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褪黑素抑制白介素-1β诱导的人脐静脉内皮细胞通透性
目的 观察褪黑素(MLT)对自介素-1B(IL-1β)诱导的内皮通透性改变的影响.方法 用不同浓度的IL-1β和MLT干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs).用Transwell系统检测透过单层HUVECs的荧光标记的葡聚糖.用免疫荧光和Western blot检测HUVECs钙黏素(VE-cadhefin)的表达.结果 与对照组相比,5、10和20ng/mL的IL-1β分别使HUVECs通透性由1.5±0.1升高为4.8±0.3、5.2±0.4和9.8±0.8(P＜0.01);10和100 μmol/L的MLT分别使10 ng/mL的IL-1β诱导的通透性从5.2±0.4降至2.8±0.3和2.7±0.3(P＜0.01).IL-1β破坏VE-cadherin在细胞膜上表达的连续性,MLT抑制IL-1β的这种作用.与对照组相比,IL-1β使HUVECs的VE-cadherin表达量由0.91±0.04降至0.42±0.05(P＜0.01).MLT可使其表达量上调至0.69±0.04,显著高于IL-1β组(P＜0.01),但仍低于对照组(P＜0.01).结论 MLT能够通过抑制IL-1β诱导的VE-cadherin表达的降低来保护人脐静脉内皮细胞屏障的完整性.
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甘草酸二铵对脑缺血再灌注损伤后Rac-1、Claudin-5和VE-Cadherin表达的影响
目的 探讨甘草酸二铵对脑缺血再灌注损伤后神经血管单元是否具有保护作用及其作用机制. 方法 将240只健康成年SD大鼠按随机数字表法分为正常组(n=30)、假手术组(n=30)、脑缺血再灌注损伤组(n=90)、甘草酸二铵组(n=90),后2组大鼠又依据观察时间点不同分为术后2h、6h、12h亚组,每亚组30只.甘草酸二铵组、脑缺血再灌注损伤组制备成大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,且术后即刻分别经尾静脉注射甘草酸二铵氯化钠注射液9.11 mL或等量无菌生理盐水.术后2h、6h、12h时分别取材各组大鼠脑组织,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察计算梗死灶面积百分比,采用免疫组化染色检测紧密连接蛋白Claudin-5、血管内皮钙粘素(VE-Cadherin)阳性细胞表达,采用Western blotting检测紧密连接蛋白Rac-1、Claudin-5的蛋白表达水平. 结果 与脑缺血再灌注损伤组相比,术后2h、6h、12h时甘草酸二铵组梗死灶面积百分比均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).术后6h、12h时,甘草酸二铵组Claudin-5阳性细胞表达率均较脑缺血再灌注损伤组明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).术后2h、6h、12h时,甘草酸二铵组VE-Cadherin阳性细胞表达率均较脑缺血再灌注损伤组明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).术后2h、6h、12h时,甘草酸二铵组Claudin-5蛋白相对表达水平均较脑缺血再灌注损伤组明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).术后2h时,甘草酸二铵组Rac-1蛋白相对表达水平较脑缺血再灌注损伤组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 甘草酸二铵可通过上调神经血管单元中紧密连接蛋白Rac-1、VE-Cadherin及Claudin-5的表达,从而对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用.
