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癫痫清颗粒中α-细辛醚含量测定方法研究
目的：探讨癫痫清颗粒中α-细辛醚含量测定方法。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL/min,紫外检测器检测波长为257 nm,柱温为25℃。结果采用70%乙醇回流提取20 min制备供试品溶液,α-细辛醚在进样量1.24×10-3～7.44×10-3μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r＝0.9995),精密度、稳定性、重复性均较好,平均加样回收率为98.14%,RSD＝2.5%。结论本试验为中药复方制剂中α-细辛醚的测定提供了准确、快速的分析方法。
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癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠癫痫模型的影响
目的 观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型的影响.方法 大鼠腹腔注射10 g·L-1戊四唑(40 mg·kg-1),隔日1次,连续4周,停药1周后,再次注射相同剂量的戊四唑,根据癫痫发作级别随机分为7组每组10只,连续灌胃给药治疗四周,末次给药1 h后除空白对照组外各组大鼠腹腔注射10 g·L-1戊四唑(40 mg·kg-1),记录各组大鼠癫痫发作级别,并通过HE染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织结构的影响,并通过免疫组化染色及免疫印迹法观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织凋亡因子表达的影响.结果 癫痫清颗粒组癫痫发作级别显著低于模型对照组,与模型对照组相比癫痫清颗粒可显著降低大鼠脑海马CA1区AIF和BaX的表达,与模型对照组相比癫痫清颗粒可显著增加大鼠脑海马CA1区Bcl-X/S+L的表达.结论 癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型具有呈剂量依赖性的保护作用.
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癫痫清颗粒对戊四唑点燃癫痫大鼠行为学及脑内NMDAR2B、c-fos表达的影响
目的:观察癫痫清颗粒对戊四唑点燃癫痫大鼠行为学及脑内NMDAR2B和c-fos表达的影响,探讨其抗癫痫的作用机理.方法:腹腔注射戊四唑建立癫痫大鼠点燃模型,连续灌胃给药30 d后,观察癫痫清颗粒对大鼠行为学及脑组织NMDAR2B和c-fos的影响.结果:癫痫清颗粒可延长癫痫大鼠惊厥潜伏期,缩短惊厥持续时间,减少组织NMDAR2B和c-fos的表达.结论:癫痫清颗粒对戊四唑点燃大鼠模型具有抗癫痫作用,作用机制与减少脑内NMDAR2B和c-fos的表达有关.
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癫痫清颗粒薄层定性鉴别研究
目的:建立癫痫清颗粒质量控制的薄层鉴别方法.方法:采用硅胶G薄层板对癫痫清颗粒中石菖蒲、胆南星、制何首乌、知母采用TLC色谱法鉴别.结果:该制剂中四味药的鉴别,斑点明显,分离度和重现性好.结论:所建立的方法简便、灵敏、准确、专属性强,可作为癫痫清颗粒的薄层鉴别方法.
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癫痫清颗粒对大鼠海马区神经元影响
目的:观察癫痫清颗粒对戊四唑引起大鼠海马神经元凋亡的影响.方法:大鼠腹腔注射10g·L-1戊四唑(40mg· kg 1),每2d1次,连续15次,停药1周后,再次腹腔注射戊四唑,根据本次癫痫发作级别随机分为7组,每组6只,连续灌胃给药治疗4周,麻醉后取脑,通过尼氏染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织结构的影响,并通过免疫组化染色观察癫痫清颗粒对戊四唑诱发大鼠慢性癫痫模型海马组织神经元Apaf-1、caspase-9和caspase-3表达的影响.结果:与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组及苯妥英钠组大鼠海马齿状回存活细胞显著升高,与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组Apaf-1表达均显著降低,与模型对照组相比癫痫清中剂量组caspase-9表达显著降低,与模型对照组相比癫痫清低、中、高剂量组caspase-3表达均显著降低.结论:癫痫清颗粒对戊四唑诱发慢性癫痫模型大鼠海马区神经元具有呈剂量依赖性的保护作用.
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癫痫清颗粒对Aβ25-35所致阿尔茨海默病小鼠模型学习记忆的影响
目的:研究癫痫清颗粒对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)致阿尔茨海默病模型(AD)小鼠的学习记忆改善作用.方法:60只昆明种鼠随机分为假手术组,模型组,癫痫清颗粒低(3.12 g·kg-1)、中(6.24 g · kg-1)和高(9.36 g·kg-1)剂量组和盐酸多奈哌齐组(1.30 mg·kg-1),海马内注射(Aβ25-35),制作小鼠AD模型.连续灌胃给药15d.Y迷宫和Morris水迷宫实验检测各组小鼠认知行为改变,HE染色观察其对AD模型小鼠神经元的影响.结果:癫痫清颗粒可显著增加AD模型小鼠的自发交替反应率,缩短逃避潜伏期,减少总路程,延长游泳路程百分比,可改善海马区神经元细胞排列紊乱、水肿等现象,减少神经元死亡.结论:癫痫清颗粒对Aβ25-35致阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力具有改善作用.
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正交试验法优选癫痫清颗粒水提取工艺
目的 优选癫痫清颗粒的水提取工艺.方法 以菝葜皂苷元收率、芍药苷收率及总多糖含量为考察指标,采用k(34)正交试验法考察加水倍数、提取次数和提取时间对水提取工艺的影响,选择佳提取工艺.结果 佳提取工艺为提取2次,第一次加水10倍量,提取2h,第二次加水8倍量,提取1h.结论 优选的提取工艺稳定,可为癫痫清颗粒规范化生产提供依据.
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癫痫清颗粒对实验动物惊厥模型的影响
目的 探讨癫痫清颗粒对试验诱发惊厥的影响.方法 实验分组,相应处理后,分别用YSD-4G药理生理实验多用仪电刺激各组小鼠,记录各组小鼠发生电惊厥的数量,观察各组小鼠发生惊厥的潜伏期和动物存活时间,观察海马CA1区的病理变化.结果 癫痫清颗粒组电惊厥发生率显著低于模型对照组.癫痫清颗粒组硝酸士的宁诱发惊厥的潜伏期显著长于模型对照组,癫痫清颗粒组注射硝酸士的宁诱后的存活时间显著长于模型对照组.癫痫清颗粒可显著降低大鼠脑海马CA1区Caspase-9的表达.结论 癫痫清颗粒对试验诱发动物惊厥具有呈剂量依赖性的保护作用.
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癫痫清颗粒中β-细辛醚在大鼠体内的药代动力学研究
目的 研究癫痫清颗粒中β-细辛醚在大鼠体内的药代动力学.方法 用HPLC法测定大鼠体内不同时间的β-细辛醚的血药浓度,用DAS软件进行药代动力学分析.结果 建立了用HPLC法测定β-细辛醚血药浓度的方法,大鼠口服癫痫清颗粒后,β-细辛醚在体内的药时过程为线性动力学过程,符合一级吸收二室模型,t1/2:8.238 h,C max:1.88 mg·L-1,Tmax:0.167h,AUC0-t:2.467mg·h-1·L-1,AUC0-∞:3.32 mg· h-1·L-1.结论 实验方法简便、快速、灵敏,血浆中内源性物质及复方中各组分药物不干扰测定,可为癫痫清颗粒临床和量化研究提供可靠的依据.
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癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠海马组织中IL-6含量及GFAP、Iba-1表达的影响
目的:研究癫痫清颗粒对海人藻酸致癫痫大鼠海马组织中白细胞介素6(IL-6)含量及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙接头分子1(Iba-1)表达的影响,探讨该药防治癫痫的作用机制.方法:将大鼠随机分为假手术组(蒸馏水)、模型组(蒸馏水)、苯妥英钠组(0.03 g/kg,阳性对照)和癫痫清颗粒低、中、高剂量组(4.74、9.47、18.94 g/kg,以生药计),每组20只,每天ig给药1次,连续7 d.末次给药1 h后,除假手术组外的其余各组大鼠均于左侧海马CA1区单次注射海人藻酸复制癫痫模型,观察大鼠行为学变化及死亡情况.造模24 h后,采用酶联免疫吸附法检测大鼠海马组织中IL-6含量,采用尼氏染色法对海马组织神经元进行计数,采用免疫组化法检测大鼠海马组织中GFAP、Iba-1表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠造模后发生明显癫痫症状,部分大鼠死亡;海马组织中IL-6含量及神经元数目明显减少(P<0.01),GFAP、Iba-1表达明显增强(P<0.01).与模型组比较,各给药组大鼠癫痫症状及死亡情况得到改善,而海马组织中IL-6含量虽均不同程度升高,但差异无统计学意义(P>0.05);苯妥英钠组和癫痫清颗粒中、高剂量组大鼠海马组织神经元个数明显增加(P<0.01),GFAP表达明显降低(P<0.01);苯妥英钠组和癫痫清颗粒高剂量组大鼠海马组织中Iba-1表达明显降低(P<0.01).结论:癫痫清颗粒可通过抑制海马组织中GFAP和Iba-1的表达、增加海马组织中神经元数量,从而发挥防治癫痫的作用.
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高效液相色谱法同时测定癫痫清颗粒中3组分含量
目的：建立同时测定癫痫清颗粒中芒果苷、芍药苷、二苯乙烯苷含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法采用 HPLC 波长切换法同时对3组分含量进行测定，色谱柱为 Kromasil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5μm），以乙腈和0.2%醋酸为流动相，梯度洗脱，用二极管阵列检测器检测，检测波长为258，230，320 nm。结果芒果苷、芍药苷、二苯乙烯苷在进样量分别为0.152~1.52，0.480~4.80，0.248~2.48μg 范围内与峰面积呈良好线性关系，加样回收率分别为101.00%，102.38%，99.94%，RSD 分别为2.86%，2.38%，2.17%( n =9)。结论该研究为癫痫清颗粒的多组分定量测定和质量控制提供了一种简单、可靠的方法。
