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人脂肪间充质干细胞来源的外排体促进大鼠创伤性脑损伤后神经功能恢复
目的研究人脂肪间充质干细胞(hAMSCs)来源的外排体对创伤性脑损伤(TBI)的治疗作用及其可能的机制.方法分离健康成人脂肪MSCs,通过超滤法提取外排体.将大鼠分成:假手术组,PBS对照组,MSC治疗组,exosomes治疗组.于TBI建模 24 h后,治疗组分别沿损伤边缘区局部注射,PBS 30 μL, MSC 2×105个细胞/只,exosomes 25 μg总蛋白量/只,总体积30 μL.在建模前和TBI后1、3、7、10、13、16和30 d测试所有大鼠的mNSS评分和前肢踩空试验.3和7d处死大鼠,提取大鼠脑组织总RNA,实时定量PCR检测大鼠炎性因子TNF-α和IL-1β的表达,30 d处死大鼠,tunel-neun双标免疫荧光检测TBI后神经元凋亡.结果外排体的治疗显著促进TBI后的神经功能的恢复,治疗效果与MSC治疗效果相当,其机制可能是通过抑制大鼠TBI后急性炎性反应,减少神经元凋亡.结论人脂肪间充质干细胞来源的外排体促进脑外伤后神经功能的恢复,这将为临床提供一种新的更安全的TBI治疗手段.
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外排体在非小细胞肺癌中的研究进展
外排体是一种由细胞产生并主动分泌的囊泡样结构,内含蛋白质、核酸和脂质类物质,主要功能为在细胞间传递相应物质以完成细胞间的通信,并且可以调节微环境的免疫反应.研究表明外排体对肺癌的发生和发展均有重要作用.外排体的蛋白质和microRNA在作肺癌的诊断、预后和预测的生物标志物,以及在肺癌的免疫治疗和抗肿瘤药物的靶向递送方面都有巨大潜能.
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外排体促进骨再生的研究进展
外排体是来源于内吞作用的一种小囊泡,在骨再生治疗领域成为一种新的选择.这种小囊泡在细胞间传递物质(如蛋白质、RNA等),从 而调节靶细胞的分化、增殖功能等.外排体通过直接调节间充质干细胞的成骨分化、刺激成骨细胞的增殖和活性、调节破骨细胞的成熟和活性以及增 加血管生成能力来促进骨再生.同时还能避免生物治疗所带来的细胞毒性和免疫抑制问题.此外外排体疗法的并发症(如肿瘤、血栓形成等)相对于 生物治疗来说更少.
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外排体在脑胶质瘤中的研究进展
外排体是细胞分泌到细胞外基质中的一种功能性囊泡,胶质瘤外排体在胶质瘤的发生发展、辅助诊断和治疗中的作用日益受到重视.本文对常见胶质瘤外排体标志物、介导免疫治疗、抗肿瘤治疗载体、干预肿瘤细胞信号通路等方面进行总结.
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外排体是肿瘤优势生存的开拓者
外排体(exosomes)是活细胞分泌的具有脂质双分子层和大量内含物的微囊泡结构.肿瘤细胞来源的外排体不仅在肿瘤细胞之间的通信中充当信使的功能,也能作为载体影响远处的正常机体细胞,为肿瘤细胞的增殖、分化、转移及免疫抵抗起到保驾护航的作用.
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外排体与缺血性卒中
外排体是由多种类型细胞分泌的直径约40~100 nm的膜性小囊泡.外排体携带有脂质、蛋白质、mRNA、微小RNA等,在细胞通讯中扮演着重要角色.文章对外排体的来源、一般特性、生物学功能以及在缺血性卒中病理生理学和神经功能恢复中的可能作用和机制进行了综述.
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外排体作为新型给药系统的研究进展
外排体是由多泡体或称为多囊体与细胞膜融合并分泌到胞外的一种膜性小囊泡,具有多种免疫功能,其表面含有大量的与其来源和功能密切相关的蛋白质和脂质成分,具有去除细胞生长过程中的废弃蛋白、信号传导、提呈抗原激活T细胞以及诱发和增强机体免疫反应等功能.近年来,有研究者利用外排体负载药物,将其发展成为一种纳米给药体系,以避免某些外源性纳米载体可能发生的不良反应以及免疫排斥反应.本文综述了对这种新型纳米载体的发现、功能以及作为给药载体的研究进展,以丰富药剂学的载药系统,并为纳米给药系统的研究提供新的思路.
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过表达IDO骨髓间充质干细胞通过外排体促进移植心脏存活的分子机制研究
目的:探讨过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过分泌外排体促进移植心脏存活的分子基础.方法:通过慢病毒载体GV308携带IDO转染构建过表达IDO大鼠BMSCs,并加入基因开启剂强力霉素(DOX),按照分泌外排体的类型分为3组:过表达IDO-BMSCs-exosome组(过表达IDO组)、空载体-BMSCs-exosome组(空载体组)、BMSCs-exosome组(BMSCs组);然后采用SBI公司的ExoQuick-TC提取3组分泌的外排体,同时建立大鼠腹腔异位移植心脏模型;经尾静脉给予相应细胞分泌的外排体,利用彩色超声心动图检测注射3组外排体后2d移植心脏的心功能变化.另将注射吗替麦考(吗替麦考组)及建模未处理(未处理组)的大鼠作为对照.进而采用小RNA测序技术检测过表达IDO组大鼠BMSCs外排体中与免疫相关的microRAN表达.结果:心脏彩色超声结果显示:过表达IDO-BMSCs分泌的外排体可以有效改善异位移植心脏存活.而根据KEGG分析可见前20位上调microRNA中涉及免疫的有10个,其中miR-540-3p的差异倍数(FC)值上升幅度大.前20位下调microRNA中涉及免疫的有3个,其中miR-338-5p的FC值下降幅度大.结论:通过采用小RNA(sRNA)测序技术检测过表达IDO组大鼠BMSC分泌外排体内与免疫相关的microRNA,终确认上调重点microRNA为miR-540-3p,下调重点microRNA为miR-338-5p.
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过表达GATA-4骨髓间充质干细胞通过外泌体修复心肌损伤的探讨
目的:探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)通过分泌外排体(exosome)修复心肌损伤的机制.方法:通过慢病毒载体GV308携带GATe4转染小鼠BMSC构建过表达GATA-4小鼠BMSC并加入基因开启剂——强力霉素(DOX),然后采用SBI公司的ExoQuick-TC提取分泌的exosome.通过电镜检测exosome的形态.经尾静脉注射采用Dir预染的过表达GATA-4-BMSCs分泌的exosome(过表达GATA-4组)、空载体-BMSCs分泌的exosome(空载体组)、BMSCs细胞分泌的exosome(BMSCs组),将不给予任何处理的心肌梗死(心梗)模型小鼠及正常喂养的小鼠分别设为未处理组和对照组.采用心脏彩超检测给予干预措施96 h的心功能改善情况.进而采用小动物活体成像检测心梗局部Dir荧光强度.番茄凝集素评估心梗局部血管生成及采用免疫组化检测心梗局部C-kit阳性细胞的数量.结果:过表达GATe4组较其他组可以更好地改善心梗后的心功能,射血分数及环比收缩改善幅度大.过表达GATA-4组较其他组在96 h时心脏局部可见更高荧光强度.番茄凝集素实验可见:过表达GATA-4组较其他组在给予干预措施后96 h,可以表达出更多的血管.C kit免疫组织化学检测可见:过表达GATA-4组较其他组在给予干预措施后96h,心梗局部C-kit细胞数量较其他组多.结论:过表达GATA-4的BMSCs可以通过分泌的exosome增强“归巢”效应、促进心梗局部血管增生、有效动员C-kit阳性细胞修复心肌损伤.
关键词： GATA-4 外排体 小鼠骨髓间充质干细胞 心肌梗死 -
树突状细胞外排体促进间充质干细胞体外增殖
目的:探讨树突状细胞(DC)外排体(DCex)对人骨髓间充质干细胞(MSC)体外增殖的影响.方法:利用人骨髓单个核细胞诱导DC,超速离心法从细胞培养上清中分离提取DCex,采用透射电镜观察所提取的DCex表征形态,并通过流式细胞技术检测其表面抗原以确定其来源.MSC培养体系中分别加入不同蛋白质浓度的DCex,培养24、48、72 h后MTT法检测MSC增殖状态,并且利用CFSE标记及流式细胞学分析进一步验证DCex对MSC的增殖作用.结果:人骨髓DC具有典型的形态学和表型特征.透射电镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构,直径为40～100 nm.DCex表达DC细胞的标志物.MTT实验增殖结果显示DCex具有促进MSC增殖作用,且其效应呈浓度和时间依赖性.CFSE标记流式结果也证实DCex对MSC的促增殖作用.结论:DCex可以促进MSC体外增殖,可能与其携带母细胞成分而成为细胞间信息交流的新方式有关,但是具体机制尚需进一步阐明.
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外排体载体给药系统的制备和体外性质的初步研究
目的 从小鼠树突状细胞(DC2.4)中提取外排体并载入盐酸阿霉素,研究外排体的细胞摄取能力与肿瘤细胞杀伤效率.方法 使用超速离心的方法从DC2.4细胞的培养基上清液中提取外排体,并通过透射电子显微镜验证提取结果;通过电穿孔法载入盐酸阿霉素并测定其粒径和Zeta电位;用超速离心法进行纯化,测定其载药量及包封率;选用小鼠乳腺癌细胞(4T1)为细胞模型,考察制剂的摄取能力和杀伤力.结果 成功制备了以内源性物质外排体为载体的给药系统,相比于传统给药系统脂质体,在4T1细胞中的入胞能力以及杀伤力都有显著性增加.结论 以外排体为载体的新型给药系统在未来的抗肿瘤治疗领域具有巨大的潜力.
