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两性霉素B免疫作用的研究
本研究的目的是发展一种简便快速的检测两性霉素B(Amphotericin B,AMB)血药浓度的酶联免疫吸附试验(ELISA).以AMB与小牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)连接物作为免疫原,AMB与中国鲎血蓝蛋白(TTH)的连接物作为检测抗原,用弗氏完全佐剂乳化抗原,分别免疫日本大耳兔、新西兰大白兔和BALB/c小鼠.大白兔的体重为2.5kg/只,BALB/c小鼠为6~8周龄.
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牛奶和1型糖尿病——关于粘膜免疫功能的争论[Leonard CH. Diabetes,1999,48:1501]
通过对生物喂养模型(BB)大鼠和非肥胖糖尿病(NOD)小鼠饮食与糖尿病发病率的研究,以及在人类流行病学的调查结果表明,在婴幼儿期喂牛奶和/或非母乳喂养是1型糖尿病的危险因素之一。美国儿科学会1994年和1997年推荐在有1型糖尿病家族史的婴儿中进行母乳喂养并推迟接触牛奶的时间。毋须置疑母乳喂养的好处,但对于牛奶与1型糖尿病的关系,目前尚无确凿证据,然而牛乳的争论引发了基因型、粘膜免疫功能和1型糖尿病之间的可能联系。一、饮食和啮齿类1型糖尿病动物模型在BB大鼠和NOD小鼠,用合成氨基酸和酪蛋白降解产物喂养组与未经处理的酪蛋白喂养组相比,糖尿病发生率明显降低,但在BB大鼠,如果加入25%的酪蛋白作为唯一蛋白质来源或小牛血清白蛋白或牛奶蛋白,并不能逆转这种保护作用。Scott等人的研究表明,植物尤其是小麦和大豆中的某些成分,是导致BB大鼠发生糖尿病的主要饮食因素。在NOD小鼠则尚无此类依据。Elliott等人的进一步研究表明,A1酪蛋白的降解产物β-casomorphin(鸦片受体激动剂)有致糖尿病作用,并能被鸦片受体拮抗剂纳洛酮完全阻断。
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雾化吸入γ-干扰素增强免疫低下大鼠肺部抗感染能力的研究
免疫低下患者日益增多,难治性呼吸系统感染是这些患者的主要死亡原因,且已成为临床医学的研究重点。本研究旨在探讨雾化吸入提高肺局部干扰素γ(IFN-γ)水平,对免疫低下大鼠肺部抗感染能力和细胞免疫的影响。 一、材料和方法 1.实验方法:(1)动物模型的制备、分组和标本留取:方法请参见参考文献[1]。(2)肺泡巨噬细胞(AM)的吞噬及杀菌功能检测:白色念珠菌法[2]。(3)AM的Ⅰa抗原表达:间接免疫荧光试验[3]。(4)AM培养上清和血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平检测:酶联免疫吸附(ELISA)法。(5)AM培养上清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF)-α活性的检测:L929细胞毒性试验[4]。(6)血清和BALF中IFN-γ活性的检测:L929细胞病变抑制试验[5]。BALF的测定结果用小牛血清白蛋白的含量校正,以U/ml的形式表示。
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晚期糖基化终产物对人肝细胞株LO2增殖和凋亡的影响
目的:研究晚期糖基化终产物(AGEs)对人正常肝细胞株LO2的作用.方法:以体外培养的LO2细胞株为研究对象,采用MTT法测定不同质量浓度(0、3.75、7.5、15、30、60 g/L)AGEs对LO2生长的抑制作用,应用流式细胞仪分析细胞的凋亡情况,RT-PCR分析不同质量浓度AGEs处理LO2后其IL-1β,TNF-α,HMGB1的基因转录水平变化.结果:当LO2细胞在AGEs质量浓度分别为3.75、7.5、15、30、60 g/L保温48 h后,细胞的增殖均受到显著性抑制,且抑制作用具有剂量依赖性.流式细胞仪分析发现AGEs促使LO2发生凋亡,凋亡率亦随AGEs浓度增高而增加.RT-PCR方法检测显示,AGEs使LO2细胞中IL-1β,TNF-α,HMGB1的基因mRNA的表达水平增高.结论:AGEs可抑制人正常肝细胞株LO2的增殖和诱导其凋亡,并能上调IL-1β,TNF-α和HMGB1基因的表达.