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新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立
目的 建立检测新布尼亚病毒IgG抗体的间接免疫荧光(IFA)方法.方法 用分离到的5株新布尼亚病毒株感染非洲绿猴肾(Vero)细胞,制备抗原片,优化IFA工作条件,进行IFA法的特异度和敏感度评价,应用建立的IFA方法对2007-2011年在河南省信阳地区采集的126例发热伴血小板减少综合征患者急性期和恢复期双份血清标本进行检测,并与RT-PCR方法的检测结果进行比较.结果 筛选出免疫荧光反应特异、稳定性较好的WZ69毒株作为建立新布尼亚病毒IFA检测方法的抗原种子株.IFA方法的佳工作条件:一抗(患者血清)适稀释度为1∶40；二抗(异硫氰酸荧光素标记的羊抗人IgG抗体)适稀释度为1∶150；二抗中伊文思蓝适稀释度为1∶20000.在126例患者中,新布尼亚病毒IgG抗体阳性者96例,阴性者30例,抗体阳性率为76.19％,与RT-PCR的检测阳性率[72.22％(91/126)]差异无统计学意义(P＞0.05).结论 建立的新布尼亚病毒IgG抗体IFA检测方法敏感性高,特异性强,操作简单,可用于新布尼亚病毒致发热伴血小板减少综合征患者的实验室检测.
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九项呼吸道联检试剂对多种呼吸道感染病原体检测的临床意义
目的 为临床提供一种快速诊断呼吸道感染病原体的方法.方法 对1318例呼吸道感染患者的血清标本应用九项呼吸道联检试剂(间接免疫荧光法)同时检测九项主要病原体的IgM抗体,包括嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)和副流感病毒1、2和3型(PIVS).结果 非典型病原体感染率为33.3％(439/1318),其中以肺炎支原体为多见,其次为呼吸道合胞病毒,流感病毒B、A次之；混合感染率达15.7％(207/1318)；感染人群以儿童多见.结论 九项呼吸道联检试剂(间接免疫荧光法)检测快速、操作简便、准确性高,检测范围广、利于早期发现,费用不高,适合各大医院推广应用.
关键词： 呼吸道感染 无特异性病原体有机物 荧光抗体技术 间接 抗体 -
不同转移潜能的人体横纹肌肉瘤细胞系细胞间通讯的研究
目的研究细胞间通讯功能在3种不同转移潜能的人体横纹肌肉瘤细胞系间及其与培养的正常人肌母细胞的差别及其意义.方法采用间接免疫荧光法,用激光扫描共聚焦显微镜定量测定与细胞间通讯有关的间隙连接蛋白(connexin43,CX43)的含量,并用荧光漂白后恢复技术检测间隙连接介导的细胞间通讯的功能.结果 CX43在正常肌母细胞中呈高表达,主要定位于细胞膜,有时定位于胞质,而在横纹肌肉瘤中表达下降;CX43阳性率及荧光强度均随着横纹肌肉瘤转移潜能的增加而降低(P＜0.05);荧光漂白后恢复技术结果显示横纹肌肉瘤细胞荧光漂白后恢复率下降而且与横纹肌肉瘤细胞的转移潜能呈负相关(P＜0.05).结论不同程度细胞间通讯功能的抑制可能与横纹肌肉瘤的转移潜能不同有关,其有可能成为判断横纹肌肉瘤恶性程度及预后的指标之一.
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广东省严重急性呼吸综合征病毒的分离和鉴定
目的分离和鉴定引起广东省非典型肺炎的病原体.方法收集非典型肺炎患者的各种临床标本,用狗肾传代细胞(MDCK)进行病原体分离,并运用血清学和分子生物学方法进行鉴定.结果用MDCK细胞从非典型性肺炎患者标本中分离到病毒,用SARS病毒聚合酶基因的特异引物,通过巢式聚合酶链反应(nest RT-PCR),扩增出一个279 nt的片段,序列分析结果显示,该序列和目前已知的冠状病毒有39%～65%同源性,和来源于不同地区分离的SARS冠状病毒株(中国北京、香港、台湾和德国、意大利等)在同一个位置(第12个碱基)仅有一个碱基不同,由a→t.间接免疫荧光抗体检测显示,该病毒能够和非典型肺炎患者的恢复期血清呈特异的抗体反应.结论这种新的冠状病毒是引起广东省非典型肺炎的病原,且能够用MDCK细胞进行分离.
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慢性阻塞性肺疾病急性加重患者常见病毒感染分析
目的 分析慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期患者感染病毒特点,及病毒感染在COPD急性加重中的作用.方法 将武警四川省总队医院2015年4月-2016年3月收治的COPD急性加重期患者193例为A组,同期COPD稳定期患者50例为B组.检测两组患者呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒的IgM抗体.结果 两组患者在年龄、性别、病程方面差异无统计学意义(P＞0.05).A组病毒感染率13.47％,高于B组(x2=5.29,P＜0.05).A组感染的病毒以乙型流感病毒多见(感染率12.44％),之后依次为甲型流感病毒(感染率7.78％)、副流感病毒(感染率7.25％)、腺病毒(感染率2.63％)、呼吸道合胞病毒(感染率1.32％).单一病毒感染占COPD急性加重期感染病毒患者的34.6％,2种病毒感染占15.4％,3种或3种以上病毒感染占50％.夏秋季病毒感染率高于冬春期,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 COPD急性加重患者有13.47％存在病毒感染,且大部分为2种或2种以上病毒感染,病毒感染可能在COPD急性加重中起重要作用,需重视COPD患者病毒感染的预防和治疗.
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三种方法检测抗dsDNA抗体的比较
目的 比较间接免疫荧光法(IIF)、酶联免疫吸附测定(ELISA)及放射免疫检测法(Farr)检测抗dsDNA抗体的敏感性及特异性,为开展临床联合检测寻找合适的方法.方法 收集我院门诊和住院患者血标本共200份,其中包括门诊和住院及后期追踪经临床诊断的系统性红斑狼疮(SLE)120份标本、类风湿关节炎(RA)20份标本.进行性系统硬化症(PSS)20例.混合型结缔组织病(MCTD)20例,干燥综合征(SS)20例,另健康体检者50例(全部经排查不具有结缔组织病)同时用以上三种方法检测抗dsDNA抗体.结果 用IIF、ELISA及Farr检测抗dsDNA抗体,SLE患者抗dsDNA抗体阳性率分别为25%、32%和32%.RA患者抗dsDNA抗体阳性率均为0.PSS患者抗dsDNA抗体阳性率分别为0.0和5%.MCTD病抗dsDNA抗体阳性率分别为0、5%和10%.SS患者抗dsDNA抗体阳性率均为0.健康体检者抗dsDNA抗体阳性率均为0.结论 用两种方法联合检测抗dsDNA抗体,尤其是IIF和ELISA检测,能提高单一一种方法对SLE患者抗dsDNA抗体检出率,有助于SLE的诊断及病情回顾.
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视神经脊髓炎谱系疾病AQP4抗体/NMO-IgG阳性患者的分析
目的：探讨视神经脊髓炎谱系疾病脑脊液和血清AQP4抗体/NMO-IgG阳性患者的临床意义。方法收集样本资料库中476例样本，随访经专家门诊或会诊中心明确诊断，对其中114例AQP4抗体/NMO-IgG阳性抗体的视神经脊髓炎、视神经脊髓炎谱系病其他临床类型（ONMSDs）及疾病对照组患者进行分析。应用猴脑组织的间接免疫荧光法检测NMO-IgG抗体、含有人类重组全长AQP4肽段的转染细胞（HEK293细胞）为基质的间接免疫荧光法检测AQP4抗体、野生型HEK293细胞作为阴性对照基质。阳性结果判断以NMO-IgG抗体阳性和AQP4抗体阳性或其中之一为阳性均定义为阳性。结果 NMO组、NMOSDs组及NMO＋NMOSDs组，AQP4抗体/NMO-IgG抗体检测的阳性率、敏感度、特异度、符合支持临床诊断率及预测患病率依次分别为70.3%、70.3%、92.0%、79.0%和59.7%，64.4%、64.4%、92.0%、74.3%和64.2%，67.1%、67.15、92.0%、72.9%和76.6%。使用猴脑组织基质同时检测NMO-IgG抗体，血清和脑脊液的阳性率为49.1%和17.5%。使用转染细胞基质同时检测AQP-4抗体，血清和脑脊液的阳性率为74.6%和44.7%。结论 AQP4抗体/NMO-IgG抗体的测定可以为临床正确诊断疾病提供有价值的信息。建议使用两种基质同时检测血清或脑脊液，可以提高阳性检测率。AQP4抗体/NMO-IgG抗体的出现不是NMOSDs所独有或唯一，应当结合临床综合分析诊断疾病。
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AMA-M2阳性的原发性胆汁性肝硬化患者免疫学特点分析
目的分析抗线粒体M2亚型抗体阳性（ AMA-M2）的原发性胆汁性肝硬化（ PBC）患者免疫学等实验室诊断特点，推进临床PBC的早期诊断和治疗。方法对400例AMA-M2阳性的PBC患者采用间接免疫荧光法检测血清ANA、AMA、SMA、LKM和PCA等5种自身抗体。采用免疫印迹法检测患者血清7种主要肝抗原：Sp100、PML、gp210、LKM-1、LC-1、SLA/LP和Ro-52。应用全自动生化分析仪检测患者ALP、γ-GT等生化指标，全自动血细胞分析仪和凝血分析仪检测患者 WBC、RBC、HGB、PLT 和 PT 等血液学指标。结果患者自身抗体检测：ANA荧光模型主要包括核膜型、多核点型、着丝点型和胞浆颗粒型，阳性率分别为70％、52％、43％、3％。荧光模型组合方式包括：多核点型＋核膜型、着丝点型＋核膜型、着丝点型、多核点型、胞浆颗粒型以及仅AMA阳性者，阳性率分别为42％、28％、15％、10％、3％、2％，荧光滴度均≥1∶320。SMA、PCA、LKM阳性率均低于5％。患者主要肝抗原为Ro-52、gp210、PML和Sp100，阳性率分别为53％、44％、43％、24％，荧光滴度≥1∶320，而LKM-1、LC-1、SLA/LP阳性率均低于5％。 PML、Sp100及Sp100＋PML与gp210的阳性一致率分别为29％、11％、7％。临床血液检测结果显示有41％的患者WBC和RBC降低，53％的患者HGB降低，38％的患者PLT降低，而有42％的患者PT延长。生化检测结果显示有96％和93％的患者ALP和γ-GT升高。结论 AMA-M2阳性的PBC患者具有高滴度、特征性自身抗体荧光模型及自身肝抗原，结合临床血液及生化检测结果将为临床诊断提供重要帮助。
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儿科不同年龄组呼吸道病毒感染IgM含量与免疫功能的相关性
目的 探讨儿科不同年龄组呼吸道病毒感染者血清IgM含量、病毒IgM检出率与体液、细胞免疫的关系.方法 患儿按年龄分为3组:1组,3个月至1岁,42例；2组,1～3岁,38例；3组,3～ 12岁,40例.免疫比浊法检测患儿血清IgM含量,间接免疫荧光法检测病毒IgM阳性率,流式细胞术检测CD3、CD4、CD8、NK及B淋巴细胞.结果 血清IgM含量及病毒IgM检出率1组与2、3组差异具有统计学意义(P＜0.05),血清IgM含量与病毒IgM检出率呈正相关(r=0.998,P＜0.05).按百分率统计1组与2、3组间CD4,1、3组间CD8,NK、B细胞各组间差异具有统计学意义(P＜0.05).按绝对数统计,三组间CD3、CD4及B细胞,1、3组间CD8,1组与2、3组间CD4/CD8差异有统计学意义(P＜0.05),血清IgM含量与CD3、CD4、CD8及B细胞绝对数呈负相关(r=-0.966,P＜0.05；r=-0.989,P＜0.05；r=-0.911,P＜0.05；r=-0.964,P＜0.05).结论 低年龄组免疫细胞绝对数高于高年龄组,但产生IgM水平低,致检出率低,提示低龄组免疫功能不健全.
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黑色素瘤抗原在喉癌中的表达及临床评价
目的 探讨肿瘤相关的黑色素瘤抗原(MAGE-A3)在喉癌中的表达情况,及与癌生物学行为的相关性.方法 用间接免疫荧光技术,从蛋白水平观察和比较MAGE-A3在喉癌、癌旁组织中的表达,分析喉癌中MAGE-A3的表达与临床病理参数的关系.结果 (1)MAGE-A3荧光绿色染色表明其主要表达于癌细胞胞质,癌组织染色呈斑状、块状、线状、絮状等.有时其中弥散着强染色的颗粒.而癌旁黏膜内仅见极弱的可疑的荧光染色颗粒.(2)癌旁黏膜中MAGE-A3蛋白表达率为5.56%(2/36).喉癌中MAGE-A3蛋白表达率为51.92%(27/52).MAGE-A3在癌组织中的表达与癌旁黏膜相比,差异有统计学意义(P<0.05).(3)在关于喉癌中MAGE-A3的表达与临床病理参数的关系中,随喉癌T分级、N分级、临床分期的进展,MAGE-A3表达率均增高(P<0.05).结论 (1)喉癌中MAGE-A3蛋白有较高表达,参与喉癌的发生和发展.(2)喉癌中MAGE.A3的表达受一些临床病理参数的影响.(3)MAGE-A3蛋白表达的差异可以对喉癌的发生、发展、转移作一定的预测,并可为喉癌靶向免疫治疗奠定理论基础.
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深圳市传染性非典型肺炎患者聚合酶链反应及血清学检测研究
目的探讨传染性非典型肺炎(SARS)的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及血清学检测方法.方法收集SARS临床诊断病例咽漱液标本23份和血清108份,应用SARS冠状病毒分子信标RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别进行了病原学和血清学检测.结果 23份SARS患者咽漱液用分子信标RT-PCR检测,阳性10份,阳性率为43.48%(10/23).IFA法检测血清中SARS冠状病毒IgM抗体阳性率(17.78%)明显低于ELISA法(68.89%),两者IgM阳性率存在显著性差异(χ2=23.94,P<0.005),两者IgG抗体阳性率无显著性差异(χ2=0.78,P>0.05).结论 IFA用于SARS病毒IgM检测,敏感性比ELISA差.IgM抗体检测宜于发病10 d后取标本;IgG抗体检测适于发病2周后取标本.分子信标RT-PCR可发展成为一种快速的SARS诊断检测方法,抗体检测简便、快速,可作为临床辅助诊断指标.
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磷脂酶 A2受体抗体在特发性膜性肾病中的诊断价值
目的：探讨抗磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体在成人特发性膜性肾病（IMN）中的诊断作用和联合监测价值。方法回顾性研究，选择2013年1月至2014年6月期间辽宁中医药大学附属医院、中国医科大学附属盛京医院肾内科住院患者肾活检明确诊断的IMN患者48例，非特发性膜性肾病（ NIMN）患者115例（其中过敏性紫癜性肾病亚组23例，狼疮性肾病亚组39例，IgA肾病亚组24例，肿瘤相关肾病亚组29例）；选择辽宁中医药大学附属医院临床体检中心体检健康的志愿者35例作为对照组。采用间接免疫荧光法（IIF）检测各组患者血清中PLA2R抗体，并观察抗体荧光强度与IMN组病理分期及24小时尿蛋白（24 h PRO）、血尿素氮（UREA）、胱抑素C（CYSC）、血尿酸（URIC）、肾小球滤过率估算值（ eGFR）等进行相关性分析。组间比较采用t检验，χ2做相关性分析。结果（1）48例IMN组血清标记的基质片中，37例标本PLA2R抗体基质荧光呈阳性，阳性率为77．08％；NIMN组中，基质胞浆荧光均为阴性。 IMN组患者血清PLA2R抗体的敏感度为77．08％，其特异度达100．00％。（2）与对照组比较，IMN组各肾功能主要相关指标均明显增高，差异有统计学意义（对照组与IMN组UREA分别为4．12±1．25、6．02±2．28， t＝4．446，P＝0．00；UA分别为262±49、331±112， t＝2．577，P＝0．017；CYSC分别为0．78±0．21、1．16±0．27， t＝4．63，P＝0．00）；NIMN组各亚组肾功能主要相关指标也存在差异有统计学意义（对照组与过敏性紫癜性肾病亚组UREA分别为4．12±1．25、5．43±1．84，t＝3．606，P＝0．0002；UA分别为262±49、299±51， t＝1．050，P＝0．03；CYSC分别为0．78±0．21、1．06±0．31， t＝1．672，P＝0．02。对照组与狼疮性肾病亚组UREA分别为4．12±1．25、5．90±2．20，t＝4．225，P＝0．00；UA分别为262±49、342±92，t＝2．409，P＝0．026；CYSC分别为0．78±0．21、0．92±0．24， t＝1．674，P＝0．00。对照组与IgA肾病亚组UREA分别为4．12±1．25、6．69±2．87，t＝4．756，P＝0．00；UA分别为262±49、361±52， t＝4．598，P＝0．00；CYSC分别为0．78±0．21、1．30±0．36， t＝4．752，P＝0．00。对照组与肿瘤相关肾病亚组UREA分别为4．12±1．25、5．02±1．70，t＝3．626，P＝0．002；UA分别为262±49、289±92， t＝0．05，P＝0．01；CYSC分别为0．78±0．21、0．98±0．20， t＝1．1，P＝0．01）。 IMN组与NIMN组中的4个亚组肾功能相关指标比较差异无统计学意义（P＞0．05）。（3） IMN组的PLA2R抗体荧光强度与24 h PRO呈正相关（r＝0．877， P＝0．00），与URIC呈正相关（r＝0．766，P＝0．00）。（4）IMN组血清中抗PLA2R抗体水平与病理Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期分期无相关性（ r值分别为0．087、0．194、0．182；P值分别为0．598、0．399、0．667），但抗体阳性率（Ⅰ期37．50％、Ⅱ期84．85％、Ⅲ期85．71％）可随着病情严重程度有递增趋势。结论PLA2R抗体可能是新的IMN的实验室诊断指标。（中华检验医学杂志，2015，38：595－599）
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致密细斑点型抗核抗体在自身免疫性疾病中的临床意义
目的：探讨致密细斑点型（ DFS）抗核抗体在抗核抗体（ ANA）常规检测者中的阳性分布及其在自身免疫性疾病（ AID）中的相关临床意义。方法回顾性研究。收集2011至2014年温州医科大学附属温岭医院就诊患者13728例，采用间接免疫荧光法（ IIF）检测ANA临床标本中的DFS的结果。计算DFS在临床就诊患者中的阳性检出率，统计DFS阳性的AID患者中的相关临床信息和实验室特征。阳性率比较采用卡方检验。结果在13728例患者ANA常规检测中，ANA阳性为2822例，阳性率20．56％。其中DFS阳性为248例，占所有ANA常规检测的1．81％，在ANA阳性者中的阳性率为8．79％。男、女性者在不同年龄组（≤20岁组、21～49岁组、≥50岁组）间的DFS阳性率均有统计学意义（χ2＝18．17、1500．00，P均＜0．01），以≥50岁组的DFS阳性率为高。 ANA阳性检出率以风湿免疫科中高（30．07％），但ANA阳性中的DFS主要见于感染科（32．58％）、皮肤科（21．76％）、神经科（18．58％）、肾内科（6．73％）等，且科室间的阳性率差异有统计学意义（χ2＝123．00，P＜0．01）。248例 DFS 阳性者中，包括41例 AID 患者（16．53％），207例非 AID 患者（83．47％）。其中系统性AID中以类风湿关节炎患者构成比高（29．27％），器官特异性AID中以自身免疫性甲状腺炎患者构成比高（31．71％）。 DFS阳性滴度1∶100在非AID患者中的阳性率高于AID者（χ2＝6．20，P＜0．05）；DFS阳性滴度1∶320则在AID患者中的阳性率高于非AID者（χ2＝5．38，P＜0．05）。 DFS阳性的AID患者存在不同程度的临床表现，而实验室以抗核抗体谱（ ANAs）中的15项特异性抗体均阴性为主要特征。结论 DFS是ANA阳性者中的常见荧光模式，在ANA阳性者中存在不同的性别、年龄间差异；DFS阳性者主要出现在非AID患者中；对于DFS阳性者需进一步检测其特异性的抗DFS70抗体。（中华检验医学杂志，2015，38：173－177）
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抗核抗体的检测程序与结果报告及解释
抗核抗体(ANA)的间接免疫荧光(IIF)检测,是临床为常用的自身免疫病(AID)初筛指标.本期发表的北京协和医院李永哲实验室的2篇文章,是在其长期日常工作的基础上的总结,结果表明,实验室根据所用测定试剂及其系统,建立其自身的IIF-ANA测定的参考范围,并有相应测定程序及对测定结果的合理解释,对提高ANA检测的临床应用价值有关键性作用.
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抗核抗体HEp－2细胞间接免疫荧光模型及其结果报告方式国际共识解读
抗核抗体（ANA）是多种自身免疫病（AID）特别是ANA相关的风湿性疾病（AARD）诊断的重要血清标志物。以HEp－2细胞为基质的间接免疫荧光（ IIF）法是ANA检测的重要方法，被美国风湿病学会（ACR）、欧洲自身免疫标准化促进会（EASI）等专业学会推荐为ANA检测的参考方法。2014年8月28日在巴西圣保罗举行的ANA荧光模型国际共识第一次会议上，来自15个国家的66位专家研讨形成ANA HEp－2细胞间接免疫荧光染色模型命名标准化国际共识。2015年9月22日在德国德累斯顿召开的ANA荧光模型国际共识第二次会议上形成了ANA结果报告方式国际共识。认真解读和推广ANA HEp－2细胞间接免疫荧光模型及其结果报告标准化国际共识有助于提高我国ANA检测质量和充分发挥ANA在AID临床诊疗中的价值。（中华检验医学杂志，2016，39：804－810）
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抗中性粒细胞胞浆抗体的实验室检测进展
随着生物医学技术的飞速发展和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的临床推广应用,ANCA的间接免疫荧光法(IIF)及其特异性自身抗体的各种免疫学方法也在不断发展,并对ANCA实验室检测程序的标准化带来新的改变,这些对ANCA的实验室检测技术及其临床应用带来新的机遇和挑战.
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间接免疫荧光检测在诊断呼吸道感染性疾病中的应用
及时准确的病原体诊断是控制呼吸道感染性疾病的关键.检测血清特异抗体可间接判断病原体感染情况和机体的免疫状态.血清检测包括酶联免疫法、间接免疫荧光法、血凝抑制试验和中和试验等方法.临床研究表明间接免疫荧光技术具有其技术优势和诊断价值,结合其他方法学可为临床呈现客观全面的病原学结果.
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抗核抗体筛查试验与特异性抗体确认试验的相关性研究
目的 分析探讨抗核抗体(ANA)筛查试验与特异性抗体确认试验的相关性.方法 用间接免疫荧光法(IIF)作为ANA筛查试验,用免疫印迹法(LIA)作为抗核抗体谱(ANAs)特异性抗体确认试验,对500份临床就诊患者血清标本进行检测分析,并根据IIF-ANA和LIA-ANAs检测结果分为4组(IIF-ANA~+/LIA-ANAs~+组、IIF-ANA~+/LiA-ANAs~-组、IIF-ANA~-/LIA-ANAs~+组、IIF-ANA~-/LIA-ANAs~-组).同时收集IIF-ANA~-/LIA.ANAs~+组标本,使用ELISA、双向免疫扩散法(DID)进行特异性抗体复查.结果 500份患者的标本中IIF-ANA~+/LIA-ANAs~+组为247份,IIF-ANA~+/LIA-ANAs~-组为86份,IIF-ANA~-/LIA-ANAs~-组为152份,IIF-ANA~-/LIA-ANAs~+组为15份.IIF-ANA~+/LIA-ANAs~+组中IIF-ANA滴度以≥1:1 280为主,占48.2%,1:80-1:160占23.9%,1:320-1:640占27.9%.在167例IIF.ANA~-患者中LIA-ANAs~+占9.0%(15/167),15份IIF-ANA~-/LIA-ANAs~+标本中:包括11份抗SSA抗体和抗R052抗体阳性,并与ELISA、DID法复查结果基本一致;抗组蛋白(Histone)、抗Scl-70、抗Jo-1、抗线粒体-M2(AMA-M2)抗体阳性各1份.LIA-ANAs与ELlSA、DID的阳性符合率为100%、69%.且IIF-ANA~-/LIA-ANAs~+组患者经临床资料分析明确诊断自身免疫病(AID)者为8例.86份为IIF.ANA~+/IJA.ANAs~-的标本,以1:80～1:160的滴度为主(50.0%),荧光模式以均质型(H)为主(36.1%),其与IIF-ANA~+/LIA-ANAs~+组比较[1:80～1:160的滴度占23.9%,荧光模式均质型(H)占17.0%],差异有统计学意义(χ~2=20.47、12.42,P均<0.05).结论 ANA临床检测中町先以筛查试验进行检测,若阳性,再进行特异性抗体确认试验.但足,对于临床疑似AID的患者,无论ANA初筛试验阴性与否,均需进行各种针对特异性抗体的确认试验;各种特异性抗体的确认试验不能完全替代ANA的筛查试验.
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临床标本抗核抗体102 651例检测结果回顾性分析
目的 探讨抗核抗体(ANA)在临床就诊患者中的阳性分布趋势及在自身免疫病(AID)中的临床意义.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)检测102 651份来自2004年至2008年期间北京协和医院就诊患者血清标本中的ANA(男女比例1:3,平均年龄41岁).选取符合AID诊断的患者3 064例,其中:SLE 1 757例、干燥综合征(SS)250例、类风湿关节炎(RA)518例、多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)150例、系统件硬化症(SSc)171例、原发性胆汁性肝硬化(PBC)108例、自身免疫性肝炎(AIH)44例及强直性脊柱炎(AS)66例.疾病对照组 560例,其中:炎症性疾病452例和肿瘤108例.分析ANA在不同性别、年龄(≤20岁组、21～49岁组、≥50岁组)和AID患者中的阳性率、滴度以及荧光模式的分布.结果 在102 651份检测标本中,ANA阳性率为49%,其中男性为26%,女性为56%,二者差异有统计学意义(χ~2=6 652.84,P<0.01).不同年龄组间ANA阳性患者的阳性率差异也有统计学意义(≤20岁组46%、21～49岁组50%、≥50岁组47%,χ~2:108.68,P<0.01).ANA 阳生患者荧光模式分析表明,单一荧光模式以斑点型(34%)和均质型(16%)为主,混合荧光模式以斑点/均质型为主(16%).而AID组中的SLE、SS、RA、PM/DM患者单一荧光模式以斑点型为主(分别为32%、40%、28%、31%),PBC患者以核膜型、着丝点型为主(分别为36%、14%).AID患者的ANA阳性率为82%,与疾病对照组(13%)比较,差异有统计学意义(χ~2=1 114.15,P<0.01).其中SLE的阳性率高为94%.AID患者滴度以≥1:160为主,疾病对照组患者以1:80滴度为主.结论 临床就诊患者中ANA的阳性率在不同性别、年龄组间存在差异;不同AID患者中的ANA阳性率和滴度均存在差异,临床检验工作中应重视ANA滴度在AID诊断中的临床价值.另外,ANA阳性患者的荧光模式旱现多样性,特别是某些特殊荧光模式对AID的诊断具有重要临床意义,但仅根据荧光模式来判断AID则有一定的片面性.`
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呼吸道联检试剂在HIV/AIDS合并呼吸道非典型病原体感染诊断中的应用研究
目的 探讨呼吸道联检试剂对HIV/AIDS合并呼吸道感染患者的血清样品非典型病原体的诊断价值.方法 采用西班牙Vircell公司生产的呼吸道联检试剂(间接免疫荧光法)对419例HIV/AIDS合并呼吸道感染患者进行9种病原体检测.结果 419例中,非典型病原体总阳性率为26.0％,其中嗜肺军团菌1型阳性率居第一位(17.4％),肺炎支原体阳性率居第二位(9.5％),2种及以上病原体混合感染阳性率为10.3％.结论 呼吸道联检试剂对于HIV/AIDS合并呼吸道感染患者的病原学诊断有着重要的临床指导意义.
