首页 > 文献资料
-
四神丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中核转录因子κB p65基因和蛋白表达的影响
目的：观察四神丸对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织中核转录因子κB p65(NF-κB p65)基因和蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法将实验大鼠分为空白组、模型组、四神丸组和柳氮磺胺嘧啶(SASP)组,采用TNBS/乙醇溶液灌肠法造模,四神丸组给予四神丸浸膏剂5 g/kg灌胃,SASP组给予0.3 g/kg SASP灌胃,空白组和模型组灌服等体积生理盐水。肉眼观察各组大鼠结肠大体形态损伤并评分,采用免疫组化和反转录法检测NF-κB p65蛋白和基因表达水平。结果肉眼观察,模型组大鼠结肠组织黏膜层可见炎症和溃疡形成,与空白组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。模型组大鼠结肠组织 NF-κB p65基因和蛋白表达均高于空白组,差异有统计学意义(P＜0.01)；四神丸组NF-κB p65基因和蛋白表达均较模型组降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)。结论四神丸对UC具有治疗作用,其机制可能与激活NF-κB信号通路有关。
关键词： 四神丸 溃疡性结肠炎 核转录因子κB p65 大鼠 -
内毒素对大鼠肝星状细胞NF-κB mRNA表达及醛固酮分泌的影响
目的 探讨内毒素对大鼠肝星状细胞(HSC)核转录因子KB(NF-κB)p65 mRNA表达及醛固酮分泌的影响.方法 将培养后的HSC-T6分为内毒素组和对照组,内毒素组采用1.0 μg/mL的内毒素进行处理.放射免疫法检测HSC分泌醛固酮的情况,一步法RT-PCR检测HSC表达NF-κB 065 mRNA的水平.结果 内毒素作用6、12、24和48 h时,醛固酮分泌显著高于对照组(t值分别为3.063、4.577、6.847和9.317,P值均<0.05),NF-κB 065 mRNA的表达与对照组比较,差异有统计学意义(t值分别为5.155、6.095、7.875和9.313,P值均<0.01).HSC中醛固酮的分泌与NF-κB p65 mRNA的表达旱正相关(r=0.889,P<0.01).结论 内毒素可以上调HSC分泌醛固酮并使NF-κB p65 mRNA的表达上调,这种效果随着内毒素作用时间的延长而更为显著,可能是内毒素致肝纤维化形成的机制之一.
关键词： 内毒素类 醛固酮 肝星状细胞 肝纤维化 核转录因子κB p65 -
胃癌中HSP70、NF-κB p65的表达及临床意义
目的 探讨热激蛋白70(HSP70)、核因子κB(NF-κB)p65在胃癌中的表达及其意义.方法 收集2011年8月至2012年5月益都中心医院经病理诊断确诊为胃癌并行胃癌根治术的胃癌组织标本60例,采用免疫组织化学法检测60例胃癌患者癌组织及癌旁组织中HSP70、NF-κB p65的表达,并分析两者与胃癌病理特征的关系.结果 胃癌组织中HSP70的阳性表达率显著高于癌旁胃组织(78.3％ vs 13.3％)(P＜0.05);NF-κB p65阳性表达率显著高于癌旁胃组织(63.3％ vs30.0％)(P＜0.05);HSP70、NF-κB p65与胃癌组织分化程度、肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移有关(P＜0.05);HSP70、NF-κB p65在胃癌中的表达呈正相关(P＜0.05).结论 HSP70、NF-κB p65可能通过调节细胞凋亡及细胞增殖参与胃癌的发生、发展,监测HSP70、NF-κB p65在一定程度上有助于胃癌的治疗及预后判断.
关键词： 胃癌 热休克蛋白70 核转录因子κB p65 免疫组织化学 -
消痰散结方对裸鼠人胃癌细胞SGC-7901皮下移植瘤RUNX3、 NF-κB p65蛋白表达的影响
目的 观察消痰散结方对裸鼠人胃癌细胞SGC-7901皮下移植瘤Runt相关转录因子3(RUNX3)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达的影响,探讨消痰散结方的抗胃癌作用及机制.方法 建立裸鼠人胃癌细胞SGC-7901皮下移植瘤模型,随机分为中药组(消痰散结方)、化疗组(卡培他滨)及对照组(0.9％ NaCl溶液),每组10只,各组给予相应干预共32天.观察各组裸鼠体质量、瘤体积、瘤重,并采用Western blotting法检测各组裸鼠皮下移植瘤组织中RUNX3、NF-κB p65蛋白表达水平.结果 中药组及化疗组的瘤体积及瘤重值均低于对照组(P＜0.05);与中药组比较,化疗组的瘤体积及瘤重值均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).中药组和化疗组的抑瘤率分别为44.91％和83.23％.中药组和对照组体质量差异无统计学意义(P＞0.05);化疗组体质量低于对照组及中药组(P＜0.05).中药组和化疗组的肿瘤组织RUNX3蛋白表达水平高于对照组、NF-κB p65蛋白表达水平低于对照组(P＜0.05).结论 消痰散结方具有较好的抗胃癌疗效,虽然在抑瘤率方面不及卡培他滨,但没有引起体质量下降的副作用;上调RUNX3蛋白并下调NF-κB p65蛋白表达水平是其可能的作用机制之一.
关键词： 消痰散结方 裸鼠 胃肿瘤 runt相关转录因子3 核转录因子κB p65 -
慢病毒介导RNAi沉默大鼠脊髓神经元NF-κB p65基因的观察
目的 构建核转录因子κB(NF-κB) p65基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体并转染体外培养的大鼠脊髓神经元,观察其沉默效率.方法 针对大鼠NF-κB p65基因特异性序列,设计3条NF-κB p65-siRNA序列及1条阴性对照序列,合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火形成双链DNA,插入到经BamH I和EcoR I酶切后的pFU-GW慢病毒载体中,PCR筛选阳性克隆,DNA测序鉴定.与慢病毒包装质粒pHelper 1.0、pHelper2.0通过lipofectamine 2000共转染至包装细胞293T,经滴度测定后转染体外培养的大鼠脊髓神经元.实验分为5组:阴性对照组、LV-NC组、LV-shNF-κB p65-1组、LV-shNF-κB p65-2组和LV-shNF-κB p65-3组,观察转染效率,Western blotting法检测慢病毒表达载体对神经元NF-κB p65基因的沉默效应.结果 测序结果证实合成的寡核苷酸链插入正确,重组载体构建成功,测定病毒滴度为108-9 TU/mL,慢病毒重组体能够成功转染大鼠脊髓神经元,转染效率大于90％,与阴性对照组或LV-NC组比较,LV-shNF-κB p65-1组和LV-shNF-κB p65-2组NF-κB p65蛋白的表达明显下调(P均＜0.01),而LV-shNF-κB p65-3组无明显下调(P＞0.05).结论 成功构建了大鼠神经元NF-κB p65基因的RNAi慢病毒载体,它可使大鼠脊髓神经元NF-κB p65基因表达下调.
关键词： RNA干扰 核转录因子κB p65 慢病毒 神经元 大鼠 -
大肠癌组织P-糖蛋白、核转录因子κBp65表达及意义
目的 探讨P-糖蛋白(P-gp)、核转录因子κB p65( NF-κB p65)在大肠癌发生发展中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测69例份大肠癌患者癌组织(均为腺癌)及其癌旁正常组织(41例份) P-gp、NF-κB p65表达.分析P-gp、NF-κB p65阳性表达与患者临床病理参数的关系及P-gp、NF-κB p65表达的相关性.结果 大肠癌组织及其癌旁正常组织P-gp阳性表达率分别为89.9%(62/69)、24.4%(10/41),NF-κB p65阳性表达率分别为84.1%(58/69)、19.5%(8/41);两种组织比较P均＜0.05.大肠癌组织P-gp阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度相关(P均＜0.05),NF-κB p65阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(P均＜0.05).大肠癌组织P-gp表达和NF-κB p65表达呈正相关(r＝0.490,P＜0.05).结论 P-gp、NF-κB p65可促进大肠癌的发生及发展,二者起协同作用.
关键词： 大肠癌 P-糖蛋白 核转录因子κB p65 -
落新妇苷对永生化人角质形成细胞 HaCaT增殖、凋亡的影响及机制探讨
目的：观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞HaCaT增殖、凋亡的影响，并探讨其机制。方法收集对数生长期HaCaT细胞，观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液，培养24 h后，采用MTT法测算细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞早期凋亡率；收集对数生长期HaCaT细胞，观察组分别加入不同浓度落新妇苷＋20 ng／mL INF-γ、模型对照组加20 ng／mL INF-γ、空白对照组加DMEM培养液培养24 h，采用实时荧光定量 PCR 法检测细胞中的核转录因子κB （ NF-κB ） p65、骨桥蛋白（ OPN ）、血管内皮生长因子（VEGF） mRNA。结果落新妇苷在25、50、100、200、400μg／mL 时，HaCaT 细胞增殖抑制率分别为3．06％、26．53％、40．82％、60．20％及61．22％。落新妇苷在50、100、200μg ／mL时，观察组HaCaT细胞早期凋亡率分别为3．26％、8．24％和15．38％；与空白对照组早期凋亡率（1．33％）比较，P均＜0．05。与空白对照组比较，模型对照组NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达增加（P均＜0．01）；与模型对照组比较，观察组随落新妇苷浓度增加，NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达逐渐降低（P均＜0．05）。结论土茯苓提取物落新妇苷能抑制HaCaT细胞增殖、诱导细胞凋亡，其机制可能与制抑细胞NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达有关。
-
逆转素对肝星状细胞炎症反应的影响及机制
目的 探讨逆转素(Reversine)对肝星状细胞炎症反应的影响及机制.方法 将体外培养的肝星状细胞随机分为五组,对照组常规培养,低浓度Reversine组加入终浓度为5 μg/mL的Reversine培养,高浓度Reversine组加入终浓度为10 μg/mL的Reversine培养,TNF-α组加入终浓度为0.05 μg/mL的TNF-α培养,rhTNFR组加入终浓度为10 μg/mL的Reversine及终浓度为0.5 mg/mL的重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白( rhTNFR, TNF-α抑制剂)培养.培养24 h,倒置显微镜下观察各组细胞形态改变,采用qRT-PCR法检测细胞中TNF-α、核转录因子κB p65(RELA)、IL-6、IL-17A mRNA表达.结果 对照组细胞生长状态良好;其他四组细胞均发生形态改变,细胞间连接减少,出现皱缩、变圆、脱落等情况;上述改变程度,高浓度Reversine组、TNF-α组＞低浓度Reversine组＞rhTNFR组.与对照组比较,高浓度Reversine 组IL-17A 相对表达量降低,IL-6 相对表达量升高;低浓度组RELA mRNA相对表达量增加;组间比较P均＜0.05.与高浓度Reversine组比较,TNF-α组RELA、IL-17A相对表达量增加,IL-6相对表达量降低;rhTNFR组IL-6相对表达量降低,IL-17A相对表达量增加;低浓度组IL-6相对表达量降低,RELA、IL-17A相对表达量增加;组间比较P均＜0.05.结论 Reversine可抑制肝星状细胞炎症反应,抑制IL-17A表达、促进IL-6表达可能是其作用机制.
-
核转录因子κB p65在喉癌中的表达及临床意义
目的:探讨核转录因子κB p65(NF-κB p65)在喉癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学及原位杂交方法,检测48例喉癌组织和20例正常喉黏膜组织中NF-κB p65的表达水平及与肿瘤生物学行为间的关系.结果:①NF-κB p65的表达在喉癌与正常喉黏膜组织间的差异有统计学意义(P＜0.05).②NF-κB p65的高表达与颈淋巴结转移和临床分期有相关性,而与肿瘤部位及病理分化无相关性.结论:NF-κB p65是判断喉癌预后极具价值的指标.
关键词： 喉肿瘤 癌 鳞状细胞 核转录因子κB p65 -
莲心碱对佛波酯所致耳肿胀炎症模型小鼠的抗炎作用及机制研究
目的:考察莲心碱对佛波酯(TPA)所致耳肿胀炎症模型小鼠的抗炎作用,并探讨其作用机制.方法:将40只小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(地塞米松,2.5 mg/kg)和莲心碱低、高剂量组(5、15 mg/kg),每组8只.除空白组外,其余各组小鼠均于右耳内外侧涂抹TPA建立耳肿胀炎症模型;造模同时,各给药组小鼠均按20 μL/只于右耳内外侧涂抹相应药液(以丙酮为溶剂),空白组和模型组小鼠涂抹等体积丙酮溶液.给药6h后,测定小鼠耳厚度和耳肿胀度,苏木精-伊红染色后观察小鼠耳组织病理学变化,采用酶联免疫吸附法测定小鼠耳组织中炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β]水平,Western blot法测定小鼠耳组织中核转录因子κB信号通路相关蛋白[NF-κB p65和NF-κB抑制蛋白(IBα)]的磷酸化水平,并采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测小鼠耳组织中环氧化酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA表达.结果:与空白组比较,模型组小鼠耳厚度、耳肿胀度和耳组织中炎症因子水平、NF-κB信号通路相关蛋白的磷酸化水平以及COX-2、iNOS mRNA表达水平均显著升高(P＜0.05);耳组织发生增厚、炎性细胞浸润增多等变化.与模型组比较,各给药组小鼠耳厚度、耳肿胀度及耳组织中上述指标水平均显著降低(P＜0.05),耳组织增厚和炎性细胞浸润等均得到显著减轻.结论:莲心碱对TPA所致耳肿胀炎症模型小鼠具有较好的抗炎作用,其机制可能与抑制耳组织中NF-κB p65、NF-κB蛋白的磷酸化,进而抑制炎症因子COX-2、iNOS mRNA表达有关.
关键词： 莲心碱 耳肿胀炎症模型 炎症因子 核转录因子κB p65 小鼠 -
AcSDKP对硅肺纤维化大鼠胶原含量及NF-κBp65表达的影响
目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对硅肺纤维化大鼠肺内胶原合成及核转录因子κB（NF-κB）p65的影响。方法将大鼠分为3组：对照组（每只大鼠支气管内灌注生理盐水1mL，8周后处死）、硅肺模型组（每只大鼠支气管内灌注SiO2混悬液1mL，8周后处死）、AcSDKP治疗组（每只大鼠支气管内灌注SiO2混悬液1mL，并持续给予AcS-DKP800μg·kg-1·d-1，8周后处死）。从HE染色、VG染色和羟脯氨酸胶原测定法检测各组大鼠肺纤维化程度及胶原含量，用免疫组化法和免疫印迹法检测NF-κBp65蛋白的表达。结果与对照组比较，硅肺模型组硅结节的数量、胶原含量和NF-κBp65的表达增高。与硅肺模型组相比，AcSDKP治疗组矽结节的数量、胶原含量和NF-κBp65的表达降低。结论AcSDKP可能会通过增加B抑制蛋白（I-κB）的稳定性来抑制NF-κBp65的活性及表达，进而影响着肺泡炎与硅肺纤维化的进展。
