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唐山工人医院重症监护病房耐碳青霉烯肺炎克雷白菌耐药表型分析
目的:检测耐碳青霉烯肺炎克雷白菌KPC酶及金属酶,为临床合理用药提供实验室依据.方法:选择耐碳青霉烯肺炎克雷白菌35株,采用改良Hodge试验检测KPC酶,采用纸片协同法检测金属酶.结果:35株肺炎克雷白菌改良Hodge试验均呈阳性;其不但对碳青霉烯类抗生素耐药,且对大部分β内酰胺类抗生素耐药(耐药率100%),对喹诺酮类抗生素耐药(耐药率>70%);对少数抗生素,如头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、米诺环素、复方新诺明耐药率较低.2株同时产KPC及MBL的肺炎克雷白菌对碳青霉烯类抗生素耐药,其对所检测抗生素耐药率均100%.结论:耐碳青霉烯肺炎克雷白菌既能将耐药基因传递给其他细菌,同时又能够接受其他细菌的耐药基因,使该菌更易产生耐药性.
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耐碳青霉烯类抗菌药物的肠杆菌科细菌耐药性与分子特征分析
目的 了解对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的肠杆菌科细菌的发生及耐药情况,探讨耐药与产酶的关系. 方法 选取2011-2012年医院亚胺培南或美罗培南不敏感的肠杆菌科细菌15株,用琼脂稀释法测定小抑菌浓度(MIC),改良Hodge试验和EDTA纸片协同试验筛选产碳青霉烯酶表型;PCR检测碳青霉烯酶基因及其他β-内酰胺酶基因,多位点序列分型(MLST)进行分子分型及同源分析.结果 共收集碳青霉烯类抗菌药物不敏感肠杆菌科细菌15株;多黏菌素B和替加环素敏感性较高,均>90.00%;肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和黏质沙雷菌均检出产KPC酶菌株,占73.33%;11株产KPC酶菌中10株为KPC-2+ESBLs,1株为KPC-2+AmpC,其中3株为KPC-2+ESBLs+AmpC,4株非产KPC酶菌株中有2株ESBLs+AmpC,各有1株仅检测到ESBLs或AmpC酶,未检测到产金属酶及OXA酶菌株;MLST分型以ST11为主,共4株.结论 医院产KPC-2酶细菌以肺炎克雷伯菌多,产KPC菌株同时携带多种耐药基因与高度耐药相关;ST11型为医院优势流行型别.
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产KPC-2型碳青霉烯酶日沟维肠杆菌的耐药性及机制研究
目的 研究一株耐碳青霉烯类药物日沟维肠杆菌中的耐药机制及其耐药基因特点,为临床医师合理选择抗菌药物提供参考.方法 采用琼脂稀释法进行药物敏感性试验,聚合酶链反应(PCR)及测序检测β-内酰胺酶耐药基因,等电聚焦电泳(IEF)测定细菌β-内酰胺酶的等电点,质粒电转化试验分析blaKPC基因能否水平传播.结果 临床分离日沟维肠杆菌产生TEM-1 (pI5.4)、KPC-2(pI6.7)两种β-内酰胺酶耐药基因,blaKPC-2基因可以在细菌之间进行水平传播；临床分离日沟维肠杆菌对多种抗菌药物耐药,电转化株也对亚胺培南和美罗培南等抗菌药物产生耐药性,但其对多种药物的敏感性好于临床株.结论 该株日沟维肠杆菌耐碳青霉烯类药物与细菌产生这两种β-内酰胺基因相关.
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22株耐亚胺培南肠杆菌科细菌KPC酶及整合子分布
目的 了解耐亚胺培南的肠杆菌科细菌KPC酶(klebsiella pneumoniae carbapenemase)及整合子分布情况.方法 收集南京市鼓楼医院22株耐亚胺培南的肠杆菌科细菌,进行改良Hodge试验,PCR扩增检测细菌KPC酶与整合子基因并行序列分析.结果 22株肠杆菌科细菌中,改良Hodge试验阳性15株(68.2％),KPC酶扩增阳性15株(68.2％),整合子PCR扩增阳性6株(27.3％).结论 KPC酶的流行需引起实验室及临床的关注.
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大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药性研究
目的：探究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药性的研究。方法：收集笔者所在医院2012年7月-2014年6月住院患者的标本，采用梅里埃vitek 2 compact全自动微生物分析仪对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行鉴定并行药敏试验，探讨大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药性变化。结果：近两年来，产ESBLs大肠埃希菌的检出率由37.9%上升到45.0%，肺炎克雷伯菌的检出率由20.0%下降到12.9%；大肠埃希菌平均耐药率为0.12%，肺炎克雷伯菌平均耐药率为2.06%，两者均呈上升趋势；产ESBLs多耐肠杆菌科菌株仍对亚胺培南保持高度敏感性，但是非产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率却呈上升趋势，尤其是肺炎克雷伯菌，上升趋势较为显著。结论：产ESBLs的大肠埃希菌检出率呈上升趋势，肺炎克雷伯菌检出率呈下降趋势；但非产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率却呈上升趋势，尤其是肺炎克雷伯菌。因此，院内应根据检测结果指导临床合理、逐级选用抗菌药物，并加强多重耐药菌监测，防止交叉感染。
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碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌中KPC酶的研究
目的 了解上海部分医院肠杆菌科细菌中KPC酶的产生及耐药情况.研究KPC酶的分子生物学特性和blaKPC的转移和传播.方法 在上海4所医院收集亚胺培南或美罗培南(纸片扩散法)中介或耐药的肠杆菌科菌株,PCR检测blaKPC、DNA测序、接合转移试验、质粒电泳、Southern blot.结果 在上海4所医院共收集到7株对亚胺培南药敏结果 (纸片扩散法)中介或耐药的肠杆菌科细菌;PCR检测显示有2株菌株携带blaKPC-2;接合转移试验、质粒电泳、Southern blot试验显示blaKPC-2是由一个50 kb大小的质粒携带.结论 上海4所医院2006年的KPC酶的检出率还比较低;2株肠杆菌科菌株的blaKPC-2都是由1个50 kb的质粒所携带.
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徐州地区三级医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的检测与流行状况分析
目的：了解徐州地区三级医院肺炎克雷伯菌产KPC酶流行状况。方法收集徐州地区三级医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌130株，予VITEK-32型全自动微生物分析系统鉴定，筛选出对亚胺培南耐药或中介菌株，对初筛阳性菌予改良Hodge试验进行表型确认，PCR方法检测KPC基因。结果初筛41株肺炎克雷伯菌可疑产碳青霉烯酶，经改良Hodge试验测定35株KPC酶阳性，检出率为26.9%（35/130），PCR方法检测有33株KPC酶阳性，检出率为25.4%（33/130）。结论徐州地区三级医院产KPC酶肺炎克雷伯菌发生率相对较高，需引起临床关注。
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耐亚胺培南肺炎克雷伯菌分子流行病学及耐药传播机制研究
目的：探讨临床收集亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌的耐药分子机制和克隆流行情况。方法采用K-B纸片法进行药敏实验，多位点序列分型（MLST）进行临床菌株克隆分型，滤膜接合法进行质粒接合实验，PCR扩增筛选菌株的常见耐药基因和其周围序列结构。结果亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌对青霉素类、头孢菌素类、含抑制剂β-内酰胺类、氨基糖苷类等药物均显示出很强的多重耐药性，MLST分型显示耐药克隆具有明显的流行特征，13株携带blaKPC-2基因的流行克隆均为ST11型。这13株细菌亚胺培南耐药性均由可接合性质粒介导，并且同时介导和转移了编码CTX-M型、TEM型或DHA型的β-内酰胺酶基因。 Tn4401-Tn3复合转座子或其变体2介导了blaKPC-2基因的转移。结论临床肺炎克雷伯菌亚胺培南耐药的主要原因是产KPC-2酶菌株的克隆播散，同时可接合质粒造成的耐药基因快速水平转移也起到了重要作用。
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1456株连续分离的肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性分析
目的:研究浙江省人民医院2008年4月-2010年3月临床连续分离的肺炎克雷伯菌的耐药性和分布.方法:采用VITEK32型全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验;用WHONET 5.4软件对细菌耐药率进行统计分析;采用改良的Hodge试验,进行碳青酶烯酶表型的筛选.结果:1456株肺炎克雷伯菌标本分布情况为:痰液801株(55%),咽拭子195株(13.4%),尿液165株(11.6%);科室分布情况:ICU41.1%,呼吸科17.2%.耐药性分析,分离菌株对14种抗菌药物存在不同程度耐药(耐药率在12.9%～100%),其中ESBLs阳性率为16.0%,亚胺培南耐药率24.5%,美罗培南耐药率19.9%;Hodge试验结果,在1456株肺炎克雷伯菌中,阳性290株,阳性率19.9%,均为ICU病区分离株.结论:浙江省人民医院2008年4月至2010年3月肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物及14种抗菌药物耐药率较高;产KPC酶科室以ICU病区检出率高,临床应加强检测和监测.
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大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产KPC酶表型筛查与耐药关系
目的:了解浙江省人民医院2008年4月-2010年3月大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率及KPC(Klebsiella pneumoniae carbapenemase)酶表型阳性的菌株检出率.方法:采用VITEK32型全自动微生物分析系统、肉汤稀释法进行药敏试验,检测亚胺培南,美罗培南的敏感性;采用改良的Hodge试验,以厄他培南为指示药物进行碳青酶烯酶表型的筛选.结果:在528株大肠埃希菌和336株肺炎克雷伯菌中,对碳青霉烯类药物亚胺培南耐药的大肠埃希菌21株,肺炎克雷伯菌97株;对美罗培南耐药的大肠埃希菌21株,肺炎克雷伯菌74株.Hedge试验结果,大肠埃希菌29株阳性,肺炎克雷伯菌67株阳性.结论:浙江省人民医院2008年至2010年肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药率及产KPC酶的检出率已较高,临床应加强检测和监测.
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某医院产碳青霉烯酶细菌的检测与流行状况分析
目的 了解中南大学湘雅二医院产KPC酶细菌的流行情况.方法 收集该院2010年1-5月的耐亚胺培南(泰能)的46株菌株,采用改良的Hodge试验检测预留菌株是否产生KPC酶.结果 所有预留菌株改良的Hodge试验均为阴性.结论 该院未检出产KPC酶的细菌,未有产KPC酶的细菌流行.
关键词： KPC酶 肺炎克雷伯菌 改良的Hodge实验 临床意义 -
住院患者产CTX-M型ESBLs和KPC的大肠埃希菌感染分布与耐药基因分析
目的：了解住院患者产 CTX-M 型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和碳青霉烯酶（KPC）大肠埃希菌感染的临床分布与耐药情况。方法收集某院2011—2012年临床送检标本分离的多重耐药大肠埃希菌，采用微量肉汤稀释法检测抗菌药物低抑菌浓度（MIC）；聚合酶链反应（PCR）扩增 ESBLs 和 KPC 基因，确定 CTX-M 和 KPC 基因型别及 MLST 分型。结果48株多重耐药大肠埃希菌中单产 ESBLs 45株（93．75％），携带 bla CTX-M 基因者44株（91．67％），其中 bla CTX-M-1组基因20株（41．67％）、bla CTX-M-9组基因32株（66．67％），同时携带两组基因者8株（16．67％）。经基因测序确定的基因亚型有 CTX-M-14（65．91％，29／44）、CTX-M-55（31．82％，14／44）、CTX-M-15（11．36％，5／44）、CTX-M-3（2．27％，1／44）、CTX-M-24（2．27％，1／44）和 CTX-M-65（2．27％，1／44），其中 CTX-M-14＋CTX-M-55（11．36％，5／44）、CTX-M-14＋CTX-M-15（4．55％，2／44）和 CTX-M-55＋CTX-M-65（2．27％，1／44）。产 ESBLs＋KPC 菌株中2株（4．17％）经 PCR 扩增均携带 bla KPC 和 bla CTX-M 基因，经测序分析1株为 CTX-M-14＋KPC-2，1株为 CTX-M-3＋KPC-2。ST131（53．66％）是主要的 MLST 型别，检测到 ST648、ST405、ST167、ST1193等 ST 型。结论该院大肠埃希菌产 ESBLs 基因型中 CTX-M-14、CTX-M-55和 CTX-M-15亚型常见，存在多种不同亚型；ST131是主要的 MLST 型别，检测到产 KPC-2型碳青霉烯酶菌。
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肠杆菌科细菌KPC型碳青霉烯酶的研究
目的 了解某院临床分离的肠杆菌科细菌产KPC型碳青霉烯酶情况及其基因型别.方法 收集该院2009-2010年临床分离的肠杆菌科细菌1 801株,经药敏试验筛选出耐药性高的菌株,采用改良Hodge试验和聚合酶链反应(PCR)扩增检测细菌产KPC型碳青霉烯酶情况,并测序分析其基因型别.结果 1 801株肠杆菌科细菌中,有783株(43.48%)对第三代头孢菌素耐药,其中4株还对碳青霉烯类抗菌药物耐药;改良Hodge试验初筛出2株耐药菌株,经PCR扩增证实为碳青霉烯酶blaKPC-2基因.结论 该院已出现产KPC-2型碳青霉烯酶耐药基因的肠杆菌科细菌,临床与实验室应加强监测和控制.
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产ESBLs、AmpC、KPC酶的葡萄糖不发酵细菌的耐药性分析及临床分布
目的 了解本地区葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌(代表株铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌)在临床标本中的分离与耐药情况,为临床合理使用抗生素提供指导.方法 对临床分离的180株葡萄糖不发酵细菌进行分类鉴定和药敏试验,并用纸片扩散法筛选出产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)及碳青霉烯类水解酶(KPC酶)的耐药菌株.结果 在葡萄糖不发酵细菌的梅成比中,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)56株(31.1％),产AmpC酶22株(12.2％),KPC酶2株(1.1％)；同时产ESBLs和AmpC酶16株(8.9％),同时产ESBLs、AmpC、KPC酶1株(0.6％).3种主要葡萄糖不发酵细菌对头孢他啶、头孢三嗪、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率高,其中铜绿假单胞菌对阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星耐药率较低,鲍曼不动杆菌对亚胺培南、左氧氟沙星耐药率较低,嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、环丙沙星耐药率较低.结论 葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌特别是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌均有较高的多重耐药性,临床上应重视葡萄糖不发酵细菌引起的感染,根据药敏试验结果合理使用抗生素.
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产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的检测与耐药状况分析
目的：了解该院肺炎克雷伯菌产KPC型碳青霉烯（KPC酶）的情况。方法收集临床分离的肺炎克雷伯菌756株，采用K‐B法进行药敏试验，筛选出耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌，采用改良的Hodge试验、PCR检测产KPC酶的肺炎克雷伯菌。结果在756株肺炎克雷伯菌中，检出耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌41株，进行Hodge试验，检出36株KPC酶阳性菌株，阳性率87．8％。PCR扩增检出KPC酶阳性菌株39株。结论该院内发现了产KPC酶的肺炎克雷伯菌，但其分型还有待于进一步检测。
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碳青霉烯类抗菌药物不敏感的肺炎克雷伯菌产KPC酶监测
目的 了解武汉地区肺炎克雷伯菌产KPC型碳青霉烯酶的耐药基因流行状况及型别,为有效监测和控制医院感染提供实验室依据.方法 收集2014年6月至2015年10月武汉地区3家三甲医院对碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降的肺炎克雷伯菌53株,均采用Phoenix-100全自动系统进行鉴定和药敏试验,采用改良Hodge试验进行KPC初筛,聚合酶链反应对53株菌分别进行blaKPC基因扩增,阳性扩增测序验证型别.结果 53株菌中38株菌改良Hodge试验阳性,阳性率为71.70％(38/53);32株扩增出780 bp左右的目的条带,阳性率为60.38％(32/53);经测序和比对分析为blaKPC-2基因.结论 武汉地区对碳青霉烯酶类抗菌药物不敏感的肺炎克雷伯菌的碳青霉烯酶基因主要为KPC-2型,临床感染和控制部门应加强监控,防范产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌在院内暴发和流行.
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肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的检测研究
目的 了解肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的情况和耐药关系.方法 收集2007年3月至2008年10月临床分离的肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌681株,采用KB纸片法进行药敏试验,以亚胺培南,美罗培南,厄他培南为检测药物,筛选出碳青霉烯类耐药菌株,采用改良的Hodge试验、聚合酶链反应(PCR)扩增检测细菌产KPC酶及基因分型.结果 在491大肠埃希菌株和190肺炎克雷伯菌株中,对碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌6株,肺炎克雷伯杆菌6株.进行Hodge试验,12株菌全部阴性,聚合酶链反应(PCR)扩增没出现目的 基因片段.结论 在12株对碳青霉烯类抗生素耐药的细菌中未发现产KPC酶的菌株.据国内的同类研究报道,目前我国主要以产KPC-2酶为主,而且产KPC酶存在地域性差异,课题研究显示本区域暂时没发现产KPC酶的菌株,有待进一步监测研究.
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产质粒介导KPC酶大肠埃希菌的基因型分布和耐药现状
碳青霉烯酶是指所有能明显水解亚胺培南或美罗培南等碳青霉烯类抗生素的一类β-内酰胺酶.大肠埃希菌耐碳青霉烯类抗菌药物的机制主要为携带blaKPC,blaKPC基因位于可移动的质粒上,给治疗带来困难.本文着重对大肠埃希菌产质粒KPC(Kebsiellapneumoniae carbapenemase,KPC)碳青霉烯酶的耐药机制研究进展作一综述.
