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Ras蛋白特异性DNA适配子的体外筛选与鉴定
我们利用指数富集配体的系统进化技术( SELEX)体外筛选Ras蛋白的高特异性、高亲和力的DNA适配子,为冠心病术后再狭窄的防治提供新的策略.
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干细胞神经发育毒性体外筛选方法的开发与验证
随着日常生活环境中接触危害化学物品的增多,潜在神经发育毒性(developmental neurotoxicity,DNT)化合物引起的公共卫生问题日益受到重视,然而对于此类物质作用机制的认识、筛查和毒性评价尚有待科学策略和标准化方法的支持.现行DNT评价方法主要参考2007年国际经济合作与发展组织(organisation for economic co-operation and development,OCED)颁布的TG 426,采用整体哺乳动物,费时费力,难以满足当前不断增长的疑似DNT化合物的检测需求[1],利用啮齿类动物获得的数据也存在外推到人的风险.
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核酸适体在细胞信号转导系统中的研究进展
多细胞生物对众多内外环境刺激的应答,调节代谢、适应环境,有赖于细胞间复杂的信号传递系统。通过传递信息分子,发生分子转化并启动级联反应,活化细胞内部的信息。从而生理性地调控机体内每个细胞的新陈代谢和应答行为,调节细胞代谢和控制细胞生长、繁殖和分化,保证了整体生命活动的正常进行。细胞信号转导系统中的信息物质包括细胞间信息物质和细胞内信息物质。核酸适体( nucleic acid aptamer)是能够与靶分子高亲和力,高特异性结合的单链寡核苷酸或是肽链。核酸适体作为一种人工合成的核酸,在与靶分子结合时,需要大量的单链寡核苷酸折叠成众多高级结构,通过高级结构间的相互结合,与靶分子诱导契合。近,应用体外筛选等方法,筛选出能够与受体、配体、细胞质或细胞核内信号分子作用的适体。这些适体在细胞内表达,调节细胞代谢,用于研究和调控细胞内的信号转导途径[1]。
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柴胡解毒汤在体外细胞培养中抗HBV活性的研究
我国有数千年应用中医药治疗疾病的传统和经验,从中已发现不少抗乙型肝炎、爱滋病、出血热、疱疹、柯萨奇等病毒有效单方和复方制剂,有的已在临床上用于治疗病毒性疾病.自从Sells等建立HBV-DNA转染细胞株2.2.15,为体外筛选抗病毒药物提供了模型.为了找出更有效的抗HBV天然药物,我们通过ELISA法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg的分泌情况,对不同浓缩倍数的柴胡解毒汤进行了抗HBV作用的评价.同时,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测药物的细胞毒性,以观察药物的临床实用价值.
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以人CCR5启动子为靶的药物筛选方法的初步建立
构建靶向人趋化因子受体5(CC chemokine receptors 5,CCR5)启动子的药物筛选系统.将CCR5启动子序列克隆入改建后的报告载体pGL3-neo,转染pGL3-neo-CCR5入Jurkat细胞(急性T淋巴细胞性白血病细胞),G418筛选后分组;用7种中药分别作用于各组细胞16 h后,检测细胞中CCR5启动子的表达水平.结果显示,双黄连组比对照组的荧光值明显降低(P<0.05);川琥宁组、黄芩组、黄芪组比对照组的荧光值明显升高(P<0.01).双黄连可使体外培养细胞转染的CCR5启动子活性降低,川琥宁、黄芩、黄芪可使体外培养细胞转染的CCR5启动子活性增高.表明初步构建成功靶向人CCR5启动子的药物筛选系统.
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胚胎干细胞用于药物及其他化合物筛选的研究进展
胚胎干细胞(Embryonic stem cell, ES cell)用于药物及其他化合物的体外筛选,称为胚胎干细胞体外测试(Embryonic stem cell test, EST),通过EST可以把药物等化合物分为三类:无毒性、弱毒性和强毒性.与其他方法相比,EST具有很大优点:(1)无须牺牲大量怀孕动物.(2)不用担心对动物或人体的巨大副作用.(3)由于胚胎干细胞在体外分化成多种细胞的潜能,EST可用于分化过程中药物或其他化合物对发育过程造成的毒理学研究.(4)可与计算机等分析方法结合,因而具有更高的准确率和敏感性.(5)可以进行分子水平的定量研究.这些都使得EST在药物筛选中显示出巨大的发展前景.本文综述了EST的发展、研究方法、现状及其展望.
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抗肿瘤药物药效学的评价方法
抗肿瘤药物的药效学研究是新药发现与开发的重要环节,通常是指从样品到活性检测至动物实验的各个阶段的工作。本文介绍了抗肿瘤药物筛选的分子靶点及其抗肿瘤药物的药效学研究的体外筛选方法和体内治疗作用的动物试验方法,同时总结了抗肿瘤新药药效学评价中需关注的问题,展望了抗肿瘤药物药效学研究趋势。