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p16基因上游序列与急性白血病细胞核基质蛋白结合的临床
目的 采用DNA-蛋白质杂交(Southwestern blot)技术研究p16基因上游序列-869bp中是否含有核基质结合元素,并分析p16基因上游序列在急性白血病细胞组与对照组内与核基质蛋白结合的情况.方法 p16基因上游序列与急性白血病细胞核基质蛋白结合的实验研究.结果 p16基因上游序列与核基质蛋白的结合在急性白血病组与对照组间存在差异.结论 p16基因外显子1α上游-869bp片段可以与核基质蛋白结合,表明该片段存在MAR序列,对p16基因表达调控具有重要意义.
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伪狂犬病病毒Ea株诱导牛肾细胞凋亡及核基质蛋白的变化
目的研究伪狂犬病病毒(PrV)是否具有诱导组织培养细胞发生细胞凋亡的功能及探讨凋亡细胞核基质蛋白表达的变化.方法利用锥虫蓝(台盼蓝)染色绘制PrV在不同细胞上的增殖曲线;荧光染色观察凋亡细胞核的形态特征;琼脂糖凝胶电泳分析细胞染色体DNA的片段化;高分辨率双向电泳分析细胞凋亡前后核基质蛋白的表达差异. 结果膜通透性的DNA特异性结合染料Hoechst 33342染色显示,PrV感染后36 h,牛肾(MDBK)细胞核染色质开始固缩、凝聚,细胞核碎裂;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析表明,细胞染色体DNA发生片段化,形成"DNA梯状"条带(DNA ladder);尽管PrV可以诱导MDBK细胞发生细胞凋亡,但不能诱导IBRS-2,BHK-21及PK-15细胞发生凋亡.MDBK细胞发生凋亡前后核基质蛋白的表达发生改变,存在表达上调、下调、诱导表达及表达遏制等情况.结论PrV诱导细胞发生细胞凋亡是其致细胞死亡的形式之一,间接反映了PrV与宿主细胞间复杂的相互作用.细胞凋亡前后核基质蛋白表达存在的差异说明PrV致MDBK细胞发生凋亡是自身基因产物或诱导或抑制宿主细胞基因表达的结果.
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VP-16诱导细胞凋亡及其细胞核基质中热休克蛋白表达的研究
目的研究VP-16诱导HL-60细胞凋亡的变化特点以及凋亡细胞及核基质中热休克蛋白(HSP)表达的变化. 方法琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞基因组DNA断裂;TUNEL法观察凋亡细胞的形态学变化;用免疫印迹方法显示凋亡细胞核基质蛋白、细胞总蛋白中HSP表达的差异. 结果 VP-16作用HL-60细胞0.5?h出现早期凋亡特征.作用4?h可见明显的DNA梯状条带.与未凋亡的细胞比较,凋亡细胞核基质蛋白中HSP70和HSC70表达明显上调;VP-16作用2、3及4h细胞总蛋白中HSP70的表达随时间延长略显增加;诱导22?h比诱导4?h时去除VP-16后孵至22?h凋亡细胞总蛋白HSP70表达量增强了3.4倍. 结论 1.HL-60细胞早期凋亡形态出现在DNA梯状条带形成之前.2.凋亡细胞核基质中HSP70、HSC70的表达明显增加,经2、3及4?h作用的细胞总蛋白中HSP70表达差异不显著.这提示细胞凋亡后HSP70的活性位点主要位于核基质上.3.VP-16作用细胞时间增长至22?h,HSP的保护作用可能消失.
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膀胱癌患者尿NMP22测定的临床意义
目的评价尿核基质蛋白22(NMP22)在膀胱癌诊断和预后判定中的应用价值. 方法采用ELISA法测定18例膀胱癌和20例泌尿系良性疾病患者尿液中NMP22值,及10例膀胱移行细胞癌患者术后尿NMP22值. 结果 18例膀胱癌患者尿NMP22的中位值为44.3 IU/L,20例泌尿系良性疾病患者尿NMP22的中位值为5.8 IU/L,二者相比差别有显著性意义(P<0.02).以10 IU/L为临界值,诊断膀胱癌的敏感性为83%,特异性为70%,阴性预测值为82%.10例膀胱移行细胞癌患者术后尿NMP22中位值为7.8 IU/L,与术前相比明显下降(P<0.01).尿NMP22在肿瘤分级间的差别无显著性意义. 结论尿NMP22作为一种灵敏、简便的早期诊断膀胱癌的瘤标,对于预后判断可能具有应用价值.
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NMP 22与流式细胞术在膀胱癌诊断中的价值
目的分析比较检测尿核基质蛋白22(NMP 22)、流式细胞术(FCM)、尿脱落细胞学检查3种无创方法诊断膀胱移行细胞癌(BTCC)的临床价值. 方法将85例同期住院病人分成BTCC组、泌尿系良性疾病组、泌尿系非尿路上皮恶性肿瘤组,分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、FCM测定各组病人自排尿中NMP 22和DNA含量,并同时行尿脱落细胞学检查. 结果 BTCC组、泌尿系良性疾病组、泌尿系非尿路上皮恶性肿瘤组尿NMP 22含量的中位数分别为16.1 U/ml、7.2 U/ml、4.5 U/ml.BTCC组尿NMP 22的含量与其他两组含量差别具有显著性意义(P<0.05).NMP 22、FCM、尿脱落细胞诊断BTCC的敏感性分别为61.1%、69.4%、18.3%,特异性分别为67.4%、59.2%、100%. 结论尿NMP 22测定,FCM DNA分析术检测BTCC具有比脱落细胞学更高的敏感性,可作为BTCC的辅助诊断手段.
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NMP 22在膀胱癌诊断中的应用
目的探讨尿液核基质蛋白22(NMP 22) 在膀胱移行细胞癌诊断中的意义. 方法采用酶联免疫吸附实验(NMP 22试剂盒)测定312例送检尿样的NMP 22值,并以膀胱镜检的病理报告为对照,统计其方法的灵敏度、特异性及准确性. 结果尿NMP 22检测膀胱移行细胞癌灵敏度71%、特异性75%、准确性73%. 结论尿NMP 22的检测,为一种无创伤、无痛苦、能早期诊断且灵敏度、特异性、准确性均较高的膀胱肿瘤临床诊断指标.
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核基质蛋白22检测与尿脱落细胞学检查在膀胱癌诊断中的价值
目的探讨尿核基质蛋白22(NMP 22)检测和尿脱落细胞学检查在膀胱移行细胞癌诊断中的价值. 方法对155例怀疑膀胱癌者进行尿NMP 22与尿细胞学检查,其中95例经组织学证实为膀胱移行细胞癌.比较两者诊断膀胱癌的敏感性和特异性. 结果尿NMP 22的敏感性为65.3%、特异性为70.0%;尿细胞学的敏感性为43.2%、特异性为83.3%.NMP 22在膀胱癌不同分级和分期中的敏感性优于尿细胞学(P<0.05). 结论尿NMP 22检测在早期诊断膀胱癌方面优于尿细胞学检查,可以作为膀胱癌的早期检测指标.
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核基质蛋白22作为体液中肿瘤标记物的临床研究
目的探讨体液中核基质蛋白22(NMP 22)在恶性肿瘤诊断中的价值. 方法应用酶联免疫法测定319例尿路上皮肿瘤、非尿路上皮性肿瘤和泌尿男生殖系统良性疾病患者尿液、23例肾囊性肿物囊液和43例胸腹腔积液中NMP 22的含量. 结果尿路上皮肿瘤、非尿路上皮性肿瘤和泌尿男生殖系统良性病变者尿NMP 22阳性率分别为88.7%(165/186)、37.2%(32/86)和29.8%(14/47).囊性肾癌、单纯肾囊肿囊液中NMP 22的平均含量分别为(66.0±45.4)U/ml和(2.5±1.3)U/ml.良、恶性胸腹腔积液NMP 22的阳性率分别为94.0%(29/31)和8.0%(1/12). 结论尿液NMP 22检测诊断尿路上皮肿瘤有较高的敏感性,但诊断中需全面考虑造成假阳性的临床因素;尿NMP 22检测对泌尿男生殖系统非尿路上皮肿瘤的诊断可能提供帮助;囊液和胸腹腔积液NMP 22的测定对鉴别肾囊性病变和胸、腹水的良恶性有一定的临床价值.
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白血病细胞核基质蛋白的提取及初步分析
目的为了比较白血病细胞与正常相应骨髓细胞核基质成分的差异,找出白血病细胞特异性的NMP成份.方法应用高盐提取法抽提细胞核基质蛋白,SDS-PAGE、双相电泳(2D)法分析白血病细胞与正常骨髓细胞核基质蛋白的变化.结果急性粒细胞白血病、急性早幼粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病慢性期及急变期、K562细胞株与正常骨髓细胞NMP成份有明显差异,出现正常骨髓细胞所没有的新的NMP区带或点,各类型白血病细胞之间的NMP成份也有差异.结论白血病细胞与正常骨髓细胞的NMP成份有明显差异,新出现的NMP成份,可能与白血病的发生发展有关.
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核基质对成骨细胞的调控作用
核基质蛋白及核基质结合蛋白在成骨细胞的增殖分化、信号转导以及凋亡等过程中均扮演着重要角色.本文概述了Nmp4/CIZ、Satb2、DNA TopoisomeraseⅡ等重要核基质蛋白在成骨细胞上述过程中的调控作用.
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前列腺癌早期诊断肿瘤标志物的研究进展
目前,前列腺癌的早期诊断方法主要是通过前列腺特异性抗原筛查,但前列腺特异抗原的特异性低.近年来,不断有学者提出各种肿瘤标志物,试图寻找敏感性、特异性更高的生物标志物.现就近年研究中较新、较有前景的几种肿瘤生物标志物(α-甲基-辅酶A消旋酶、Survivln蛋白、胸腺素β15、核基质蛋白)予以综述.
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NMP 22和DNA倍体分析对膀胱癌的初步评价
目的探讨NMP 22和DNA倍体分析对膀胱癌早期诊断的临床价值.方法同期收集116例血尿患者和30例正常人的自排尿标本,应用酶联免疫法和流式细胞仪分别测定NMP 22含量和DNA倍体分析,并行细胞病理学检查.所有血尿患者均进行膀胱镜检查,如有阳性发现,进行膀胱组织活检,确定诊断.结果①膀胱癌筛查的敏感性:NMP 22＞DNA倍体分析＞尿细胞学检查;特异性:尿细胞学检查＞NMP 22＞DNA倍体分析;②NMP 22的含量:膀胱癌组较其他组明显升高(P均＜0.01);G1与G2、G1与G3组比较(P＜0.01),G2与G3组、浅表性与浸润性组比较(P＞0.05);③DNA倍体分析:G1与G3组比较P＜0.01,G1与G2、G2与G3组、浅表性与浸润性组比较P均＞0.05;④尿细胞学检查:G1与G2组比较(P＜0.05),G1与G3组比较(P＜0.01),G2与G3组比较(P＞0.05);浅表性与浸润性组比较(P＜0.01);⑤尿细胞学检查与NMP 22、DNA倍体分析联合应用,较单独尿细胞学检查敏感性提高,特异性降低(P＜0.01).结论尿NMP 22的测定和DNA倍体分析联合应用可提高对膀胱癌早期诊断的敏感性,具有重要的临床价值.
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核基质蛋白在膀胱癌诊断上的应用及进展
膀胱癌的早期诊断和术后监测十分重要,膀胱镜检查+活检是膀胱癌诊断的金标准,但其侵入性操作不易为患者所接受,尿脱落细胞学检查是较为常用的检测方法,但其漏诊率达50%且受主观因素影响.人们一直期望通过简单方便、高特异性的尿液检查诊断膀胱癌和监测其复发.近年来对核基蛋白22(Nuclear Matrix Protein 22)和膀胱特异性核基蛋白(Bladder-Specific nuclear Matrix Protein)研究十分活跃.现对NMP22和BLCAS在膀胱癌诊断上的价值作一综述.
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发育期低硒大鼠大脑皮层核基质蛋白的毛细管电泳分析
目的:利用高效毛细管电泳(High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE)观察低硒对发育期大鼠脑核基质蛋白(Nuclear Matrix Proteins, NMPs)的影响.方法:利用人工配制的低硒饲料喂养的SD大鼠,分为对照组和低硒组.取第三代出生后21天的大鼠,处死后迅速取脑,分离大脑皮层.提取NMPs,经初步鉴定后,用HPCE的毛细管区带电泳(CZE)模式进行NMPs的分离,观察其组成成分的改变.结果:NMPs经HPCE分离出3～4个蛋白峰,波形较稳定,在进样9min左右有一个蛋白峰低硒组明显低于对照组.结论:经HPCE分析能够观察到低硒脑NMPs的变化.
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非肌层浸润性膀胱癌患者血清和尿液BLCA-1含量的变化和意义
目的：：探讨非肌层浸润性膀胱癌患者血清和尿液膀胱癌特异性核基质蛋白-1（bladder cancer specific antigen-1，BLCA-1）含量的变化和意义。方法：选取22例非肌层浸润性膀胱癌患者作为实验组，23例前列腺增生患者作为前列腺增生组，21例健康体检者作为正常组。采用ELISA法检测所有受试者血清和尿液样本中BLCA-1的含量，并计算敏感度和特异度。结果：实验组患者尿液BLC A-1的含量明显高于前列腺增生组和正常组（P＜0.05）；尿液BLCA-1诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度为59%（13/22），特异度为93%（41/44）。实验组和前列腺增生组患者血清BLCA-1含量明显高于正常组（P＜0.05）；血清BLCA-1诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感度为86%（19/22），特异度为56%（24/43）。结论：BLCA-1作为非肌层浸润性膀胱癌的新型检测指标，具有较高的敏感度和特异度，值得深入研究。
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核基质蛋白 22在膀胱癌诊断及复发预测中的作用
作为泌尿外科常见的恶性肿瘤,膀胱癌在我国已列为十大高发肿瘤之一,而且复发率高,50%～70%的浅表性肿瘤会在5年之内复发, 且其中10%～20%进展为浸润性肿瘤[1],成为严重威胁人民健康、消耗大量医疗资源的疾病.因而为了诊断膀胱癌并预测其复发,寻求一种敏感性和特异性均较高的非侵入性的检测方法就十分重要.核基质蛋白22 (nuclear matrix protein, NMP22) 是近年来发现的一种新的膀胱癌的标志物, 具有敏感性高、特异性强、操作简单、非侵入性等特点,具有良好的应用前景,本文就其近年来的研究精综述如下.
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核基质蛋白22定量分析及尿液细胞学检查评估膀胱癌复发的价值研究
目的：评估核基质蛋白22（NMP22）定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发的诊断价值。方法选取2008-2012年在海南医学院附属医院住院的浅表性膀胱癌患者144例。在膀胱镜检查之前患者均在3 d内连续每天提供3份用于尿液细胞学检查的尿液样本以及1份用于NMP22定量分析的尿液样本。以病理组织活检作为金标准，对NMP22定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发诊断价值的灵敏度和特异度进行评估。结果144例患者中，52例（36.1%）诊断为复发性膀胱移行细胞癌。52例膀胱癌复发患者中，41例NMP22定量分析结果为阳性，23例尿液细胞学检查为阳性。NMP22定量分析诊断膀胱癌复发的灵敏度为78.8%（41/52），特异度为69.6%（64/92），阳性预测值为59.4%（41/69），阴性预测值为85.3%（64/75）；尿液细胞学检查诊断膀胱癌复发的灵敏度为44.2%（23/52），特异度为83.7%（77/92），阳性预测值为60.5%（23/38），阴性预测值为72.6%（77/106）。两种方法诊断膀胱癌复发的灵敏度和特异度比较，差异有统计学意义（χ2越6.58、5.40，P越0.01、0.02）；而两种方法诊断膀胱癌复发的阳性预测值和阴性预测值比较，差异无统计学意义（χ2越3.13、0.50，P越0.08、0.48）。NMP22定量分析与尿液细胞学检查在不同分期、分级、风险分层中的灵敏度比较，差异有统计学意义（ P<0.05）。NMP22定量分析联合尿液细胞学检查、NMP22定量分析联合膀胱镜检查、尿液细胞学检查联合膀胱镜检查诊断膀胱癌复发的灵敏度分别为88.5%（46/52）、98.1%（51/52）及94.2%（49/52）。结论 NMP22定量分析法可用于浅表性膀胱癌复发的检测，尤其是在低度以及中度风险的人群，但本方法也因其相对较低的特异度在使用方面受到限制。
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膀胱癌抗原、核基质蛋白对膀胱癌的诊断价值
目的评价膀胱癌抗原(BTA)、核基质蛋白(NMP22)在诊断膀胱癌中的应用价值.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测泌尿道疾病患者和膀胱癌患者尿中BTA、NMP22的浓度,并与正常组进行对比,利用ROC曲线,评价BTA、NMP22在诊断时的价值.结果膀胱癌患者的BTA、NMP22含量与非膀胱癌组及正常组差异均有显著性(P<0.001),当BTA的临床判断值为12.4 ng/ml时,诊断灵敏度为75.0%,特异性为83.2%;当NMP22的临床判断值为11.2 U/L时,诊断灵敏度为92.9%,特异性为93.3%.两指标的联合应用可提高检测的灵敏度.NMP22对膀胱癌的诊断价值优于BTA,BTA与膀胱癌的病理分期相关.结论尿中BTA、NMP22检测可用于膀胱癌的诊断.
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SLE患者淋巴细胞核基质蛋白的变化及临床意义
目的:比较SLE患者与正常人及SLE患者静止期与活动期淋巴细胞核基质蛋白的变化,观察活动期SLE患者特有的淋巴细胞核基质蛋白对SLE患者骨髓CFU-GM生成的影响.方法:用高盐法提取核基质蛋白,SDS-PAGE电泳比较核基质蛋白的差异,体外甲基纤维素法培养骨髓CFU-GM.结果:SLE患者的淋巴细胞核基质在分子量为25kd、45kd、75kd、80kd处出现正常人所没有的蛋白带,分子量为40kd、70kd的核基质蛋白为活动期SLE患者淋巴细胞特有,培养体系中加入70kd核基质蛋白的SLE患者骨髓CFU-GM产率为38.21±18.70,显著低于对照组(P＜0.001).结论:SLE患者的淋巴细胞核基质蛋白与正常人相比有明显差异,分子量为25kd、45kd、75kd、80kd的核基质蛋白可能与SLE的发生发展有关,分子量为70kd的核基质蛋白抑制SLE患者骨髓CFU-GM的生成,可能与SLE的活动有关.
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前列腺癌与良性前列腺增生细胞株差异核基质蛋白的鉴定
目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-I之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs). 方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离；对差异表达的蛋白质点行MALDI-TOF-MS/MS质谱分析,数据库搜索并鉴定. 结果:成功获得了分辨率高、重复性好的不同细胞株NMPs双向凝胶电泳图谱；初步鉴定出包含酶、调节蛋白、RNA结合蛋白及各种因子在内的12个差异表达的蛋白质,在癌细胞株中3个NMPs表达上调,9个下调.结论:人前列腺癌细胞与良性前列腺增生细胞之间NMPs表达存在明显差异；初步筛选出12个差异NMPs,其表达水平及功能与疾病的联系需进一步研究.
