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高效液相色谱-质谱联用法研究巫山淫羊藿黄酮类成分
目的:采用高效液相色谱-质谱联用法( HPLC-MSn)研究巫山淫羊藿中的黄酮类成分.方法:70％乙醇提取,大孔树脂柱纯化得到总黄酮;运用HPLC-MSn联用技术得到各化合物的总离子流图和多级质谱图.结果:从巫山淫羊藿药效部位中鉴定出12个化合物,其中有3对化合物互为同分异构体.结论:HPLC-MSn法可用于巫山淫羊藿中黄酮类成分的结构鉴定,为建立快速、准确的质量评价方法和分析炮制前后成分变化提供了参考.
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巫山淫羊藿净制研究
目的:研究巫山淫羊藿净制的科学性.方法:紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,高效液相色谱法测定黄酮类单体成分--朝藿定C、淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的含量.结果:叶片、叶柄、叶中总黄酮含量分别为9.185%,2.143%,3.364%;朝藿定C含量分别为5.346%,0.653%,1.577%;淫羊藿苷含量分别为1.430%,0.047%,0.321%;淫羊藿次苷Ⅱ含量分别为0.328%,0.777%,0.078%.结论:叶片和叶柄中主要黄酮类成分含量差异明显;叶片中各成分的含量是叶柄的4.3～30.4倍,巫山淫羊藿摘取叶片人药时应摘除叶柄是科学的.
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人工栽培巫山淫羊藿苷含量研究
目的:寻找淫羊藿苷在巫山淫羊藿地上、地下各部位及夏、秋、冬三季的动态分布规律,以指导栽培、收获.方法:分别在6、9、12中旬取样测定苷在叶片、地上茎、地下根状茎及须根中的含量,分析分布规律.结果:淫羊藿苷在叶片中含量高,地下根状茎低.结论:栽培上要注意提高叶片及须根产量.
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超声辅助响应面法优化巫山淫羊藿中朝藿定 C和淫羊藿苷共同提取工艺研究
目的：应用响应面法优化巫山淫羊藿中朝藿定 C 和淫羊藿苷的超声辅助提取工艺。方法在单因素试验基础上，采用 Box-Behnken 试验设计和响应面分析法考察乙醇体积分数、超声提取时间、液固比对巫山淫羊藿中朝藿定 C 和淫羊藿苷含量的影响。结果佳超声辅助提取工艺为乙醇体积分数73%、超声提取时间22 min、料液比为1∶32，巫山淫羊藿中朝藿定 C 和淫羊藿苷得率分别为（15.90±0.12）%和（0.75±0.05）%。结论本研究所建立的提取工艺能够提高巫山淫羊藿中朝藿定 C 和淫羊藿苷的提取率，与模型预测值相符。
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巫山淫羊藿不同炮制品中脂肪酸成分的气相色谱-质谱联用分析
目的 比较巫山淫羊藿不同炮制品及辅料羊脂油中的脂肪酸成分组成和相对含量变化.方法 采用索氏提取法提取脂肪酸成分,用KOH-MeOH溶液甲酯化后,用气相色谱-质谱联用技术分析脂肪酸成分的组成,面积归一化法计算成分相对含量.结果 巫山淫羊藿生品、清炒品、油拌品、油炙品和羊脂油中分别检测出16、14、17、19、18 种化合物,油炙品与生品比较,含量升高的组分有6个,占油炙品脂肪酸成分总量的53.10%;降低的有4个组分,占总量的34.36%.结论 巫山淫羊藿不同炮制品中脂肪酸成分的组成和相对含量有较大差异,成分变化与加入羊脂油和加热均有关.
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巫山淫羊藿分蘖芽组织培养研究
目的:建立巫山淫羊藿的组培快繁体系,为实现其工厂化育苗提供理论依据.方法:以巫山淫羊藿分蘖芽为外植体,MS,B5,WPM为基本培养基,添加不同浓度6-BA,NAA,GA3等植物生长调节物质,对芽的诱导与增殖条件进行了系统研究.结果:芽适宜的消毒方法为75％乙醇消毒30 s,再用0.1％ HgCl2连续2次消毒(4+2) min,污染率可控制在5％以内,存活率为75％.芽诱导适宜的培养基为WPM+ 6-BA 2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+GA3 0.5 mg·L-1,诱导率为75.5％,且基本培养基和6-BA对诱导率的影响达到极显著水平；芽增殖的适宜培养基为WPM+6-BA2.0mg·L-1 +NAA0.5mg·L-1,增殖系数为3.3；佳生根培养基为1/2 WPM+IBA0.5 mg·L-1 +0.05％活性炭,生根率为90％,每株3～6条根,苗生长健壮.结论:筛选出了分蘖芽适宜的消毒方法及不定芽诱导、增殖和生根适宜的培养基,建立了巫山淫羊藿分蘖芽的组培快繁体系.
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淫羊藿药典品种显微鉴别研究
目的:对<中国药典>2005年版收载的5个品种淫羊藿:淫羊藿Epimedium brevicornu箭叶淫羊藿E.sagittatum、柔毛淫羊藿E.pubescens、巫山淫羊藿E.wushanense和朝鲜淫羊藿E.koreanum的显微特征展开研究,为其鉴定提供新的依据.方法:每个淫羊藿药典品种选取3至多个样本,观察叶片的显微特征,总结种内较稳定的特征以供鉴别.结果及结论:叶背面非腺毛形态、上表皮细胞波状深度及栅表比,可作为5种药材鉴定的依据.
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淫羊藿属3种植物引种栽培研究
根据<中国药典>2000年版、<贵州省中药材质量标准>1998年版,贵州产巫山淫羊藿、粗毛淫羊藿、黔岭淫羊藿和光叶淫羊藿符合入药标准,全省70余个市县均有分布,年高收购量为7.3万公斤,为我国淫羊藿主产区之一[1].目前市场流通的淫羊藿原药材,据作者初步调查,均来自于野生采挖,方法是挖取全株.由于长期不合理开发利用,资源已日渐枯竭,因此很有必要对其进行引种驯化,扩大种群数量、生存地域,以便为大面积人工栽培打下基础.
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巫山淫羊藿药材及饮片中朝藿定C含量测定
2005年版<中国药典>一部淫羊藿项下规定了总黄酮及淫羊藿苷的含量限度,但作者在实际临床应用中发现,巫山淫羊藿中淫羊藿苷含量极低,达不到药典要求,不足以全面反映此种饮片质量.
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巫山淫羊藿离体胚培养的研究
目的:研究药用植物巫山淫羊藿组织培养技术,为工厂化育苗提供科学根据.方法:以巫山淫羊藿的种胚为外植体,采用MS培养基,附加不同浓度2,4-D,6-BA,IBA,NAA进行正交试验.结果:诱导愈伤组织的优培养基为:MS+2,4-D 2 mg·L-1 +IBA2mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1;愈伤组织分化的优培养基为:MS+6-BA1 mg·L-1 +NAA0.5mg· L-1+IBA 1 mg·L-1；诱导芽的优培养基为:MS+IBA2mg·L-1 +6-BA0.5 mg·L-1；芽增殖的佳培养基为:MS+ 6-BA 1.0 mg·L-1 +NAA0.5 mg· L-1.结论:通过诱导愈伤组织途径和丛生芽途径,建立了巫山淫羊藿种胚外植体诱导和培养方法,达到快速繁殖的目的.
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氟啶酮、赤霉素和发芽温度对巫山淫羊藿种子休眠解除的影响
以经变温层积90d的巫山淫羊藿种子为材料,用不同配比的氟啶酮、赤霉素混合溶液浸种,并转入10/20℃变温和4℃低温中发芽,比较了各处理种子发芽势、发芽率及烂种率,旨在了解氟啶酮、赤霉素、发芽温度对巫山淫羊藿种子休眠解除的影响.结果表明:①赤霉素、氟啶酮、发芽温度可显著影响种子休眠解除效果,其中,氟啶酮效应强,温度其次,赤霉素弱.低温中,10 mg·L-1氟啶酮+300 mg·L-1赤霉素处理发芽率高,为79.3％,20mg· L-1氟啶酮+200 mg·L-1赤霉素处理发芽势高,为52.7％;变温中,20 mg·L-1氟啶酮+ 200 mg·L-1赤霉素处理发芽率、发芽势高,分别为72.0％,56.0％.②巫山淫羊藿种子只能在低温中萌发,不能在变温中萌发,但氟啶酮可使其于变温中萌发;③赤霉素、浸种具有增加烂种率的风险.研究表明,一定浓度配比的氟啶酮、赤霉素混合溶液,能显著提高种子休眠解除率,增加种子发芽速度和成苗率,但是赤霉素也有增加烂种率的风险,实际应用中应合理规避.
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炮制对巫山淫羊藿黄酮类成分的影响
目的:为巫山淫羊藿饮片质量控制指标的选择提供科学依据.方法:对贵州不同产地的巫山淫羊藿生品和油炙品饮片,采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,HPLC测定朝藿定C和淫羊藿苷含量.结果:巫山淫羊藿炮制后总黄酮含量降低,淫羊藿苷含量升高,朝藿定C含量有升有降.结论:巫山淫羊藿饮片以总黄酮、朝藿定C和淫羊藿苷等多指标进行质量评价为佳.
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影响巫山淫羊藿品质的施肥指标体系构建
目的 建立N、P、K施肥量与巫山淫羊藿Epimedium wushanense品质的回归模型,探索巫山淫羊藿的佳施肥方案.方法 采用3因素4水平设计施肥方案,布置巫山淫羊藿N、P、K肥料效应实验,并对实验数据进行整理与统计分析.结果 建立了N、P、K肥配施效应模型与巫山淫羊藿产量和质量之间的关系,并对各因子之间的交互作用进行了分析,对.模型进行了优化.在不同施肥措施中N2P2K2处理效果佳,不施或者少施N、P、K中的任何一种养分均不同程度导致巫山淫羊藿减产和质量下降;单因子效应分析表明,随着N、P和K施肥量的提高,产量和有效成分的量呈先升后降的趋势;双因素交互效应分析表明,以巫山淫羊藿产量为考察对象,N、P、K肥间相互作用都存在一个值域,低于这个值域时都表现为协同促进作用,高于这个值域时则都表现为拮抗作用;以淫羊藿苷和朝藿定C的量为考察对象,N、K和P、K肥间相互作用存在一个值域,有效成分的量表现出与产量相同的趋势.结论 模型优化结果表明,大田实验适宜的N、P、K肥施用量分别为224.154～269.461、176.324～214.651、152.624～197.354 kg/hm2.
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生长期巫山淫羊藿不同部位5种黄酮类成分的动态积累研究
目的 研究生长期巫山淫羊藿根、茎、叶中5种黄酮类成分朝藿定C、双藿苷A、淫羊藿苷、淫羊藿属苷A和淫羊藿属苷C的量,揭示几种活性成分的动态积累规律.方法 采用RP-HPLC方法 ,以美国Waters Sunfire~(TM_)C_(18)为色谱柱(带预柱),检测波长270 am,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,体积流量为1 mL/min.结果 在20 min内分离测定了5种异戊烯基黄酮,得到了这5种异戊烯基黄酮在生长期巫山淫羊藿不同部位中的分布积累规律.发现巫山淫羊藿不同部位中双藿苷A的量分别为:根1.090%～3.661%,茎0.001%～0.033%,叶0.095%～0.217%;淫羊藿属苷A的量分别为:根0.177%～0.971%,茎0.010%～0.089%,叶0.089%～0.323%;朝藿定C的量分别为:根0.223%～0.748%,茎0.024%～0.147%,叶0.905%～2.228%;淫羊藿苷的量分别为:根0.009%～0.128%,茎0.003%～0.044%,叶0.258%～0.929%;淫羊藿属苷C的量分别为:根0.080%～1.857%,茎0.002%～0.022%,叶0.004%～0.058%.结论 巫山淫羊藿叶中淫羊藿苷除4、5、7月份外,其余月份的量都低于0.5%,而朝藿定C的量平均在1.586%.巫山淫羊藿叶在其生长的任何月份都是朝藿定C的量远大于淫羊藿苷的量,积累高峰期有3个,朝藿定C是巫山淫羊藿叶中的主要成分.巫山淫羊藿根在其生长的任何月份都是双藿苷A的量远大于朝藿定C的量,质量分数平均在2.763%,双藿苷A为巫山淫羊藿根中的主要成分.
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淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察
淫羊藿属 Epimedium L.药用植物,在我国有29种,产于川陕者14种[1],具有多方面的药理活性.《中国药典》作为淫羊藿药材的有5种,分别为淫羊藿、朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿[2],笔者在进行淫羊藿成分系统分离研究的基础上,对采集的川陕豫产9种习惯人药的淫羊藿品种[3],将其叶中的主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的量进行了考察,结果表明大部分品种朝藿定C量大于淫羊藿苷.
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HPLC法制备巫山淫羊藿中的淫羊藿属苷A和朝藿定C对照品
目的 研究制备型高效液相分离纯化巫山淫羊藿中淫羊藿属苷A和朝藿定C的条件.方法 巫山淫羊藿粗提物经大孔吸附树脂和硅胶柱色谱得朝藿定C与淫羊藿属苷A的混合物,进行HPLC制备色谱分离,以乙腈-水(24∶76)为流动相,收集相应流分浓缩至干,甲醇溶解,滤过,滤液蒸干即得.结果 该法所得产品极易结晶,用面积归一化法定量,质量分数大于98.0％,经紫外、红外、核磁共振确定结构,与文献数据基本一致.结论 本法简便快捷,可获得高纯度的淫羊藿属苷A和朝藿定C,解决在常规柱色谱法制备朝藿定C对照品中存在的不易结晶和纯度不够的问题,产品可用作分析用对照品.
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淫羊藿对神经精神作用的研究进展
淫羊藿(Herba epimedii)又名三枝九叶草,亦称仙灵脾,是多年生的草本植物,包括小檗科植物心叶淫羊藿(Epimedium revicornum maxim)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum maxim)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens)、巫山淫羊藿(Epimedium wushanense)、朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum nakai)、粗毛淫羊藿(Epimediumacuminatum feanch)等,是我国传统补益类中蒙药.
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大孔树脂-梯度高速逆流色谱分离巫山淫羊藿中双藿苷A和朝藿定C
目的 研究大孔树脂结合梯度高速逆流色谱法从巫山淫羊藿粗提物中制备双藿苷A和朝藿定C的分离纯化方法.方法 采用大孔树脂法预处理得到巫山淫羊藿粗提物,以二氯乙烷-甲醇-水(4∶4.5∶2,V/V)体系的上相做固定相,下相做流动相,用梯度高速逆流色谱法分离纯化其主要成分双藿苷A和朝藿定C,检测波长为270 nm.结果 从1.5g巫山淫羊藿提取物中分离得到双藿苷A (458 mg)和朝藿定C(321mg),经HPLC法分析,其纯度分别为95.2％和93.8％.结论 该法简单有效,可提高淫羊藿黄酮的分离效率.
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巫山淫羊藿主要成分朝藿定C和双藿苷A抗炎作用研究
目的 研究淫羊藿主要成分朝藿定C和双藿苷A对实验大鼠炎性病变的影响.方法 采用蛋清致大鼠足肿胀炎症法测定主要成分双藿苷A和朝藿定C对大鼠足肿胀的影响,计算肿胀度,并与蒸馏水组、吲哚美辛组进行比较.结果 主要成分朝藿定C和双藿苷A与蒸馏水组进行比较,两者均能明显减少蛋清所致大鼠足肿胀(P＜0.01)；与吲哚美辛组比较,低剂量朝藿定C组差异无统计学意义,而高剂量朝藿定C组差异则有统计学意义.结论 朝藿定C和双藿苷A具有抗炎作用.
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贵州省雷山县巫山淫羊藿资源及群落调查
淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物,多年生草本,始载于<神农本草经>,列为中品,已有2000多年的用药历史.巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying是<中国药典>(2005年版)所载品种,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功效,用于阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛等症.贵州雷山是巫山淫羊藿的主产区,其产巫山淫羊藿品质较优.
