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细柱五加果实提取物对免疫抑制小鼠的免疫调节作用
目的:研究细柱五加果实乙醇提取物对免疫抑制小鼠的免疫调节作用.方法:将小鼠随机平均分为细柱五加果实的高、中、低3个剂量组(2.8,1.4,0.7 g·kg-1)、阳性对照组(20 mg·kg-1左旋咪唑)、空白对照组和模型对照组(各组n=10).各组小鼠均ig给药(20 mL·kg-1).连续10 d.空白对照组和模型对照组均ig同等剂量的蒸馏水.从第7天开始,除空白对照组外,其余各组小鼠均ip环磷酰胺(80 mg·kg-1)以制作免疫抑制小鼠模型.连续4d.采用免疫器官质量法和碳粒廓清法,以脾脏指数、胸腺指数、碳粒廓清指数及校正吞噬指数为指标来评价细柱五加果实乙醇提取物对免疫抑制小鼠非特异性免疫功能的影响；采用血清溶血素测定法,以血清溶血素含量为指标来评价细柱五加果实乙醇提取物对免疫抑制小鼠特异性免疫功能的影响.结果:细柱五加果实乙醇提取物对免疫抑制小鼠的脾脏指数和胸腺指数无显著性影响,但可以提高其碳粒廓清指数、校正吞噬指数和血清溶血素含量(P ＜0.05或P＜0.01).结论:细柱五加果实乙醇提取物对免疫抑制小鼠的非特异性免疫功能和特异性体液免疫功能均有提高作用.
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无梗五加中7个有机酸的含量测定及其与细柱五加、刺五加的比较
目的 建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定无梗五加中7个有机酸(绿原酸,新绿原酸,咖啡酸,1,3-二咖啡酰奎宁酸,异绿原酸B,异绿原酸A,异绿原酸C)含量的方法.方法 采用Hypersil ODS2 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温室温,以0.1％甲酸乙腈-0.1％甲酸水溶液进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长324 nm.结果 7个有机酸的线性范围分别为20.5 ～328、1.99 ～31.8、2.43 ～38.9、2.44～39.0、2.52～40.3、7.25～116、2.42 ～ 38.7 mg/L,平均加样回收率均在95.2％ ～ 103.9％范围内.结论 该方法快速简便、精密度好、灵敏度高,为控制无梗五加药材质量及与五加属的其他药材进行对比研究提供了方法.
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细柱五加多糖的提取工艺优选
目的：优化细柱五加多糖的提取、纯化工艺。方法以多糖提取率为评价指标，通过单因素和正交试验方法，考察溶剂用量、提取时间、提取次数及提取温度细柱五加多糖提取工艺的影响为考察因素。结果细柱五加多糖优提取工艺为准确称取10.0 g药材超声提取，纯水200 mL、提取温度60℃、提取时间90 min、提取次数4次。结论优选的提取、纯化工艺稳定可靠。
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细柱五加茎中的一个新的贝壳杉烷型二萜苷
目的 研究细柱五加Acanthopanax gracilistylus茎的化学成分.方法 应用色谱方法分离纯化,通过波谱技术结合理化性质的方法鉴定化合物结构.结果 从正丁醇部位分离并鉴定了1个新的贝壳杉烷型二萜苷,命名为贝壳杉烷酸苷A(16α,17-dihydroxy-ent-kauran-19-oie 19-[-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl]ester)(1).结论 化合物1为新化合物.
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细柱五加茎多糖闪式提取工艺优化及其免疫活性研究
目的 优化细柱五加茎多糖的闪式提取工艺,并研究其细胞毒性和免疫活性.方法 运用球面对称设计试验,综合考虑料液比、提取温度、提取时间3因素,优化细柱五加茎多糖的闪式提取工艺；对闪式提取法与回流、超声2种传统提取方法进行比较.通过体外试验对提取所得多糖的细胞毒性和免疫活性进行初步研究.结果 细柱五加茎多糖闪式提取佳工艺为料液比1:13.2,提取温度80℃,提取时间420 s.在此条件下,细柱五加茎中多糖提取率为0.78％,且优于回流和超声法提取所得多糖提取率.体外活性实验结果显示,细柱五加茎多糖质量浓度在10～20 μg/mL对RAW 264.7细胞无明显毒性,在10～40 μg/mL能够促进RAW 264.7细胞NO的分泌.结论 建立了稳定、简便的细柱五加茎多糖的闪式提取工艺方法,初步研究了其多糖的免疫活性,为合理的开发细柱五加资源提供理论依据.
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细柱五加叶中五加苷元的积累动态研究
目的 采用高效液相色谱方法测定不同采收期细柱五加叶中五加苷元的量,研究其变化趋势.方法 采用RP-HPLC法测定不同采收期(3～12月份)细柱五加叶中的五加苷元,色谱柱为AT.lichrom ODS-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水-醋酸(60∶40∶0.1)为流动相,柱温25℃,体积流量1.0 mL/min,检测波长214nm,进样量10μL.结果 细柱五加叶中的五加苷元在秋季时量高,春季次之,夏季低.五加苷元量随季节变化明显,10月份采摘其五加苷元量高.结论 建立稳定性好、准确性高,适用于细柱五加叶中五加苷元的定量分析方法,并可用于分析不同采集期细柱五加叶中的五加苷元动态变化.
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五加皮药材基原、化学成分及药理作用研究进展
五加皮(Cortex Acanthopanacis)是细柱五加(Acanthopanax gracihstylus W.W.Smith.)的干燥根皮.该文对五加皮药材基原、化学成分及药理作用研究进展进行了综述,并进行小结与展望,确定五加皮今后的研究方向应放在化学成分的深入系统研究、弄清五加皮传统疗效的药效物质基础和建立五加皮质量标准等方面,为五加皮及细柱五加的进一步研究提供科学依据.
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细柱五加果实化学成分的研究
目的 研究细柱五加Acanthopanax gracilistylus果实的化学成分.方法 采用硅胶柱层析、反相柱层析、重结晶等方法分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构.结果 从细柱五加果实中分离得到7个化合物,分别鉴定为竹节参苷Ⅳa甲酯(1),竹节参苷Ⅳa丁酯(2),Acankoreoside D(3),acantrifoside A(4),β-胡萝卜苷(5),3-epi-betulinic acid(6),16-α-羟-19-贝壳杉烷酸(7).结论 化合物1,2首次从该属植物中分离得到,其余均为首次从该植物果实中分离得到.
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中药五加皮药材辨析
目的:探讨五加皮药材古今药用品种演变,为五加皮的应用提供参考.方法:查阅历代本草文献,结合资源调查.结果:古代五加皮来源于五加属植物,其中细柱五加为五加皮药材的主流质优品种.近现代有以萝藦科植物杠柳根皮充之.结论:纠正杠柳根皮取代五加皮药用的现状,恢复正品五加皮的药用地位.
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几种五加属植物花粉形态的扫描电镜观察
目的 研究五加属(Acanthopanax)细柱五加(A.gracilistylus)、三叶五加(A.gracilistylus var.trifoliolatus)、浙江五加(A.zhejiangensis)和藤五加(A.leucorrhizus)的花粉形态特征.方法 利用扫描电子显微镜对五加属四种植物花粉表面微形态进行了观察和比较.结果 该属花粉形态基本一致,具有一定的共同特征,即花粉粒形态呈球形或椭球形,外壁纹饰为拟脑状网纹,均具有三孔沟.但在花粉粒的大小、网眼形状和网脊宽度等存在差异,其中三叶五加、浙江五加和藤五加均为首次报道.结论 五加属不同种在花粉粒的大小、网眼形状和网脊宽度情况存在明显的差异,这些花粉表面微观形态的差异可作为区别种的鉴定依据.
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HPLC同时测定细柱五加叶总苷元提取物中4种主要三萜苷元的含量
目的 建立同时测定细柱五加叶总苷元提取物中4种三萜苷元的高效液相色谱(HPLC)分析方法.方法 采用Phenomenex Columbus C18 110A色谱柱(250 mm×4.60 mm,5.0μm);柱温30℃;以乙腈-0.2％磷酸水为流动相,梯度洗脱;检测波长210 nm;流速1 mL/min.结果 4个成分均能达到基线分离,样品含量测定出各组分在相应的浓度范围内均呈现良好线性关系,其平均加样回收率分别为97.8％,96.0％,96.4％,98.4％.结论 本方法可用于同时测定细柱五加叶总苷元提取物中3α,11α,23-trihydroxy-lup-20(29)-en-28-oic acid、3α,11-dihydroxy-23-oxo-lup-20(29)-en-28-oic acid、impressic acid、acankoreanogein的含量,为评价细柱五加叶总苷元质量提供了有效的方法.
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细柱五加果实化学成分研究
目的:研究细柱五加果实的化学成分.方法:采用硅胶柱层析、反相柱层析、重结晶等方法分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构.结果:从细柱五加果实乙酸乙酯部位中分离得到10个化合物,分别鉴定为:acankoreoside D(1)、3a,11α-dihydroxylup-20(29)-en-28-oie acid(2)、3β-([O-β-D-glucopyranuronosyl]oxy)-olean-12-ene-28-olc acid(3)、3β-([O-β-D-glucopyranuronosyl]oxy)-28-O-β-D-glucopyranosyl-olean-12-ene-28-olc acid(4)、oleanolic acid-3-O-6'-O-methyl-β-D-glucumnopyranoside(5)、acantrffoside A(6)、acankore06ide A(7)、异贝壳杉稀酸(8)、原儿茶酸(9)、β-甾醇(10).结论:化合物2-5首次从该植物中分离得到.
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细柱五加茎化学成分研究
目的:研究细柱五加茎的化学成分.方法:应用各种色谱技术分离纯化,通过理化性质和波谱方法鉴定化合物的结构.结果:从细柱五加茎中分离鉴定得到16个化合物,分别为:(2S,3S,4R,8E)-2.[(2'R)-2'-羟基-十五碳酰胺基]-二十七碳-1,3,4-三羟基-8-烯(la)、(2S,3S,4R,8E)-2-[(2'R)-2'-羟基-十八碳酰胺基]-二十四碳-1,3,4-三羟基-8-烯(1b)、(2S,3S,4R,8g)-2-[(2'R)-2'-羟基-二十一碳酰胺基]-二十一碳-1,3,4-三羟基-8-烯(1c)、(2S,3S,4R,8E)-2-[(2'R)-2'-羟基-二十二碳酰胺基]-二十碳-1,3,4-三羟基-8-烯(1d)、(2S,3S,4R,8E)-2-[(2'R)-2'-羟基-二十三碳酰胺基]-十九碳-1,3,4-三羟基-8-烯(1e)、(2S,3S,4R,8E)-2-[(2'R)-2'-羟基-二十四碳酰胺基]-十八碳-1,3,4-三羟基-8-烯(1f)、1-O-β-D-葡萄糖-(2S,3S,4R,8E)-2-[(2'R)-2'-羟基-十五碳酰胺基]-十九碳-1,3,4-三羟基-8-烯(2)、16-α-羟-19-贝壳杉烷酸(3)、16αH,17-isovaleryloxy-ent-kauran-19-oic acid(4)、松柏苷(5)、紫丁香苷(6)、刺五加苷D(7)、豆甾醇(8)、β-谷甾醇(9)、β-胡萝卜苷(10)、正十五烷酸(11).结论:化合物1a～f、2为首次从该属植物中获得,化合物4、5、11为首次从该植物中得到.
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无梗五加根化学成分的UPLC-MS/MS分析及与细柱五加、刺五加的比较
目的:分析无梗五加、细柱五加和刺五加根中的化学成分并将三者进行比较.方法:运用UPLC-MS/MS对无梗五加、细柱五加和刺五加根中的化学成分进行一级和二级质谱分析,通过与对照品色谱峰的保留时间以及一级、二级质谱图比对鉴定其中的已知成分,并根据一级二级质谱信息推测未知成分的化学结构.色谱-质谱条件:采用Acquity UPLCTM BEH C18色谱柱(1.7μm,100 mm×2.1 mm),以乙腈(A)-2 mmol·L-1醋酸铵水(B)为流动相,梯度洗脱(0 ～ 15 min,8％A→25％A;15 ～ 30 min,25％ A→55％ A;30 ～40 min,55％A→80％A),流速0.15 mL·min-;质谱离子源为电喷雾离子化(ESI)源,正、负离子检测.结果:从3种五加属植物根中共鉴定了13个化合物,包括奎宁酸类成分如1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸;酚苷类成分如紫丁香苷;木脂素类成分如松脂醇二葡萄糖苷、无梗五加苷B、无梗五加苷D、芝麻脂素、细辛脂素、洒维宁、台湾脂素C、台湾脂素E、赛菊宁黄脂.同时推测了15个化合物,包括奎宁酸类成分如—咖啡酰奎宁酸、对香豆酰奎宁酸、阿魏酰奎宁酸;酚苷类成分如紫丁香树脂酚二葡萄糖苷、松柏苷、松柏醛葡萄糖苷、芥子醛葡萄糖苷;木脂素类成分如紫丁香苷A、紫丁香苷B、Simplexoside、Pluviatolide、3-(3,4-二甲氧基苄基)-2(3,4-亚甲基二氧苄基)丁内酯;黄酮类成分如安妥苷;香豆素类成分如刺五加苷B2、异嗪皮啶.将3种五加根中的化学成分进行比较,无梗五加根与细柱五加根成分比较相近,刺五加根中含有在无梗五加根和细柱五加根中未检测到的多种酚苷类成分如紫丁香树脂酚二葡萄糖苷、松柏苷、紫丁香苷、松柏醛葡萄糖苷、芥子醛葡萄糖苷.结论:无梗五加根和细柱五加根中的化学成分组成比较相似,从化学成分的角度验证了《中华本草》中对“五加皮”的来源记载,即“五加皮”为细柱五加和无梗五加植物的根皮;二者化学成分与刺五加差别较大,在药用过程中应进行区分.
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细柱五加果实提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用
目的研究细柱五加果实乙醇提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将60只小鼠随机分成细柱五加果实的高、中、低剂量组以及阳性对照组、模型对照组、空白对照组共6组。6组小鼠ig给药20 mL/（kg.d）。连续14 d。第14 d给药1 h后,除空白对照组外,其余各组均ip 0.1%CCl4 0.2 mL/20g。所有小鼠在ip CCl4 16 h后采用眼球取血并脱颈椎处死。然后离心取血清,剖腹取肝。分别将各组肝脏取出0.1 g,加0.9 mL生理盐水进行匀浆。检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）活性及肝匀浆中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化。结果与模型对照组相比,不同剂量的细柱五加果实乙醇提取物均能显著降低血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）的活性及肝组织中丙二醛（MDA）的含量,提高超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结论细柱五加果实乙醇提取物对四氯化碳致小鼠的急性肝损伤有保护作用。
