现报告如下.

  • γδT细胞的体外扩增及对不同肿瘤细胞的杀伤性研究

    作者:张光辉;邵小燕;严小敏;魏士钧

    目的 通过体外制备γδT细胞,研究γδT细胞对不同肿瘤细胞的杀伤性.方法 采集2018年1月至3月第三军医大学新桥医院招募的20例健康志愿者外周静脉血,使用唑来膦酸联合白细胞介素-2(IL-2)对人外周血单个核细胞(PBMC)进行诱导扩增,获取γδT细胞.流式细胞仪检测第0、7、10、14、16天的细胞纯度.使用CCK-8法检测其对肿瘤细胞的杀伤性,以培养第14天的细胞作为效应细胞,以乳腺癌BCap-37、肝癌Bel-7402肿瘤细胞作为靶细胞,分别在效靶比5∶1、10∶1、20∶1下进行细胞杀伤活性检测.结果 流式细胞检测第0、7、10、14、16天γδT细胞的纯度分别为(3.35±1.32)%、(50.76±5.76)%、(80.43±4.53)%、(90.56±3.34)%、(89.54±4.42)%,差异有统计学意义(F=18.431,P=0.012).5∶1组、10∶1组、20∶1组的γδT细胞对BCap-37的杀伤率分别为(31.3±2.0)%、(48.7±1.6)%、(71.3±2.4)%,差异有统计学意义(F=16.724,P=0.016),进一步两两比较,10∶1组高于5∶1组(P=0.013),20∶1组高于5∶1组(P=0.017),20∶1组高于10∶1组(P=0.011),杀伤率随着效靶比的增高而增大.5∶1组、10∶1组、20∶1组的γδT细胞对Bel-7402的杀伤率分别为(34.5±2.0)%、(52.4±1.9)%、(74.5±1.6)%,差异有统计学意义(F=18.253,P=0.013),进一步两两比较,10∶1组高于5∶1组(P=0.015),20∶1组高于5∶1组(P=0.012),20∶1组高于10∶1组(P=0.015),杀伤率随着效靶比的增高而增大.结论 使用唑来膦酸联合IL-2诱导PBMC可以获得高纯度的γδT细胞,扩增的γδT细胞对BCap-37和Bel-7402肿瘤细胞有明显的杀伤作用.

  • N-乙酰-D-乳糖胺、抗 CD28单克隆抗体对肺癌患者来源的 CIK细胞增殖及杀伤功能的影响

    作者:石晓娟;乔永涛;杨黎;杨双宁;黄建敏;赵璇;李红;张毅

    目的:观察N-乙酰-D-乳糖胺联合抗CD28单克隆抗体对细胞因子诱导的杀伤细胞( CIK细胞)增殖及杀伤功能的影响。方法:提取32例肺癌患者的外周血单个核细胞,分为对照组、抗CD28单克隆抗体组、N-乙酰-D-乳糖胺组及抗CD28单克隆抗体和N-乙酰-D-乳糖胺联合组(联合组),依据CIK细胞培养流程培养和分组处理后于第4、8、10、12、14天测定各组细胞增殖,第14天测定IL-2、IL-10、γ干扰素及肿瘤坏死因子-α的分泌及对K562细胞的杀伤作用。结果:抗CD28单克隆抗体、N-乙酰-D-乳糖胺单独作用均能促进CIK细胞增殖及IL-2及肿瘤坏死因子-α的分泌,增加效应细胞(CD3+CD8+细胞)的比例,增强CIK细胞对K562细胞的杀伤能力(P<0.05),但二者联合没有协同效应( P>0.05)。结论:N-乙酰-D-乳糖胺与抗CD28单克隆抗体均能增强CIK细胞增殖及杀伤功能,但二者无协同作用。

  • EpCAM特异性免疫效应细胞对EpCAMhigh腺癌细胞的体外杀伤实验研究

    作者:周晔;张树交;高飞;蔡建辉

    背景:上皮细胞粘附分子(EpCAM CD326)高表达于多种实体腺癌细胞表面,包括结肠癌、胃癌、乳腺癌等。EpCAM在胃肠道肿瘤细胞>95%,与肿瘤细胞的增殖及肿瘤预后有密切关系。近年来, EpCAM已经成为肿瘤免疫治疗的一个新靶点,培养EpCAM特异性免疫效应细胞(Ep-effector)制备新高效特异性杀伤细胞。目的:探讨体外制备的EpCAM抗原特异性免疫效应细胞的特异性杀伤功能。并比较其与腺癌细胞裂解物特异性免疫效应细胞、CIK细胞杀伤功能的差异。方法:采集健康成人外周血,分离淋巴细胞及imDCs。体外诱导淋巴细胞中T细胞转化为CIK细胞并扩增。本实验首次以纯化EpCAM多肽抗原负载imDCs生成EpCAM-mDCs(Ep-mDCs),Ep-mDCs与自体CIK细胞体外共培养,制备成纯化EpCAM抗原特异性DC-CIK-CTL效应细胞(Ep-effector)。相似的方法,制备LS174-T腺癌细胞全抗原特异性DC-CIK-CTL效应细胞(LS-effector)。设单纯CIK组、LS-effector组及Ep-effector组,选择EpCAMhighLS174-T结肠腺癌细胞及EpCAMlowPaCa-2胰腺癌细胞作为靶细胞。细胞毒试验(CCK-8法)检测不同效靶比时各组效应细胞对EpCAMhigh的LS174-T及EpCAMlow的PaCa-2的杀伤效率。结果:体外制备LS-mDCs及Ep-mDCs表面分子表达量无差异(P>0.05)。随效靶比(E∶T)增高,各组效应细胞对LS174-T及PaCa-2的杀伤效率均升高。Ep-effector组对LS174-T的杀伤效率高于LS-effector组及单纯CIK组,LS-effector组与单纯CIK组无统计学差异;对PaCa-2的杀伤效率,两两组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论:本实验首次应用EpCAM负载人外周血来源DC细胞制备Ep-mDCs,并证实其拥有激活T细胞生成特异性CTL的功能,由其制备的效应细胞(Ep-effector)对EpCAMhigh腺癌细胞具有更高的特异性杀伤活性。

  • 呼吸道感染性疾病与单核细胞ADCC效应变化关系的研究

    作者:黄瑾;王秀丽;林树青

    呼吸道感染是世界范围内发病率高,与人民健康紧密相关的疾病,许多变态反应参与的疾病与呼吸道感染关系密切,而病原微生物感染呼吸道后引起免疫功能发生变化较早的是单核/巨噬细胞,它除对病原体有非特异吞噬作用外,尚有特异性杀伤功能,即抗体依赖细胞介导的细胞毒(antibody dependent cell mediated cytotoxicity, ADCC)作用.本文通过了解呼吸道急、慢性感染不同阶段单核细胞ADCC效应变化,探讨单核/巨噬细胞ADCC效应在呼吸道感染性疾病中所发挥的作用.

  • 肿瘤的细胞免疫治疗

    作者:傅冰洁;张萌;李欣

    肿瘤是各种致癌因素诱发细胞恶变和多种免疫细胞抗肿瘤监测杀伤功能两种"阴阳"机制互动失衡导致的恶性疾病.

  • 恶性肿瘤患者链式激活的免疫细胞治疗后肿瘤坏死因子α的变化及临床意义

    作者:巩佃霞;李贵新;路中;傅玲;傅俊凯

    体内回输免疫活性细胞的过继免疫疗法已成为一种重要的肿瘤综合治疗方法[1].它是将体外激活的自体或异体免疫效应细胞输注给患者,以杀伤患者体内的肿瘤细胞.链式激活的免疫细胞(cascade primed immune cells,CAPRI)是德国慕尼黑大学医学院免疫研究所RudolfWank教授的一项用于肿瘤生物治疗的专利技术.该技术是应用患者的外周血淋巴细胞,经活化刺激,获得对肿瘤的特异性杀伤功能,回输后可在体内杀伤肿瘤.实验证明,它不仅能有效提高肿瘤细胞表面抗原的表达,从而恢复已经被阻断的细胞毒细胞的杀伤过程,且具有识别微转移细胞的能力,从而防止转移的发生[2-3].本实验是采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测实体肿瘤患者经CAPRI治疗后外周血血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的变化并对肿瘤患者进行临床疗效观察.

26 条记录 1/2 页 « 12 »

360期刊网

专注医学期刊服务15年

  • 您好:请问您咨询什么等级的期刊?专注医学类期刊发表15年口碑企业,为您提供以下服务:

  • 1.医学核心期刊发表-全流程服务
    2.医学SCI期刊-全流程服务
    3.论文投稿服务-快速报价
    4.期刊推荐直至录用,不成功不收费

  • 客服正在输入...

x
立即咨询