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肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的表型调查
目的 从表型水平了解我院肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的流行状况,为医院感染防控和规范碳青霉烯类抗生索的使用提供实验室依据.方法 收集我院2009年9月至2011年3月临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌44株,用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型确证,并对其药敏结果 、流行病学特点进行分析.结果 44株多重耐药肺炎克雷伯菌对22种常用抗菌药物除哑胺培南外,耐药率均在40%以上,亚胺培南的耐药率为11.4%,其中有4株改良Hodge试验阳性,提示产碳青酶烯酶.2株来自烧伤科的创面分泌物,2株来自lCU的呼吸道标本.结论 我院出现了产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌,在重点科室存在局部流行的潜在威胁.需进一步从分子生物学水平确定耐药基因的类型和同源性,目前应加强院感防控.
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大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的表型检测及耐药分析
目的 了解临床分离的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶和金属酶的携带情况,并进行相关耐药机制分析.方法 采用VITEK-2型全自动微生物检测系统鉴定细菌；用微量稀释法筛选耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共36株；通过Hodge试验检测碳青霉烯酶,以EDTA/IMP、EDTA/CAZ复合纸片,亚胺培南和头孢他啶为底物,进行协同试验检测B类碳青霉烯酶(金属酶),统计分析16种抗菌药物的MIC.结果 36株病原菌对头孢菌素类、碳青霉烯类和喹诺酮类抗菌药物耐药,有5株肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类敏感；Hodge试验通过36株病原菌筛选,阳性菌株共30株,其中大肠埃希菌3株,阳性率为37.5％,肺炎克雷伯菌26株,阳性率为92.8％；只发现1株肺炎克雷伯菌金属酶阳性,A方法对金属酶的检测优于B方法.结论 在ICU和呼吸科产碳青霉烯酶是细菌耐药的主要原因.
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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布
目的 检测碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布情况,为此类菌感染的预防与控制提供理论依据.方法 改良Hodge试验检测医院临床分离肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶表型;PCR法检测KPC基因的携带率.结果 642株碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌中,Hodge试验阳性率为96.6％.KPC基因的携带率为50.9％,均为KPC-2型.结论 该医院临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因主要为KPC-2基因.
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徐州地区三级医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的检测与流行状况分析
目的：了解徐州地区三级医院肺炎克雷伯菌产KPC酶流行状况。方法收集徐州地区三级医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌130株，予VITEK-32型全自动微生物分析系统鉴定，筛选出对亚胺培南耐药或中介菌株，对初筛阳性菌予改良Hodge试验进行表型确认，PCR方法检测KPC基因。结果初筛41株肺炎克雷伯菌可疑产碳青霉烯酶，经改良Hodge试验测定35株KPC酶阳性，检出率为26.9%（35/130），PCR方法检测有33株KPC酶阳性，检出率为25.4%（33/130）。结论徐州地区三级医院产KPC酶肺炎克雷伯菌发生率相对较高，需引起临床关注。
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产KPC肺炎克雷伯菌检测方法构建与耐药机制
目的 探讨产肺炎克雷伯型碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌检测方法以及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制、可能的治疗药物.方法 选取K-B法证实的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌36株纳入本研究,使用改良Hodge试验、Carba NP试验对菌株进行验证,随后采用PCR扩增、产物琼脂糖凝胶电泳实验,并对电泳阳性条带进行基因测序鉴定.结果 K-B法药敏试验显示36株耐碳氢烯类肺炎克雷伯菌,随后行Hodge验证,33株(91.7%)是产KPC肺炎克雷伯菌,对碳氢烯类耐药而对替加环素及米诺环素仍然敏感.对Hodge试验阳性33株再行Carba NP试验确证,其中27株(87.9%)阳性,6株(12.1%)阴性;对Hodge试验阳性33株行PCR扩增及电泳实验,共有27株出现目标条带(340 bp)提示阳性,与Carba NP试验结果相一致.对出现目标条带的27株肺炎克雷伯菌再进行KPC-2耐药基因PCR扩增产物测序,均为KPC-2型耐药基因.结论 K-B法药敏试验加随后改良Hodge试验验证对于筛查、发现KPC肺炎克雷伯菌具有较高的符合度,为发现KPC肺炎克雷伯菌有效筛查方法.K-B法药敏试验证实对KPC肺炎克雷伯菌,替加环素等可能是有效治疗的药物之一.Hodge试验检测的KPC肺炎克雷伯菌,存在12.1%(6/33)的假阳性率.Carba NP 试验及PCR扩增检测一致性好,具有确证产KPC肺炎克雷伯菌作用.随后的测序研究结果表明检测出的KPC肺炎克雷伯菌均为KPC-2,该型是引起肺炎克雷伯菌对碳青酶烯酶耐药的主要机制.
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改良Hodge试验阳性肠杆菌科细菌对碳青酶烯类药物的耐药性检测方法比较
目的:了解Hodge试验阳性菌株对碳青酶烯类抗菌药物的耐药模式和评价临床常用的4种药物敏感性试验对KPC酶介导的碳青酶烯类抗菌药物耐药性的检出率.方法:收集经改良Hodge试验筛查为阳性的59株肠杆菌科细菌,用肉汤微量稀释法、纸片扩散法、VITEK-32型全自动微生物分析仪GNS-448药敏卡和ATB半自动细菌鉴定及药敏分析仪G-5药敏卡检测亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性.结果:Hodge试验阳性菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药表型模式以三者均耐药为常见,该模式在肺炎克雷伯菌耐药表型中占59.6%,在大肠埃希菌耐药表型中占30%.纸片扩散法、肉汤微量稀释法、VITEK-32、ATB法检测亚胺堵南耐药率分别为69.4%、56.0%、50.8%和18.6%,美罗培南的耐药率分别为49.3%、91.5%、56.0%和25.4%,纸片扩散法和肉汤微量稀释法对厄他培南的耐药检出率为84.7%和86.4%.结论:纸片扩散法和肉汤微量稀释法能更好的检出KPC酶介导的碳青酶烯类抗菌药物的耐药性,厄他培南可作为筛选产KPC酶菌株的指示药物.
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1456株连续分离的肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性分析
目的:研究浙江省人民医院2008年4月-2010年3月临床连续分离的肺炎克雷伯菌的耐药性和分布.方法:采用VITEK32型全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验;用WHONET 5.4软件对细菌耐药率进行统计分析;采用改良的Hodge试验,进行碳青酶烯酶表型的筛选.结果:1456株肺炎克雷伯菌标本分布情况为:痰液801株(55%),咽拭子195株(13.4%),尿液165株(11.6%);科室分布情况:ICU41.1%,呼吸科17.2%.耐药性分析,分离菌株对14种抗菌药物存在不同程度耐药(耐药率在12.9%～100%),其中ESBLs阳性率为16.0%,亚胺培南耐药率24.5%,美罗培南耐药率19.9%;Hodge试验结果,在1456株肺炎克雷伯菌中,阳性290株,阳性率19.9%,均为ICU病区分离株.结论:浙江省人民医院2008年4月至2010年3月肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物及14种抗菌药物耐药率较高;产KPC酶科室以ICU病区检出率高,临床应加强检测和监测.
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大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产KPC酶表型筛查与耐药关系
目的:了解浙江省人民医院2008年4月-2010年3月大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率及KPC(Klebsiella pneumoniae carbapenemase)酶表型阳性的菌株检出率.方法:采用VITEK32型全自动微生物分析系统、肉汤稀释法进行药敏试验,检测亚胺培南,美罗培南的敏感性;采用改良的Hodge试验,以厄他培南为指示药物进行碳青酶烯酶表型的筛选.结果:在528株大肠埃希菌和336株肺炎克雷伯菌中,对碳青霉烯类药物亚胺培南耐药的大肠埃希菌21株,肺炎克雷伯菌97株;对美罗培南耐药的大肠埃希菌21株,肺炎克雷伯菌74株.Hedge试验结果,大肠埃希菌29株阳性,肺炎克雷伯菌67株阳性.结论:浙江省人民医院2008年至2010年肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药率及产KPC酶的检出率已较高,临床应加强检测和监测.
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产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的检测与耐药状况分析
目的：了解该院肺炎克雷伯菌产KPC型碳青霉烯（KPC酶）的情况。方法收集临床分离的肺炎克雷伯菌756株，采用K‐B法进行药敏试验，筛选出耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌，采用改良的Hodge试验、PCR检测产KPC酶的肺炎克雷伯菌。结果在756株肺炎克雷伯菌中，检出耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌41株，进行Hodge试验，检出36株KPC酶阳性菌株，阳性率87．8％。PCR扩增检出KPC酶阳性菌株39株。结论该院内发现了产KPC酶的肺炎克雷伯菌，但其分型还有待于进一步检测。
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肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的检测研究
目的 了解肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的情况和耐药关系.方法 收集2007年3月至2008年10月临床分离的肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌681株,采用KB纸片法进行药敏试验,以亚胺培南,美罗培南,厄他培南为检测药物,筛选出碳青霉烯类耐药菌株,采用改良的Hodge试验、聚合酶链反应(PCR)扩增检测细菌产KPC酶及基因分型.结果 在491大肠埃希菌株和190肺炎克雷伯菌株中,对碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌6株,肺炎克雷伯杆菌6株.进行Hodge试验,12株菌全部阴性,聚合酶链反应(PCR)扩增没出现目的 基因片段.结论 在12株对碳青霉烯类抗生素耐药的细菌中未发现产KPC酶的菌株.据国内的同类研究报道,目前我国主要以产KPC-2酶为主,而且产KPC酶存在地域性差异,课题研究显示本区域暂时没发现产KPC酶的菌株,有待进一步监测研究.
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Triton X-100对Hodge和Carba NP试验检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群效能的影响
目的 探索快速、准确、简单、经济的表型检测方法,为产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群流行病学调查及临床诊疗提供更好的手段和依据.方法 纳入四川大学华西医院分离的110株鲍曼不动杆菌复合群,以多重PCR扩增结果为金标准,比较Hodge试验、CarbaNP试验与加入Triton X-100后改良的Triton Hodge试验及Carba NP-direct试验在检测鲍曼不动杆菌复合群是否产碳青霉烯酶中的敏感度、特异度及阳性效果.结果 Hodge试验在检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群中敏感度和特异度分别为71.1％、100％,高于Carba NP试验(35.0％、86.7％,P＜0.05).加了Triton X-100试剂后改良试验的敏感度和阳性效果明显增高,Triton Hodge 试验敏感度由71.1％提高到98.8％,Carba NP-direct试验敏感度由35.0％提高到85.5％,差异有统计学意义(P＜0.001),但特异性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 改良后的Triton Hodge试验及Carba NP-direct试验在检测产碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌复合群中具有更高的敏感性及阳性检测判断效果,特异度不变,因此更适用于临床常规操作.
