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补骨脂定抗实验性绝经后骨质疏松的效应及作用机制研究
目的:观察补骨脂定抗去势雌鼠骨质疏松的疗效,并初步探讨其作用机制.方法:取4月龄清洁级SD雌性大鼠60只,分为5组,分别为假手术组、模型组、补骨脂定低、高剂量组(4,16 mg-kg-1)及阳性对照壮骨止痛胶囊组,每组12只.13周后取血和骨标本检测骨密度,骨生物力学,病理形态学,血清E2,CT等指标.结果:补骨脂定能明显增加去势大鼠腰椎和股骨骨密度(P＜0.05)和骨小梁面积率(P＜0.05),增强股骨大抗弯强度(P＜0.05),显著升高血清E2和CT水平(P＜0.05).结论:补骨脂定对绝经后骨质疏松症具有良好疗效,其作用机制可能部分通过E2,CT等途径发挥作用.
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D-优设计响应面法结合UHPLC优选补骨脂药材炮制工艺
目的 采用D-优设计响应面法结合UHPLC技术优选补骨脂药材炮制工艺.方法 以补骨脂药材炮制工艺的关键参数闷润时间、炒制温度及加盐量为自变量,进行D-优设计;以UHPLC检测获得的补骨脂药材中9种主要指标成分补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素、补骨脂宁、补骨脂查耳酮和补骨脂酚炮制前后的质量分数变化为因变量,进行响应面分析;并结合单因素试验优化炒制时间,优选出补骨脂药材炮制工艺.结果 补骨脂药材的佳炮制工艺为在100 g补骨脂药材中加入2.10g盐,闷润12h,在80℃炒制30 min.结论 利用D-优设计响应面法结合UHPLC能够优选补骨脂药材炮制工艺参数,提高炮制工艺的稳定性和重复性,为提高补骨脂盐炙品的质量均一性和临床用药安全性提供技术支持.
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炮制时间对盐补骨脂中10种化学成分的影响
目的 建立同时测定补骨脂Psoralea corylifolia中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮、异补骨脂查耳酮、补骨脂宁、新补骨脂异黄酮和补骨脂酚10种化学成分的方法,并探讨炒制时间对盐补骨脂中10种成分的影响.方法 采用UPLC法,色谱条件:C18柱(50 mm×4.6 mm,1.8μm),流动相为乙腈-水,采用梯度洗脱,体积流量1 mL/min,检测波长250 nm,柱温30℃.结果 被测定的10种成分色谱峰在15min分析时间内均有良好的分离度,精密度RSD均小于3％;在室温条件下24h内稳定;各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r≥0.997 0);平均加样回收率96％～105％,RSD均小于3％.结论 本方法操作简便,快速,测定结果准确可靠,可用于补骨脂的质量控制.随炒制时间的延长,香豆素类成分呈现先降后升再降趋势,黄酮类、补骨脂酚及10种成分总量有降低趋势.
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HPLC法测定补骨脂中补骨脂定的含量
目的:建立HPLC法测定中药补骨脂中补骨脂定的含量.方法:采用LichrosporeC18(250mm×4.6mm)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(78 : 21 : 1)作为流动相,流速1.0ml/min,检测波长347 nm.结果:补骨脂定在2.5～20.0μg/ml线性关系良好,平均回收率为98.2%,RSD为1.3%,重现性好.结论:本法简便、快速,适用于评价中药补骨脂及其中药复方制剂的质量.
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酶法糖基化合成一种新型补骨脂定葡萄糖苷
目的：为提高补骨脂定的水溶性和稳定性，用体外酶法糖基化反应对其进行结构修饰。方法通过UDP-糖基转移酶对补骨脂定进行糖基化修饰，合成一种新的葡萄糖苷化合物（1）。使用高分辨电喷雾电离质谱（HR-ESI-MS）和核磁共振（NMR）分析，鉴定化合物1的结构；利用高效液相色谱峰面积计算出样品溶液的浓度；MTT法检测化合物对3种肿瘤细胞（SMMC7721、MCF-7、SW480）增殖的影响。结果根据波谱分析，鉴定制备出的新型葡萄糖苷化合物为psoralidin-6'，7-di-O-β-D-glucopyranoside（1）。水溶性检测结果表明，化合物1的水溶性是底物（补骨脂定）水溶性的32.6倍。此外，化合物1在pH 8.8和高温条件下较补骨脂定更加稳定。在抗肿瘤细胞增殖实验中，只有补骨脂定对3种肿瘤细胞都显示出较强的抑制能力。结论体外酶法糖基化是进行结构修饰、改善水溶性和稳定性的强有力方法。
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HPLC法同时测定补乌酊中4种补骨脂类成分的含量
目的:建立同时测定补乌酊中4种补骨脂类成分含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸(梯度洗脱),流速为1 ml/min,检测波长为246 nm,柱温为30℃,进样量为15μl.结果:异补骨脂素、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素的检测质量浓度线性范围分别为13.00~208、26.00~416、24.50~392、37.88~606 μg/ml (r≥0.999 6);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.00%;加样回收率分别为95.22%~97.23%、100.24%~104.64%、102.28%~104.39%、97.68%~100.17%,RSD分别为0.87%、1.62%、1.47%、0.97%(n=6).结论:该方法操作简便、重复性好,可作为控制补乌酊质量的方法.
