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温阳生精汤含药血清对肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中雌激素分泌的影响
目的 观察温阳生精汤含药血清对腺嘌呤致雄性肾阳虚不育大鼠睾丸间质细胞中雌二醇( estradiol,E2)合成以及影响其合成的芳香化酶(cytochrome P450 aromatase,P450arom)活性、其编码基因CYP19表达的影响,从蛋白和mRNA水平探讨温阳生精汤含药血清治疗肾阳虚不育的机制.方法 将实验大鼠随机分为4组,每组5只,即正常组及温阳生精汤高、中、低浓度组.各组大鼠分别以生理盐水和高、中、低浓度中药连续灌胃10天.末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清.从肾阳虚大鼠体内分别分离并纯化睾丸间质细胞,经鉴定后原代培养,随机分为5组,即空白对照组,模型组,中药高、中、低浓度(1.2、1.0、0.8 g/mL)组,用放射免疫法测定细胞培养液中E2含量,氚水释放实验检测P450arom在细胞中的活性,同时用Western blot法和荧光定量PCR法分别测定CYP19蛋白和mRNA表达.结果 与空白对照组比较,模型组中间质细胞上清中E2的含量明显减少,同时伴随P450arom活性抑制,以及CYP19蛋白和mRNA表达的显著减少(P ＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,经温阳生精汤含药血清干预后可显著增加间质细胞中E2合成量,上调P450arom活性,同时在蛋白和mRNA水平上调细胞中CYP19表达,并具有部分剂量依赖性(P＜0.01,P＜0.05).结论 温阳生精汤含药血清可以有效提高肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中E2的合成,并可能部分通过上调P450arom活性,提高CYP19基因表达实现,这可能是其治疗男性肾阳虚不育的机制之一.
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芳香化酶抑制剂在不孕症治疗中的作用
1 芳香化酶及芳香化酶抑制剂芳香化酶(aromatase)是微粒体细胞色素P450含有血红蛋白的一种酶类,是催化雌激素合成的关键酶,由位于15号染色体长臂的CYP19基因编码产生,它可以催化雄烯二酮、睾酮和16-α-羟脱氢表雄酮通过羟化作用分别转化为雌酮、雌二醇和雌三醇[1].芳香化酶在人体许多组织中,如卵巢、脑、脂肪组织、肌肉、肝脏、乳腺等都有表达.
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P450芳香化酶与多囊卵巢综合征
P450芳香化酶是雄激素转化为雌激素的限速酶,其表达具有组织特异性,在不同的组织中转化不同的底物,产生不同活性的雌激素,P450的表达受多种调节因子的作用,多囊卵巢综合征患者卵巢中P450芳香化酶的表达异常的,造成卵巢激素分泌紊乱,影响卵泡成熟和排卵,但是多囊卵巢综合征妇女卵巢中芳香化酶的表达缺陷还是亢进尚无定论,寻找调节P450芳香化酶的特异蛋白也是未来的研究方向之一,就P450芳香化酶在多囊卵巢综合征中的表达及影响因素作综述.
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芳香化酶基因表达调控与乳腺癌关系的研究进展
芳香化酶是绝经后乳腺局部雌激素生成的限速酶,其编码基因CYP19的结构、功能和表达具有组织特异性.在多种调控因素影响下,该基因通过选择性利用不同的启动子及相应的外显子I进行组织特异性调节,影响芳香化酶表达.CYP19基因表达在正常的乳腺组织中主要是通过启动子PI.4,起决定作用的外显子I是1b;在癌变组织则主要是启动子PⅡ、PⅠ.3,变为外显子1c占主导地位.CYP19基因的特异性表达为从基因水平治疗乳腺癌提供了理论基础.
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CYP19基因多态位点在子宫内膜癌及子宫肌瘤中的频率分布
目的:探讨CyP19基因多态性与子宫内膜癌及子宫肌瘤易感性之间的关系.方法:采用正反向DNA直接测序法对子宫内膜癌组、子宫肌瘤组及对照组CYP19基因中[TTTA]n和TCT插入/缺失两个多态位点进行多态性检测,并计算各基因型出现的频率,X2检验比较各组间有无差异.结果:TCT和△3在子宫内膜癌组出现频率为58.0%、42.0%,在子宫肌瘤组为61.5%、38.5%,在对照组为66.7%、33.3%.[TTTA]7和X在子宫内膜癌组出现频率为38.0%、62.0%,在子宫肌瘤组为65.4%、34.6%,在对照组为59.3%、40.7%.TCT插入/缺失多态性的总体分布在3组间无明显差异(P＞0.05);子宫内膜癌组携带[TTTA]n长基因型的频率显著高于子宫肌瘤组及对照组(P＜0.05),而在子宫肌瘤组和对照组间[TTTA]n的频率分布差异无统计学意义(P＞0.05).结论:CYP19基因第4内含子四核苷酸重复[TTTA]n的长基因型可能增加子宫内膜癌的易感性,而对子宫肌瘤的发病无显著相关性.
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CYP9基因及其产物芳香化酶P450与雌激素依赖性疾病
芳香化酶P50(aromatase cytochrome p450,P450arom)是雄激素转化为雌激素的限速酶,不仅存在于全身多种正常组织中,而且也存在于许多雌激素依赖性肿瘤组织中.CYP19基因是P450arom的编码基因,它的组织特异性表达决定了P450arom在各组织中发挥其不同的生理或病理作用.本文就CYP19基因和P450arom的结构、功能及其与雌激素依赖性疾病的关系作以综述.
