首页 > 文献资料
-
掌叶半夏总蛋白作用人卵巢癌SKOV3细胞的蛋白质组学研究
目的 研究掌叶半夏总蛋白作用于人卵巢癌SKOV3细胞后蛋白质组学的变化.方法 体外培养SKOV3细胞,应用CCK-8比色法观察不同时间(24、48、72、96h)、不同浓度(0、0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mg/mL)掌叶半夏总蛋白对SKOV3细胞的生长抑制作用.取对数生长期SKOV3细胞,加入0.296 mg/mL掌叶半夏总蛋白作用于细胞48 h,提取细胞总蛋白,采用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)筛选差异表达的蛋白质.结果 0.10 -0.50 mg/mL掌叶半夏总蛋白可显著抑制SKOV3细胞的生长,且具有一定的时效和量效关系(P ＜0.05,P＜0.01).经2-DE和质谱分析成功鉴定43个差异蛋白质点(其中21个上调,22个下调),包括α-烯醇化酶1、真核翻译起始因子3α、亲环素B等.结论 掌叶半夏总蛋白可显著抑制SKOV3细胞的生长,并引起SKOV3细胞株蛋白质组学的改变,可能与其抗癌机制相关.
-
抵挡汤加味治疗卵巢肿瘤的临床观察
卵巢肿瘤是妇科常见的肿瘤病,任何年龄均可患病,但多见于生育期妇女,近年来发病率呈上升的趋势.卵巢肿瘤属于祖国医学的"癥瘕"范畴,且原因是多方面的.其病因主要是正气虚弱,脏腑功能失常,气血失调.病机为气血亏虚,瘀血阻滞,瘀阻冲任,故其治当立足于行气活血.本文应用抵挡汤加味治疗卵巢肿瘤25例收到较好的疗效,同时探讨了该病的病因病机和辨证论治.
-
巨大盆腔肿块一例报道
近年来,随着医学知识的普及,超声、CT等影像学检查的发展,盆腔微小肿块的检出率大大提高,但仍有部分绝经后妇女忽视了定期妇科普查,发现盆腔包块时往往已经是巨大肿块,现将我院近收治的1例巨大盆腔肿块病例报道如下.
-
肿瘤干细胞标志物LGR5及ALDH1在卵巢癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨肿瘤干细胞标志物含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(1eucine-rich repeat-containing G protein coupled receptor 5,Lgr5)及乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydro-genase 1,ALDH1)在卵巢癌中的表达与临床意义.方法 选取2006年5月至2010年1月住院并接受手术治疗的卵巢癌患者140例,选取同期本院因卵巢良性病变行肿物剥除或附件切除的40例患者作为对照,应用免疫组化(S-P)方法检测140例卵巢癌组织(卵巢癌组)、140例卵巢癌癌旁组织(癌旁组)、正常卵巢组织40例(正常组)中的Lgr5及ALDH1蛋白表达,分析其与卵巢癌患者临床病理指标的关系.结果 (1)Lgr5在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率(5.0% vs 18.3% vs 95.7%)差异具有统计学意义(P=0.001);ALDH1在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率(7.5% vs 15.7% vs 90.0%)差异具有统计学意义(P<0.05).(2)Lgr5表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05).ALDH1表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05).(3)Lgr5及ALDH1存在正相关性(r=0.3,P<0.05).(4)Lgr5高表达者(+++)和低表达者(+)~(++)5年总生存率分别为51.2%和29.2%(HR=11.637,95%CI:4.351~38.213;P=0.002);ALDH1高表达者(+++)和低表达者(+)~(++)5年总生存率分别为41.3%和35.3%(HR=10.143,95%CI:4.285~33.275;P=0.006)..多因素Cox回归分析显示,Lgr5蛋白(+++)表达(P=0.002)、ALDH1蛋白(+++)表达(P=0.006)、分化程度(P=0.036)、浸润深度(P=0.001)和远处转移(P=0.002)是影响胃癌患者预后的独立因素.结论 Lgr5及ALDH1的增强表达与卵巢癌侵袭性增强有密切关系,其表达可作为判断卵巢癌患者预后的指标.
-
糖类抗原CA19-9在卵巢畸胎瘤诊断中的临床意义
目的 研究探讨糖类抗原CA19-9在卵巢畸胎瘤诊断中的临床意义.方法 选择2007年3月至2012年3月我院妇科收治的138例卵巢畸胎瘤患者,进行肿瘤标记物CA19-9检测和结果回顾分析.结果 卵巢畸胎瘤患者的肿瘤标记物CA19-9阳性表达率高,并且和其年龄、瘤体大小及发于卵巢的单双侧有关.结论 CA19-9对卵巢畸胎瘤的诊断和鉴别具有一定的临床意义,结合影像学资料可指导临床对卵巢畸胎瘤进行诊治.
-
CD44及Lgr5在卵巢癌组织中的表达及其与预后的相关性分析
目的 探讨含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(1 eucine-rich repeat-containing G protein coupled receptor 5,Lgr5)及CD44在卵巢癌中的表达及其与预后的关系.方法 选取2006年5月至2010年1月住院并接受手术治疗的卵巢癌患者140例,选取同期本院因卵巢良性病变行肿物剥除或附件切除的40例患者作为对照,应用免疫组化(S-P)方法检测140例卵巢癌组织(卵巢癌组)、140例卵巢癌癌旁组织(癌旁组)、正常卵巢组织40例(正常组)中的Lgr5及CD44蛋白表达,分析其与卵巢癌患者临床病理指标的关系.结果 ①Lgr5在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率分别为5.0％、18.3％和95.7％,差异具有统计学意义(F=24.581,P=0.001);CD44在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率分别为7.5％、15.7％和90.0％,差异具有统计学意义(P＜0.05).②Lgr5表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P＜0.05).CD44表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P＜0.05).③Lgr5及CD44存在正相关性(r=0.3,P＜0.05).④Lgr5高表达者(+++)和低表达者(+)～(++)5年总生存率分别为29.2％和51.2％(HR=11.637,95％ CI:4.351 ～ 18.439;P=0.002);CD44高表达者(+++)和低表达者(+)～(++)5年总生存率分别为35.3％和41.3％(HR=10.142,95％ CI:4.285～ 17.013;P=0.006).结论 Lgr5及CD44的增强表达与卵巢癌侵袭性增强有密切关系,其表达可作为判断卵巢癌患者预后的指标.
-
尿精眯与血清CA125联合检测诊断卵巢恶性肿瘤的价值
探讨尿精眯(SPD)与血清CA125联合检测对卵巢恶性肿瘤的诊断价值.采用聚酰胺薄膜层析法分别测定20名对照组和47例妇科盆腔肿块患者尿SPD水平,同时用化学发光免疫法检测两组患者的血清CA125水平.结果表明,卵巢恶性肿瘤组患者尿SPD和血清CA125水平(679.49±368.39 μg/mg肌酐,251.23±172.48 U/L)明显高于对照组(218.76±88.35 μg/mg,13.96±12.07 U/L)和卵巢良性肿瘤组患者(204.62±85.26 μg/mg肌酐,25.29±31.6 3U/L).两标记物对卵巢恶性肿瘤的灵敏度分别为80.95%和71.43%,若二者联合灵敏度可高达90.48%.尿SPD和血清CA125联合检测可提高卵巢恶性肿瘤的诊断准确率.
-
酶受体分析法测定3AO细胞LH/hCG 受体结合特性
建立培养细胞的酶受体分析法(enzyme receptor assay, ERA),应用ERA研究卵巢癌细胞株3AO的LH/hCG受体特性.采用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)-人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG)的酶标配体交联物, 与培养包被的3AO细胞在适当的条件下建立ERA, 并以人卵巢癌细胞株SKOV-3作为阴性对照, 测定3AO细胞膜上LH/hCG受体的竞争结合、特异性结合、饱和结合特性并计算受体的大结合容量(Bmax)和解离常数(Kd).ERA测得3AO细胞LH/hCG受体的Bmax为3.65mmol/g蛋白, Kd为0.41nmol/L,未标记配体hCG抑制LH/hCG受体对酶标配体(HRP-hCG)特异结合的IC50为0.92μmol/L.结论: 竞争结合实验、特异性结合实验、饱和结合实验表明3AO细胞膜上存在高亲和力的LH/hCG受体.
-
不同方式诱导卵巢癌紫杉醇耐药细胞系的比较
目的通过不同诱导方式建立紫杉醇耐药的卵巢癌细胞系,探讨耐药机制.方法分别采用紫杉醇大剂量诱导法和小剂量间歇诱导法诱导卵巢癌细胞系SKOV3,建立卵巢癌紫杉醇耐药细胞系SKOV3/Taxol-P和SKOV3/Taxol-25.倒置显微镜进行形态学观察;细胞计数观测生长增殖规律;MTT法检测IC50和RI;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR法检测耐药相关基因MDR1、MRP1、LRP1、GST-π等mRNA的表达.结果SKOV3/Taxol-P和SKOV3/Tax-ol-25的耐药指数分别为261.98±32.89和622.76±71.37,均伴有细胞形态、生长增殖、细胞周期的改变.SKOV3/Taxol-25的MDR1、LRP1表达增强,MRP1、GST-π表达均下调;SKOV3/Taxol-P中4种基因表达无改变.结论不同方式诱导的细胞系存在着差异.紫杉醇耐药涉及多个耐药基因和因素的变化.间歇诱导方式更易产生耐药.
-
PES1对雌激素受体转录活性的调节作用
目的 探讨PES1与雌激素受体(ER)的相互作用及其对ER转录活性的影响.方法 将体外翻译的PES1与纯化的GST-ERα和GST-ERβ蛋白分别混合,用GST pull-down验证在体外PES1与ERα和ERβ是否存在相互作用.将HA-PES1与FLAG-ERα或FLAGC-ERβ共转染293T细胞后进行免疫共沉淀,以验证PES1与ER是否在体内有相互作用.用含雌激素受体作用元件的荧光素酶报告基因检测PES1对ERα和ERβ转录活性的影响.结果 PES1与ERα、ERβ在体内外均存在相互作用,而且PES1与ERα的结合比与ERβ的强.在体内,在雌激素(E2)存在下,E2可以增强PES1与ERα的结合,而对PES1与ERβ的结合没有明显影响.PES1对ER转录活性的影响是E2依赖性的,PES1能升高ERα的转录活性而降低ERβ的转录活性(P＜0.01).结论 PES1是一种新的ER共调节因子,能反向调节ERα和ERβ的转录活性,需要进一步研究的是其在ER信号通路以及在E2诱发的肿瘤发生发展中的作用.
-
RNAi靶向沉默FLIP基因促进TRAIL诱导卵巢癌A2780细胞凋亡
目的 探讨RNAi靶向沉默FLIP基因对TRAIL诱导卵巢癌细胞凋亡的影响.方法 设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA,在脂质体(LipofectamineTM2000)介导下转染人卵巢癌细胞株A2780.采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIP-siRNAs转染前后A2780细胞FLIP mRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用强的FLIP-siRNA.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测FLIP-siRNA转染前后TRAIL对A2780细胞生长抑制作用的变化.以Annexin-V-PI双染法流式细胞术(FCM)比较FLIP-siRNA转染前后TRAIL诱导的细胞凋亡的情况.结果 特异性FLIP-siRNA片段能有效降低A2780细胞中FLIP mRNA和蛋白水平(P<0.01),并具有时间依赖性;转染FLIP-siRNA后,TRAIL对A2780细胞的生长抑制作用明显增强(P<0.05),TRAIL诱导的细胞凋亡也显著增加(P<0.05).结论 靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP表达,并可增加细胞对TRAIL的敏感性.
-
Beclin1和Atg5在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨自噬相关基因Beclin1和Atg5在不同卵巢组织中的表达情况及其临床意义.方法 免疫组化和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤以及上皮性卵巢癌组织的Beclin1和Atg5的mRNA和蛋白的表达情况,分析3组间的差异.结果 正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤中Beclin1和Atg5的mRNA和蛋白表达明显高于上皮性卵巢癌组织(P＜0.05).结论 Beclin1和Atg5在上皮性卵巢癌组织中的表达下降,上皮性卵巢癌发生、发展可能与自噬相关基因Beclin1和Atg5白噬活性的抑制有关.
关键词： Beclin1 Atg5 卵巢肿瘤 免疫组化 反转录-聚合酶链反应 -
不同侵袭潜能卵巢癌细胞系蛋白质谱的比较
目的探讨与卵巢癌侵袭潜能相关的蛋白质.方法将卵巢癌细胞系SKOV-3在裸鼠体内多次传代,体外培养建系,结合体外黏附、侵袭、移动实验,筛选不同侵袭潜能的细胞亚系,用表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术检测其蛋白质谱.结果SKOV-3F3细胞亚系较其母系SKOV-3侵袭潜能更高.有6个差异蛋白质峰(质荷比M/Z分别为6249、14675、15425、15717、17123和17660)仅在SKOV-3中表达,3个差异蛋白质峰(M/Z分别为4355、4823和5763)仅在SKOV-3F3中表达,2个差异蛋白质峰(M/Z分别为1842和3145)可在SKOV-3的3代亚系中捕获.此外,5个差异蛋白质峰(M/Z分别为1242、5465、6899、6568和14027)和1组蛋白质谱峰簇在SKOV-3和其3代亚系中均可表达,但强度不同.结论体内传代结合体外实验可筛选出不同侵袭潜能的卵巢癌细胞,它们之间的差异蛋白与侵袭潜能密切相关.
-
不同方式诱导卵巢癌顺铂耐药细胞系的比较
目的用不同诱导方式建立卵巢癌顺铂耐药细胞系,探讨耐药机制.方法分别采用顺铂大剂量诱导法和小剂量间歇诱导法诱导卵巢癌细胞系SKOV3,建立卵巢癌顺铂耐药细胞系SKOV3/CDDP-P和SKOV3/CDDP-80.倒置显微镜进行形态学观察;细胞计数观测生长增殖规律;MTT法检测IC50和RI;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR法检测耐药相关基因,包括MDR1、MRP1、LRP1、GST-π等mRNA的表达.结果SKOV3/CDDP-P和SK-OV3/CDDP-80的耐药指数分别为4.12±2.01和11.50±3.15,均伴有细胞形态、生长增殖、细胞周期的改变;SK-OV3/CDDP-P的MDR1表达增强,MRP1、LRP1表达均下调;SKOV3/CDDP-80除MDR1表达上调外,其余三种基因表达无改变.结论不同方式诱导的细胞系存在着差异,顺铂耐药涉及多个耐药基因、因素的变化,间歇诱导方式更易产生耐药.
-
12例卵巢纤维瘤和泡膜纤维瘤的CT表现
目的 分析卵巢纤维瘤和泡膜纤维瘤的CT表现特点,以提高诊断准确率.方法 回顾分析12例经手术病理证实的卵巢纤维瘤和泡膜纤维瘤的临床特点和CT表现.结果 (1)12例肿瘤中,卵巢纤维瘤5例,泡膜纤维瘤7例.(2)12例肿瘤均为单侧,左侧7例,右侧5例.(3)CT表现:卵巢纤维瘤为实性,较大时可有浅分叶;泡膜纤维瘤可为实性或囊实性,囊性病变区多为单房,囊壁厚薄均匀与实性区相延续.所有病变边缘清楚,强化不明显.结论 卵巢纤维瘤和泡膜纤维瘤的CT表现有一定特征性.
-
卵巢肿瘤169例临床分析
目的:探讨卵巢肿瘤的临床特点,以期对其进行早期诊断、早期治疗并改善预后.方法:对我院5年间收治的卵巢肿瘤169例的临床资料进行回顾性分析.其中采用保守性手术治疗157例(92.90%),根治性手术治疗9例(5.33%),减瘤术治疗3例(1.78%).结果:169例卵巢肿瘤患者中,良性、交界性及恶性肿瘤分别为155例(91.71%)、3例(1.78%)、11例(6.51%).55岁及以上年龄组恶性肿瘤发病率14.29%,高于55岁以下组的4.48%(P＜0.05).良性及交界性肿瘤治愈率为100%,恶性肿瘤11例中死亡4例(36.36%).结论:卵巢肿瘤发病多较隐匿,定期作妇科检查及普查普治,对该病的早期诊断、治疗和改善预后有重要意义.
-
卵巢癌腹膜后淋巴结转移的特点及其临床意义
目的:研究卵巢上皮性癌淋巴结转移的解剖学和生物学特点及临床合理治疗.方法:40例Ⅰ期卵巢癌根据清除淋巴结与否分成A、B两组;40例Ⅲ～Ⅳ卵巢癌清除淋巴结20例为C组、不清除淋巴结20例为D组,C、D两组减瘤术后残余癌灶均≤2cm.化疗方法,药物及其剂量基本相同.结果:A组3例腹主动脉旁淋巴结转移者合并盆腔淋巴结转移2例,单纯盆腔淋巴结转移1者,共4例淋巴结转移,转移率20%.A、B两组5年生存率各为95%与80%.C组腹主动脉旁淋巴结转移10例中合并盆腔淋巴结转移9例,单独盆腔淋巴结转移2例,转移率为60%(12/20).C、D两组5年生存率各为55%与15%.5年生存率A、B两组差异有显著意义(P＜0.05),C、D两组差异有极显著意义(P＜0.001).结论:卵巢癌淋巴结转移率,随期别而升高,腹主动脉旁与盆腔淋巴结转移率几乎相等,但腹主动脉旁淋巴结转移是主要路线.恰当清除淋巴结可以提高生存率.
-
卵巢肿瘤的MRI诊断与鉴别诊断
目的分析和总结良恶性卵巢肿瘤的MRI表现,提出良恶性卵巢肿瘤的诊断和鉴别诊断价值.方法分析了39例经手术和病理证实的卵巢肿瘤的MRI资料,包括良性肿瘤22例,恶性肿瘤17例,并与病理结果对照.结果术前MRI诊断的39例卵巢肿瘤中单侧病灶25例,双侧病灶14例,卵巢病灶共53个.术前诊断卵巢良性肿瘤38个,恶性肿瘤15个.术后病理诊断良性肿瘤36个,恶性肿瘤17个.结论①MRI有良好的组织对比分辨率,对畸胎瘤、卵巢子宫内膜异位囊肿、卵巢囊肿、囊腺瘤等病变可以作出定性诊断.②MRI能准确显示卵巢肿块的大小、形态和侵及范围,有助于定性诊断和区分肿瘤的良恶性.
-
人卵巢癌细胞株侧群细胞的生物学特征
目的 研究人卵巢癌细胞株细胞中乳腺癌耐药蛋白与侧群细胞表型的关系,并探讨侧群细胞在卵巢癌病理牛理中的作用以及卵巢癌细胞株在卵巢癌肿瘤干细胞研究中的应用. 方法 利用流式细胞术从人卵巢浆液腺癌细胞株OVCAR3中分离排斥双苯酰亚胺(Hoechst 33342)染色的侧群细胞以及能被其染色的非侧群细胞,比较两个亚群的细胞集落形成率,并检验其在软琼脂平板生长的能力.同时以免疫印迹和免疫荧光染色检测两种细胞的乳腺癌耐药蛋白表达情况. 结果 OVCAR3细胞株中排斥Hoechst 33342的细胞占2.0%,此活动对维拉帕米(verapamil)敏感.侧群细胞和非侧群细胞克隆形成率分别为46.17%±23.27%和6.17%±3.06%,侧群细胞克隆形成率高于非侧群细胞(P<0.05),并能在软琼脂平板中生长、形成球形的细胞集落.侧群细胞表达乳腺癌耐药蛋白. 结论 人卵巢浆液腺癌细胞株中存在排斥Hoechst 33342染色、对维拉帕米敏感的侧群细胞,是维持细胞株的主要因素,其表型与乳腺癌耐药蛋白相关.OVCAR3可用于卵巢癌肿瘤干细胞的研究.
关键词： 卵巢肿瘤 肿瘤干细胞 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 侧群细胞 双苯酰亚胺 -
Wnt2B及PAI-1在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义
目的 通过检测Wnt2B与PAI-1在上皮性卵巢癌中的表达,分析两者与上皮性卵巢癌侵袭转移及临床病理之间的关系,以探讨两种基因在上皮性卵巢癌的表达及临床意义.方法 应用免疫组化(SP法)检测2008年1月到2013年6月在本院行手术切除的上皮性卵巢癌82例和良性卵巢上皮瘤10例患者组织中Wnt2B和PAI-1蛋白的表达情况,分析上皮性卵巢癌的年龄、组织学类型、细胞学分级、手术病理分期、肿瘤病灶大小、盆腔转移灶大小、大网膜转移、淋巴结转移、远处转移、残留病灶大小等临床病理因素与两个基因的表达关系;分析上皮性卵巢癌患者癌组织中Wnt2B与PAI-1的表达关系.结果 上皮性卵巢癌患者癌组织中Wnt2B的阳性表达率为12.2％(10/82),低于良性卵巢上皮瘤患者瘤组织的70％ (7/10)(P＜0.05);上皮性卵巢癌患者癌组织中PAI-1的阳性表达率为76.8％(63/82),高于良性卵巢上皮瘤患者瘤组织的20％ (2/10) (P＜0.05).PAI-1的表达与手术病理分期、细胞学分级、大网膜转移、盆腔转移灶大小有关(均P＜0.05),而与患者年龄、组织学类型、肿瘤病灶大小、淋巴结转移、远处转移、残留病灶大小无关(均P＞0.05);Wnt2B表达与手术病理分期、大网膜转移有关(均P＜0.05),与患者年龄、组织学类型、细胞学分级、肿瘤病灶大小、盆腔转移灶大小、淋巴结转移、远处转移、残留病灶大小无关(均P＞0.05).上皮性卵巢癌患者癌组织中Wnt2B与PAI-1的表达呈负相关(r=-0.847,P＜0.05).结论 Wnt2B在上皮性卵巢癌的发病机制中可能发挥一定的作用.PAI-1的表达与上皮性卵巢癌的发生、发展、浸润、转移有关.
