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c-Met在骨骼肌损伤组织肌卫星细胞中的表达
目的 探讨肝细胞生长因子受体(c-Met)在正常和注射心脏毒素后,致肌损伤的肌肉组织中具有再生能力的肌卫星细胞的表达情况;为进一步研究某些肌肉变性疾病,如进行性肌营养不良(DMD)在发病中的分子机制和治疗肌肉退行性变提供参考依据. 方法 C57雄性小鼠12只,饲养于独立送排风笼具(IVC Cage)实验室.随机分为6组,1～6组左侧股四头肌局部注射心脏毒素(5μg/只),右侧股四头肌为对照,1～6组分别在注射后1d、4d、1周、2周、4周、6周颈椎脱臼处死小鼠,完整分离出股四头肌.浸入4%甲醛溶液中固定,常规包埋切片染色,与对照C57小鼠股四头肌进行组织学和免疫组织化反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)比较分析(样本量为10),了解c-Met的原位表达情况. 结果 免疫组织化学和反转录聚合酶链式反应结果显示,正常小鼠股四头肌中c-Met在肌卫星细胞上仅有少量的表达;与对照比较,注射心脏毒素24h后,表达即明显增加并持续到观察终点的第6周,且其表达量在第1周达到高峰且直到观察期间末(第6周),仍高于正常肌肉组织,其差异有统计学意义(P<0.05).结论 c-Met可能是肌肉损伤修复过程的关键蛋白.
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胡蜂蜇人紧急处理早知道
9月中下旬,毒蜂蜇人夺命事件在安康、汉中、商洛等地频频发生.据安康3家大医院统计,3个月内已有230余人被蜇伤,21人不幸殒命.被胡蜂蜇伤者多集中在农村及偏远山区.时值国庆长假的到来,本刊希望喜欢游山玩水的朋友一定要引起足够的重视.秋季胡蜂活动频繁胡蜂(又称马蜂、黄蜂),体大身长,毒性也大.胡蜂的毒性很大,民间有“10只马蜂蜇死一头牛”的说法.胡蜂的蜂毒是由工蜂的毒腺分泌的一种淡黄色透明液体,其中蜂毒肽的含量约占蜂毒的50％.蜂毒肽是一种强烈的心脏毒素,具有收缩血管的作用,同时蜂毒又极易溶于血,因此对心脏的损害极大.
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眼镜蛇(Naja naja atra)神经毒素与心脏毒素分离纯化研究进展
眼镜蛇神经毒素与心脏毒素分别具有显著的镇痛活性和抗肿瘤活性.这两种毒素同源性高,等电点,分子质量以及蛋白结构都很相似,给分离纯化造成一定难度.获得单一成分的神经毒素和心脏毒素是理化性质分析、药理活性研究和临床应用的前提,文章综述了多年来舟山眼镜蛇蛇毒中神经毒素与心脏毒素的分离纯化研究进展.
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广东眼镜蛇毒低分子量多肽的分离纯化与性质鉴定
目的 从广东眼镜蛇粗毒中分离纯化出色谱纯的低分子量多肽并对其部分性质进行鉴定.方法 采用化学沉淀法对蛇粗毒进行预处理,经 Sephadex G-50 凝胶过滤和 UND Sphere S 阳离子交换层析得到高纯度低分子量多肽,用SDS-PAGE及HPLC对产物纯度进行鉴定,并用SDS-PAGE和质谱法测定分子量,采用蛙心灌流法考察产物是否具有心脏毒性.结果 结果表明,经分离纯化后得到两种低分子量多肽GI2和GI3,均为单一组分,可达到色谱纯,SDS-PAGE法测得GI2分子量为14 300 Da,质谱法测得GI3分子量为6 725.8 Da,仅GI2具有心脏毒性,收率分别为9.5%和10.1%.结论 通过化学沉淀预处理,并经2次柱色谱可从广东眼镜蛇毒中分离得到两种色谱纯的低分子量多肽,且收率较高.
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眼睛蛇毒心脏毒素对大鼠心肌细胞收缩及细胞内钙离子的作用
目的研究眼睛蛇毒心脏毒素(Cardiotoxin,CTX)对心肌细胞的形态、收缩幅度和细胞内钙离子([Ca2+]i)的作用.方法应用荧光计量法(以Fura-2/AM为荧光染料)及光学成像系统来测定单个心肌细胞[Ca2+]i和收缩幅度.结果0.001～1μmol/L的CTX使心肌细胞由杆状变成圆形,药物的作用从第1分钟时开始,到第20分钟时趋于稳定.在电刺激存在的情况下,1 μmol/L的CTX初导致电诱导的[Ca2+]i和收缩幅度瞬间增加,接下来[Ca2+]i时程延长,终细胞对电刺激不敏感、突然收缩、[Ca2+]i持续增高.在缺乏电刺激的情况下,1μmol/L的CTX可诱导Ca2+震荡波、持续性[Ca2+]i增高,这种作用与40mmol/L的KCl和10mmol/L咖啡因所引起的[Ca2+]i瞬间增加不同.结论CTX作用初期使[Ca2+]i增高,使细胞[Ca2+]i超载,同时伴随细胞形状的改变.
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舟山眼镜蛇毒心脏毒素-13的纯化、活性及尼群地平对其作用的影响
目的从舟山眼镜蛇(Naja atra)毒分离纯化心脏毒素并观察其心脏毒性作用和探讨作用机制.方法用离子交换和凝胶过滤法从蛇毒中分离纯化心脏毒素,观察其对整体动物,离体器官和组织的作用及作用影响因素.结果从舟山眼镜蛇毒中分离出4个有心脏毒性组分,纯化其中1个定名为心脏毒素-13(Cardiotoxin-13,CTX-13),它含有60个氨基酸,分子质量7.769 ku.小鼠iv LD50为0.756 mg*kg-1.对大鼠离体心脏CTX-13可使冠脉阻力增高,心脏收缩幅度减小,停于收缩期.尼群地平(Nit)能取消CTX-13升高冠脉阻力作用,同时使CTX-13的负性肌力作用逆转为正性肌力作用.CTX-13可诱发猪离体冠脉环呈剂量依赖性收缩,其EC50为26.0 mg*L-1,Nit 0.05 μmol*L-1使其量效曲线平行右移,EC50提高到36.0 mg*L-1.但对于大鼠离体乳头肌Nit 0.83 μmol*L-1对CTX-13所致心脏毒性无明显对抗作用.在整体实验中Ni 0.3 mg*kg-1可使大鼠iv CTX-13的小致死量(MLD)从(444.7±28.5)μg*kg-1提高到(541.2±23.2)μg*kg-1.结论 CTX-13的心脏毒性作用除其直接心脏毒作用外,尚与其收缩冠脉作用有关.
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白头翁及其习用品的鉴别
白头翁具有清热凉血、解毒的作用，主要用于热毒血痢、温疟寒热，血痔等病证，是常用的清热解毒类中药之一。其主要成分是三萜类皂苷和白头翁素。现代药理研究表明，白头翁素是一种很强的心脏毒素，但去其植物的根部，余下的部分又具有强心作用。其可能原因是在白头翁的根中白头翁素的含量很高。同时，白头翁在抗阿米巴原虫、抗阴道滴虫、抗菌等方面均具有很好的疗效。白头翁也是现代研究和应用较多的中药材之一。 由于白头翁在中医药学中的特殊地位和作用，对白头翁药材来源的研究也很有必要。根据《中国药典》(2000年版)，白头翁的来源为毛茛科植物白头翁Pulsatilla chinensis (Bge.) Regel的干燥根。但在实际的应用过程中，由于地方性用药的习惯不同，各地应用的白头翁的来源也有差别。如湖北、江西等地主要用蔷薇科类植物委陵菜Potentilla chinensis Ser.的根或带根的全草；而福建等地用蔷薇科类植物翻白草Potentilla discolor Bge.的块根或全草。从其所含的有效成分看，委陵菜主要含有抗坏血酸、蛋白质、脂肪类等成分，而翻白草主要含鞣质和黄酮类成分，因而，三者的功效也有一定的差别。许多文献对这三种植物的鉴别各自在不同的方面作了介绍。为了便于实际的鉴别工作，本文从药材的性状特征、显微特征和理化鉴别等方面作系统的介绍，并详细列出其鉴别要点。期望本文于实际的鉴别工作有所帮助。
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黄芪针丹参针治疗阿霉素对心脏毒性临床报道
笔者通过多年来临床观察,实践,应用黄芪针配合丹参针联合使用补气,养血,活血化瘀对阿霉素对心脏毒素副作用取得较好疗效.现将临床报道如下.
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蛇毒三指蛋白及其镇痛作用的研究进展
蛇毒中含有多种具有药理作用的多肽及蛋白质,三指蛋白属于其蛋白家族中的一种.三指蛋白止痛无成瘾性,无依赖性,用量少,镇痛作用时间长.为揭示其镇痛机制,从而开发出选择性高、安全性好、副作用小的镇痛药,本文综述了三指蛋白及其镇痛作用的研究进展,以期为相关研究提供参考依据.
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中华眼镜蛇心脏毒素对心肌细胞内钙循环影响的研究进展
中华眼镜蛇(Naja naja atra)俗称饭铲头或吹风蛇 ,是我国十大毒蛇之一.其毒素成分复杂 ,临床表现多样、复杂 ,主要为皮肤软组织局部肿胀、坏死 ,严重者可致心脏受损 ,多器官功能障碍综合征 ,终导致死亡.
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蛇毒心脏毒素诱导肺癌A549细胞的凋亡机制研究
目的:研究眼镜蛇心脏毒素(CTX)诱导肺癌A549细胞凋亡的机制.方法:MTT法测定CTX体外细胞毒性作用；吉姆萨染色法观察CTX对A549细胞形态学的影响;线粒体膜电位(JC-1)法检测CTX诱导A549细胞后细胞JC-1的变化;流式细胞仪检测CTX对A549细胞凋亡的影响;Western blot法测定细胞色素C、凋亡蛋白酶前体(Procaspase)-3、Procaspase-9的表达;通过S180小鼠肉瘤模型检测CTX体内抗肿瘤活性.结果:CTX作用于A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.770 μg/ml;0.5、1.0、2.0 μg/mlCTX可引起A549细胞明显缩小,在高倍镜下可观察到胞核皱缩,形成染色质边集等形态学改变;流式细胞仪检测到CTX使A549细胞出现凋亡,并且具有量效关系;5 μg/ml CTX作用于A549细胞0.5 h可使细胞JC-1降低;胞浆中检测到细胞色素C时,Procaspase-9的含量没有明显变化,随后逐渐减少,CTX诱导细胞凋亡具有时效关系;体内抑瘤实验显示在剂量为0.5、1.0、2.0 mg/kg时CTX对A549细胞有明显的抑制作用.结论:CTX对A549细胞有细胞毒性,可以使线粒体内细胞色素C释放,并激活Procaspase-9和Procaspase-3诱导A549细胞的凋亡.
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胰岛素样生长因子1受体在肌损伤组织肌卫星细胞的表达
目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(Insulin like growth factor 1 receptor,IGF1R)在正常和注射心脏毒素后,致肌损伤的肌肉组织中具有再生能力的肌卫星细胞表达情况；为进一步研究某些肌肉变性疾病的分子学发病机制和治疗方法提供参考依据.方法:取C57雄性小鼠12只,随机分为6组,1～6组左侧股四头肌局部注射心脏毒素(Cardiotoxin,CTX),5μg/只,右侧股四头肌作为自身对照,于注射后1、4d及1、2、4、6周处死小鼠,分离两侧股四头肌,取材行HE染色、免疫组织化学染色及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测分析,了解IGF1R的原位表达情况.结果:HE染色示肌肉组织从损伤修复到再生的全过程,免疫组织化学及RT-PCR显示:正常小鼠股四头肌中IGF1R在肌卫星细胞上仅有少量的表达；与对照比较,注射心脏毒素1d后,表达即明显增加并持续到观察终点的第6周,其表达量在第2周达到高峰且直到观察期间末(第6周),仍高于正常肌肉组织,且其差异有统计学意义(P＜0.01).结论:IGF1R可能在肌肉损伤修复过程中起重要作用.
关键词： 肌卫星细胞 胰岛素样生长因子-1受体 心脏毒素 肌损伤 -
基质细胞衍生因子受体4在肌损伤组织肌卫星细胞的表达
目的 探讨注射心脏毒素后肌损伤的肌卫星细胞中基质细胞衍生因子受体4(CXC chemokinereceptor 4,CXCR4)的表达情况,为进一步研究肌肉退行性疾病的分子学发病机制和治疗方法提供理论依据.方法 取C57雄性小鼠12只,于左侧股四头肌局部注射心脏毒素(5 μg/只),建立小鼠肌损伤模型:右侧股四头肌作为自身对照.于注射后1、4 d及1、2、4、6周处死小鼠,分离两侧股四头肌,取材行HE染色、免疫组织化学染色及RT-PCR检测分析CXCR4表达情况.结果 HE染色示肌肉组织从损伤修复到再生的全过程.免疫组织化学染色检测示注射心脏毒素后1、4 d和1、2、4、6周,肌肉组织内CXCR4表达分别为1 955.6±150.3、2 223.2±264.3、2 317.6±178.7、3 066.5±269.6、1 770.9±98.7和1 505.7±107.1,与正常肌肉组织(640.3±124.0)比较,差异均有统计学意义(P<0.001).RT-PCR检测显示,正常肌肉组织、注射心脏毒素后1、4 d和1、2、4、6周肌肉组织内CXCR4 mRNA表达分别为0.349±0.006、0.822±0.013、0.882±0.025、1.025±0.028、1.065±0.041、0.837±0.011和0.777±0.015;肌损伤后各时间点与正常肌肉组织比较,差异均有统计学意义(P<0.001).结论 CXCR4可能在肌肉损伤修复过程中起重要作用.
关键词： 基质细胞衍生因子受体4 肌卫星细胞 心脏毒素 肌损伤模型 小鼠 -
蛇毒抗肿瘤蛋白心脏毒素的分离纯化与鉴定
目的:对蛇毒抗瘤蛋白的活性组分进行分离与鉴定.方法:采用RP-HPLC分离蛇毒抗瘤蛋白各组分,收集纯化组分Ⅱ.RP-HPLC及SDS-PAGE测定组分Ⅱ的纯度;MALDI-TOF质谱仪测定组分Ⅱ的相对分子质量;对组分Ⅱ进行N-末端氨基酸序列测定.结果:蛇毒抗瘤蛋白组分Ⅱ经RP-HPLC和SDS-PAGE分析为单-成分,MALDI-TOF质谱仪测得其相对分子质量为6719.49,其N-末端氨基酸序列为L-K-C-N-K-L-V-P-L-F-Y-K-T-C-P.结论:经分离鉴定,蛇毒抗瘤蛋白组分Ⅱ为心脏毒素.
