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口服卡介菌治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究
目的:观察口服卡介菌对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果.方法:制备EAE大鼠模型,随机分为BCG高、中、低剂量组和PBS对照组,每组各15只,对大鼠治疗后的临床症状及病理组织学进行评估,提取脾脏淋巴细胞,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群,3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖能力.结果:BCG组EAE大鼠与对照组相比,临床症状减轻,发病时间延迟,炎性细胞浸润数减少；急性期,口服BCG各组CD4+、CD8+T细胞的数量随剂量增加而增加,缓解期CD4+、CD8+T细胞数量减少；口服BCG可促进EAE大鼠T淋巴细胞增殖能力；高、中剂量组上述变化均较其它分组明显.结论:口服BCG可很好的诱导免疫耐受,延迟EAE发病,减轻炎症反应,改善临床症状.
关键词： 多发性硬化 实验性变态反应性脑脊髓炎 卡介菌 免疫耐受 -
口服卡介菌诱导免疫耐受的CD4+CD25+调节性T细胞机制研究
目的:研究口服卡介菌诱导免疫耐受对CD4+CD25+调节性T细胞的影响.方法:采用口服MPB制备EAE大鼠模型,随机分为BCG组(0.5mg/kg)和EAE模型组(PBS),每组各15只,连续经口灌服给药14d,同时选取15只健康大鼠作为对照组.分别于免疫后15d、27d流式细胞术检测外周血、胸腺及脾脏中CD4+CD25+T淋巴细胞百分率,ELISA检测血清IL-6、TGF-β、IgE、IgG含量.结果:与EAE模型组相比,免疫后BCG组大鼠外周血、胸腺及脾脏中CD4+CD25+T淋巴细胞百分率增加,血清IL-6、TGF-β含量上升,血清IgE、IgG抗体水平下降.结论:口服BCG通过上调淋巴器官中CD4+CD25+T淋巴细胞比例,抑制效应性T细胞活性,发挥免疫耐受作用.
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实验性变态反应性脑脊髓炎IL-2与IL-8的检测
目的研究IL-2与IL-8在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)免疫学发病机理中的作用.方法自牛脑提取的髓鞘碱性蛋白(MBP)加福氏完全佐剂(CFA)免疫豚鼠,建立EAE模型.采用生物活性测定法检测了EAE模型的IL-2水平,采用双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)检测了EAE模型的IL-8水平.结果 EAE组的IL-2与IL-8水平分别为194.21±97.88 U/ml、6.35±0.29 ng/ml,EAE组的IL-2与IL-8水平均显著高于正常对照组(P＜0.01与P＜0.05).结论 IL-2与IL-8在EAE免疫学病机制中具有重要作用,参与了免疫病理形成,验证了细胞因子(CK)是EAE致病的重要分子基础.为进一步研究多发性硬化(MS)的发病机理及寻求新的治疗途径提供了理论依据.
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树突状细胞在多发性硬化免疫机制和治疗中作用的研究
目的 研究树突状细胞(dendritic cell,DCs)在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)免疫机制及治疗中的作用.方法 建立实验性变态反应性脑脊髓膜炎(EAE)E组、对照(C)组和耐受组模型,采用混和淋巴细胞反应(MLR)检测各组脾脏DC培养上清液刺激淋巴细胞增殖的能力,采用ELISA双夹心法测量各组脾脏DC培养液中细胞因子水平.结果 三组脾DC刺激淋巴细胞增殖能力的差异具有统计学意义,EAE组强、EAE耐受组弱(P<0.05,P<0.01,P<0.01).三组模型脾脏DC培养上清液的TNF-α、IL- 10及IL-12水平每两组间进行比较,除了EAE组和对照组及EAE与耐受组之间比较IL-10水平没有统计学差异外(P>0.05),余均有统计学差异(分别为P<0.01,P<0.05).结论 DC具有功能异质性和功能可调性,DC调控免疫反应类型与其调节淋巴细胞的增殖和其分泌细胞因子水平有密切关系,可能在MS免疫机制及治疗中起重要作用.
关键词： 树突状细胞 免疫耐受 多发性硬化 实验性变态反应性脑脊髓炎 -
DCs诱导EAE大鼠免疫耐受后IP-10、ICAM-1及细胞因子的变化
目的 探讨树突状细胞(dendritic cells,DCs)在实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)免疫耐受时对临床症状、细胞因子、T淋巴细胞趋化因子(IP-10)及体液中细胞间黏附分子(ICAM-1)表达水平的影响.方法 建立EAE组及耐受组模型,评分法评估临床症状变化；用ELISA法检测各组脾脏DC培养液中细胞因子、IP-10及ICAM-1水平.结果 EAE及耐受组脾DCs培养液中TNF-α及IL-12水平比较,耐受组均比EAE组水平减低,有显著统计学差异(P＜0.01)；IP-10及ICAM-1表达水平耐受组较EAE组明显减低,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DCs调控免疫反应可改善临床症状,并影响细胞因子及趋化因子分泌水平,可能在MS免疫耐受机制中起重要作用.
关键词： 树突状细胞 免疫耐受 实验性变态反应性脑脊髓炎 -
DCs在EAE鼠免疫耐受的症状及泌细胞因子的变化
目的 研究树突状细胞(dendritic cells,DCs)在实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)免疫耐受对细胞因子的影响.方法 建立EAE组及耐受组模型,评价EAE模型及耐受鼠发病情况.采用ELISA双夹心法测量各组脾脏DCs培养液中细胞因子水平.结果 EAE模型组全部发病,平均12～14天达高峰.EAE组脾脏DCs培养上清液的TNF-α、ICAM-1较耐受组明显增高,差异有显著意义(P＜0.01,P＜0.01)；而IL-10水平耐受组较EAE组显著增高,组间比较有统计学差异(P＜0.05).结论 DCs调控免疫反应并影响细胞因子分泌水平,可能在MS免疫耐受机制中起重要作用.
关键词： 树突状细胞 免疫耐受 实验性变态反应性脑脊髓炎 -
实验性变态反应性脑脊髓炎促进大鼠正中隆起细胞凋亡
目的:观察实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠发病不同时期正中隆起凋亡细胞的变化,探讨该室周器官在EAE病程中的意义.方法:以豚鼠脊髓匀浆和完全弗氏佐剂及百日咳杆菌制备免疫抗原,建立大鼠EAE模型,利用TUNEL技术检测大鼠正中隆起及第三脑室侧壁在EAE不同时期凋亡细胞的变化.结果:接种后不同时期正中隆起和第三脑室侧壁均可见凋亡细胞,且14d组＞7 d组＞21 d组＞对照组；除对照组外,其他各组正中隆起的凋亡细胞数均多于第三脑室侧壁.结论:在EAE不同时期正中隆起的凋亡细胞变化比第三脑室侧壁突出,与临床病情呈一致性,正中隆起是脑内免疫反应敏感部位.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 正中隆起 第三脑室 凋亡细胞 大鼠 -
实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达与临床评分的相关性
目的:探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑和脊髓中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其与临床评分的关系.方法:将Wistar大鼠分为正常组、佐剂(CFA)组和EAE组,取脑和脊髓制成石蜡切片,进行HE染色和MCP-1 mRNA的原位杂交,并与各项临床指标比较.结果:EAE组的体重减轻、MCP-1 mRNA表达的阳性细胞百分数与正常大鼠、佐剂组相比显著性增加.EAE组大鼠MCP-1 mRNA的表达呈动态性变化,其MCP-1 mRNA先于临床症状高表达,并随临床评分的升高而升高,与临床评分呈正相关.结论:MCP-1是参与EAE发病的重要的炎性介质.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 单核细胞趋化蛋白-1 -
实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠穹窿下器室管膜细胞的形态学改变
目的:观察穹隆下器(SFO)室管膜细胞在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)时的形态学变化,探讨其病变的意义.方法:建立Wistar大鼠EAE模型,应用光镜、扫描电镜、透射电镜方法,动态观察EAE发病的潜伏期、发病期、恢复期SFO室管膜细胞的形态学改变.结果:(1)SFO室管膜细胞病变早于EAE发病,且与EAE病情明显正相关.(2)恢复期室管膜下层出现密集排列的染色质浓染的新生细胞.结论:(1)SFO参与了EAE时脑内的免疫反应;而且是EAE发病的早期病变之一,可能是外周免疫介质优先入脑位点.(2)室管膜下神经干细胞可被激活,对室管膜进行修复.
关键词： 穹隆下器 室管膜细胞 实验性变态反应性脑脊髓炎 大鼠 -
实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠模型的建立
目的：介绍一种新的简便可靠的实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠模型制备方法。方法：用自制完全福氏佐剂+豚鼠脊髓生理盐水匀浆制备成免疫抗原，给wistar大鼠四足垫内注射。结果：在接种后12～18天，大鼠出现双后肢瘫，脊髓横切片HE染色可见血管周围袖套样炎性细胞浸润和前角运动神经元肿胀变性。结论：本方法操作简单，可重复性强，适于广泛推广。
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 动物模型 大鼠 -
间充质干细胞株C3H10移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的实验研究
观察鼠源性间充质干细胞株C3H10移植对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型小鼠疾病进程的影响,为研究多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等自身免疫性疾病的治疗提供实验基础.采用MOG35-55抗原与完全弗氏佐剂(IFA)免疫C57BL/6雌性小鼠制作EAE模型；24只小鼠分成三组,即未干预对照组、C3H10细胞移植组和正常对照组.通过HE染色,Fast-blue染色观察小鼠脑和脊髓的病理学改变,结合神经功能评分和体重测量的方法观察C3H10细胞移植对EAE小鼠的影响.结果:(1)动物行为学的改变:免疫后第10天开始,未干预对照组小鼠陆续出现EAE临床症状,第14至第18天达到发病高峰,平均神经功能评分为2.3±0.36(P＜0.05),持续评分30d；C3H10细胞移植组小鼠有1只14 d和18 d神经功能评分为1分,正常对照组小鼠一直未出现临床症状(0分),持续观察30 d；(2)未干预对照组小鼠体重呈逐渐下降,第14天体重约(918.93±2.12)g,第22天约(18.65±2.04)g；C3H10细胞移植组小鼠体重有上升趋势,于造模后第14天称得体重为(18.7±0.93)g,造模后22 d小鼠体重保持在(19.26±0.58)g,两组相比具有统计学差异(P＜0.05)；(3)病理学改变:未干预对照组小鼠脑和脊髓小血管周围炎细胞浸润,呈袖套状或脱髓鞘改变,而C3H10细胞移植组和正常对照组小鼠未出现明显的脑和脊髓小血管炎症病理变化.小鼠间充质干细胞株C3H10移植于EAE小鼠可明显减少并延缓EAE发病,呈现一定的治疗作用.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 间充质干细胞 移植 -
天花粉蛋白合成肽通过诱导CD8抑制性T细胞治疗实验性自身反应性脑脊髓炎
为了探讨天花粉蛋白合成肽(M-Tk)治疗实验性自身反应性脑脊髓炎(EAE)的可能性及其作用机制,应用自身抗原MBP衍生肽MOG35-55免疫C57BL/6小鼠成功地诱发EAE后,以流式细胞术测定小鼠淋巴结细胞及脾细胞T亚群及细胞因子的表达,并通过临床评分观察M-Tk治疗EAE的有效性,包括以HE和LFB染色观察髓鞘病变.结果发现,M-Tk可抑制MOG35-55特异性T细胞的增殖反应,选择性诱导CD8+CD28-T调节细胞的扩增,明显提高IL-10的分泌和降低IFN-γ的产生,并有效改善EAE小鼠神经功能评分.采用M-Tk诱导的CD8 T细胞作体内输注可取得相似甚至更好的治疗效果(P>0.01).提示M-Tk在体内诱导产生CD8+CD28-抑制性T细胞并上调IL-10分泌降低IFN-γ产生,是对EAE取得疗效的关键.
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骨桥蛋白在多发性硬化症发症机制中的研究进展
骨桥蛋白(OPN)是一种分泌型的磷酸化糖蛋白,可以由多种细胞产生并且可以参与到多种免疫性疾病中.在多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的研究中发现,在不同类型的MS患者血浆中OPN都有不同程度的表达,其表达量与疾病的严重程度密切相关.OPN可以通过调节IFN-γ、IL-12、IL-10等细胞因子的表达影响Thl/Th2的平衡,同时还可以减少自身反应性T细胞的凋亡,促进其生存,从而加重疾病的复发,在脱髓鞘疾病从复发缓解到继发进展的过程中起重要作用,现综合国内外对OPN在多发性硬化症中的研究作一综述.
关键词： 骨桥蛋白 多发性硬化症 实验性变态反应性脑脊髓炎 -
左旋咪唑对EAE大鼠中枢神经系统MCP-1、MIP-1α的影响
目的:了解左旋咪唑(LMS)不同阶段给药对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠中枢神经系统(CNS)内MCP-1、MIP-1 α表达的影响.方法:采用豚鼠脊髓匀浆免疫Wistar大鼠建立EAE模型,分别在免疫前(LMS1)、免疫同时(LMS 2)、免疫后(LMS 3)给予LMS 10mg·kg-1,采用行为学变化观察发病情况,常规苏木精-伊红和Kluver&Barrera 髓鞘染包法观察CNS病理变化,免疫组化法及原位杂交法观察MCP-1、MIP-1 α的表达.结果:LMS1及LMS2组能加重行为学及病理变化(P＜0.01,P＜0.05),而LMS3组出现复发.免疫组化和原位杂交结果:和EAE组相比,LMS1,LMS2组MCP-1、MIP-1α的表达量明显升高(P＜0.01,P＜0.05).结论:LMS能明显增加EAE大鼠CNS内MCP-1、MIP-1 α的表达.提示LMS有促进EAE炎性细胞的趋化、激活作用,在免疫反应炎症细胞向CNS迁移过程中起重要的作用.
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左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎中枢神经病理的影响
目的:观察左旋咪唑(LMS)对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)中枢神经系统病理变化的影响.方法:制作豚鼠脊髓匀浆和LMS等Wistar-EAE大鼠模型,比较各组模型的行为学、组织病理学和髓鞘变化.结果:①与豚鼠脊髓匀浆组相比,LMS对EAE具有明显的促发作用,表现在潜伏期明显缩短,发病率明显升高(P＜0.05);而且LMS能够代替豚鼠脊髓匀浆直接激发EAE;②组织病理学观察:发病大鼠以脊髓、小脑、脑干为主的中枢神经系统内可见不同程度血管套的形成,室管膜下炎性细胞浸润,神经细胞的肿胀、变性、坏死等;广泛的神经髓鞘脱失,断裂;但轴突相对完整.结论:LMS引起EAE.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 左旋咪唑 动物模型 促发 激发 -
山茱萸总苷对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的初步观察
目的:观察山茱萸总苷(TGCO)对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的影响.方法:Wistar大鼠24只随机分为3组:正常对照组、EAE组和TGCO组.采用动物行为学、常规苏木精-伊红染色和LFB髓鞘染色观察大鼠的发病情况与中枢神经系统(CNS)的病理变化.结果:EAE组7/8只大鼠出现典型的EAE行为学改变、CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失.砌组有3/8只大鼠出现EAE行为学改变,评分高为2分,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润和髓鞘脱失明显减轻.对照组未见动物行为学和CNS病理学改变.结论:TGCO能减轻EAE大鼠的临床症状、延长潜伏期和降低发病率.
关键词： 多发性硬化 脑脊髓炎 山茱萸总苷 实验性变态反应性脑脊髓炎 -
实验性变态反应性脑脊髓炎的启动过程
实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)发病机制十分复杂,实验证据表明EAE是自身免疫性CD4+T细胞即Th1细胞激活后介导的一系列级联免疫反应.在疾病过程中大量细胞因子作用于特异的免疫细胞,或细胞因子之间相互作用,形成复杂免疫网络,并贯穿疾病的始终.至于细胞因子是如何作用于特异的免疫细胞,从而启动这一中枢免疫级联反应的,是国内外研究一直关注的焦点.本文就近2年这一领域的研究进展进行了总结和分析,进一步揭示EAE的发病机制.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 细胞因子 级联反应 -
神经内分泌免疫网络与实验性变态反应性脑脊髓炎的关系
神经内分泌免疫网络(NIM)是机体内多维立体网络调控机构,在多种自身免疫性疾病中起重要作用.本文综述了神经内分泌免疫网络中的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)、下丘脑-垂体-性腺(HPG)等对免疫系统的调节作用,讨论了神经内分泌免疫网络与多发性硬化(MS)及其动物模型即实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的关系.提示神经内分泌免疫网络可能是其发生发展的重要机制之一.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 神经内分泌 免疫网络 -
大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎中一氧化氮的变化
目的观察外周和中枢一氧化氮(NO)在大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)中的动态变化,探讨EAE大鼠发病的相关生物学机制.方法采用免疫组化法和硝酸还原酶法,观察豚鼠全脊髓匀浆诱导的Wistar大鼠EAE的过程中,脊髓内表达iNOS胶质细胞与外周NO代谢物NO-2和NO-3的变化.结果对照组脊髓内未发现表达iNOS阳性细胞,表达iNOS的CNS胶质细胞可能是小胶质细胞,而且它的变化与EAE大鼠的病情一致,评分2分和3分EAE大鼠脊髓表达iNOS的小胶质细胞比评分1分大鼠明显增多(P＜0.01),恢复期EAE大鼠表达iNOS的小胶质细胞明显减少(P＜0.01).EAE大鼠外周血清NO值随症状程度加重而升高,但在EAE恢复期时仍保持较高水平.未发病大鼠血清NO值明显增高,与对照组之间具有显著性差异(P＜0.01).结论小胶质细胞产生的NO可能在急性期EAE大鼠的发病中起重要作用.
关键词： 实验性变态反应性脑脊髓炎 一氧化氮 诱导型一氧化氮合酶 小胶质细胞 -
载脂蛋白 E 拟肽对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响
目的：探讨载脂蛋白E（ ApoE）拟肽对实验性变态反应性脑脊髓炎（ EAE）小鼠基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法将30只雌性C57BL／6J小鼠随机分为ApoE拟肽组、EAE组和正常组，每组10只小鼠。 EAE模型通过以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55为抗原诱导。 ApoE拟肽组在免疫后第2 d到30 d每隔2 d按5 mg／（ kg· d）背部皮下注射ApoE拟肽。EAE组和正常组均以等体积生理盐水替代。免疫后第0～35 d每日对小鼠进行神经功能评分。免疫后第35 d解剖小鼠，分离大脑和脊髓并行HE染色。采用免疫组化染色法检测各组小鼠大脑、脑干和脊髓的MMP-9和TIMP-1的表达。结果正常组小鼠均未发病。 ApoE拟肽组、EAE组的小鼠全部发病，但各有1只小鼠发病后死亡。 ApoE拟肽组与EAE组的发病潜伏期差异无统计学意义（ P＝0.72）。 ApoE拟肽组的神经功能评分在峰值和慢性期（第35 d）均明显低于EAE组（均P＜0.05）。 HE染色示，正常组未见炎症细胞浸润；EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓均有不同程度的炎性细胞浸润，以脑干和脊髓较为明显；ApoE拟肽组小鼠CNS炎性细胞浸润相对于EAE组明显减少。 EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓的MMP-9表达均高于正常组（均P＜0.05）。ApoE拟肽组小鼠大脑和脊髓的MMP-9表达要明显低于EAE组（均P＜0.05），其中ApoE拟肽组小鼠中脑和脊髓的MMP-9表达与正常组相比无明显差异（均P＞0.05）。正常组小鼠脊髓TIMP-1的表达明显高于EAE组和ApoE拟肽组（均P＜0.05）。而ApoE拟肽组与EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓TIMP-1表达的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论 ApoE拟肽能通过抑制大脑和脊髓MMP-9的表达改善EAE小鼠的症状。
