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产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌合并多黏菌素耐药基因 mcr-1的研究
目的：分析碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae， CRE）碳青霉烯酶基因及黏菌素抗性基因 mcr-1，并分析 mcr-1的特性。方法连续收集2014年1月至2015年12月南京医科大学附属苏州医院分离的34株 CRE，采用聚合酶链反应（PCR）筛选 KPC、NDM、IMP、VIM和 mcr-1基因，对携带 mcr-1基因的 CRE 进行质粒接合转移试验、经 S1酶切后脉冲场凝胶电泳分析质粒大小，通过药敏试验分析 mcr-1和 NDM转移受体菌特点。结果34株临床分离的CRE 中，KPC 阳性16株、NDM阳性6株、IMP 2株、VIM1株，并鉴定到2株同时携带 NDM和 mcr-1基因的菌株，分别为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，通过质粒接合试验成功获得携带 mcr-1和 NDM质粒， NDM-5所在质粒为 IncX3，mcr-1所在质粒为 IncX4，药敏实验显示，mcr-1转移受体菌仅对黏菌素耐药，NDM转移受体菌对除氨曲南以外的所有β-内酰胺类耐药。结论我院分离菌株中检出同时携带mcr-1及 NDM基因的 CRE，提示需进一步加强临床多重耐药菌的监测。
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耐亚胺培南肺炎克雷伯菌分子流行病学及耐药传播机制研究
目的：探讨临床收集亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌的耐药分子机制和克隆流行情况。方法采用K-B纸片法进行药敏实验，多位点序列分型（MLST）进行临床菌株克隆分型，滤膜接合法进行质粒接合实验，PCR扩增筛选菌株的常见耐药基因和其周围序列结构。结果亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌对青霉素类、头孢菌素类、含抑制剂β-内酰胺类、氨基糖苷类等药物均显示出很强的多重耐药性，MLST分型显示耐药克隆具有明显的流行特征，13株携带blaKPC-2基因的流行克隆均为ST11型。这13株细菌亚胺培南耐药性均由可接合性质粒介导，并且同时介导和转移了编码CTX-M型、TEM型或DHA型的β-内酰胺酶基因。 Tn4401-Tn3复合转座子或其变体2介导了blaKPC-2基因的转移。结论临床肺炎克雷伯菌亚胺培南耐药的主要原因是产KPC-2酶菌株的克隆播散，同时可接合质粒造成的耐药基因快速水平转移也起到了重要作用。
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健康人大肠埃希菌中Ⅰ类整合酶基因IntI1定位分析
目的:了解健康人大肠埃希菌中I类整合子基因定位情况,探讨其在细菌耐药性获得与传递中的作用.方法:采用质粒接合实验和斑点杂交实验.结果:64.3%的整合子位于接合性质粒上,35.7%位于染色体或其他非接合性质粒中.结论:本文研究的整合子阳性菌株对耐药基因的捕获主要是通过接合性质粒介导的,造成耐药基因的水平播敞.
