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我国非伤寒沙门菌对多粘菌素的耐药现况及mcr-1基因携带概况
目的 初步探究我国非伤寒沙门菌对多粘菌素的耐药情况.方法 利用微量肉汤稀释法,测定不同来源404株非伤寒沙门菌对多粘菌素B及多粘菌素E的小抑菌浓度(MIC),计算耐药率,推测野生沙门菌株的耐药阈值.同时利用聚合酶链式反应(PCR)方法检测+菌株携带mcr-1基因的情况.结果 404株沙门菌对多粘菌素B及E的MIC范围为≤0.125 μg/ml至＞16 μg/ml,对多粘菌素B的MIC50、MIC90分别为1μg/ml和8μg/ml;对多粘菌素E的MIC50、MIC90分别为2 μg/ml和8μg/ml.优势血清型鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌及德尔卑沙门菌对多粘菌素B及E的MIC值分布不同.以8 μg/ml为耐药阈值判定折点,实验菌株对多粘菌素B及E的耐药率分别为10.89％和15.84％;其中食源性沙门菌、人源性沙门菌及动物源性沙门菌对多粘菌素B的耐药率分别为12.50％、17.16％和0.00％ (P ＜0.01);对多粘菌素E的耐药率分别为8.30％、27.94％和0.78％(P＜0.01).发现7株同时耐多粘菌素及三代头孢的菌株.发现1株人源鼠伤寒沙门菌携带可转移的mcr-1基因,且该菌株产ESBLs.结论 发现我国人源产ESBLs的沙门菌携带mcr-1基因.根据体外药敏结果,非伤寒沙门菌对多粘菌素B及E的耐药折点设为8 μg/ml较宜.沙门菌对多粘菌素的耐药率尚处于低水平,应加强不同来源沙门菌对多粘菌素的耐药监测.
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2015年分离自中国大陆食品的1070株沙门菌耐药性分析
目的 了解我国2015年食源性沙门菌的耐药状况及mcr-1基因在硫酸粘菌素(conlistin,CT)耐药菌株中的分布情况.方法 采用微量肉汤稀释法测定1 070株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测196株CT耐药菌株中是否存在mcr-1基因.结果 71.9％ (769/1 070)的沙门菌对受试的16种抗生素呈现不同程度的耐药性,其中萘啶酸(NAL)、四环素(TET)、氨苄西林(AMP)、氨苄西林/舒巴坦(SAM)4种抗生素的耐药率较高,均在40％以上,未见碳青霉烯类耐药菌株,47.5％ (508/1 070)的沙门菌同时耐受3类或3类以上抗生素,表现为多重耐药,同时耐受抗生素种类高为9类.共存在141种耐药谱,优势耐药谱型为NAL、AMP-SAM-NAL-CT和TET.196株CT耐药沙门菌检出1株携带mcr-1基因且超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性的菌株,该菌株为伦敦血清型,是所有测试菌株中唯一1株九重耐药株.部分省份沙门菌耐药率较高.生禽肉和生畜肉来源沙门菌耐药率较高,分别为80.6％ (349/433)和73.5％(283/385).结论 我国2015年食源性沙门菌整体耐药水平较高,且多重耐药情况严重,生禽畜肉是耐药沙门菌的主要来源,我国食源性沙门菌中存在携带mcr-1基因的严重耐药菌株,应引起关注.
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2016年中国26个省市食源性沙门菌耐药性特征分析
目的 了解2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌的耐药状况.方法 采用微量肉汤稀释法测定755株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测mcr-1基因的存在情况.结果 72.7％(549/755)的沙门菌对受试的16种抗生素呈现不同程度的耐药性,其中萘啶酸(NAL)、四环素(TET)、氨苄西林(AMP)、氨苄西林/舒巴坦(SAM)4种抗生素的耐药率较高,均在34％以上,未见碳青霉烯类[亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)]耐药菌株,44.4％ (335/755)的沙门菌同时耐受3类或3类以上抗生素,表现为多重耐药,同时耐受抗生素种类高为8类.共存在134种耐药谱,优势耐药谱型为NAL、TET和AMP-SAM-NAL.全部菌株中检出2株携带mcr-1基因的菌株,分别为八重耐药的德尔卑沙门菌(Salmonella Derby)和七重耐药的鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium).部分省份沙门菌耐药率较高.结论 2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌整体耐药水平较高,多重耐药情况严重,我国食源性沙门菌中存在携带mcr-1基因的多重耐药菌株,应引起关注.
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浙江省东阳地区大肠埃希菌mcr-1的检测及流行病学研究
目的 研究浙江省东阳地区临床分离大肠埃希菌多粘菌素耐药现状和质粒介导多粘菌素耐药基因mcr-1的携带情况,了解携带mcr-1的大肠埃希菌菌株流行特征,为当地临床医生防控mcr-1携带菌株的扩散和传播提供理论依据.方法 收集浙江省东阳市人民医院2016年1月至12月临床分离的非重复315株大肠埃希菌,所有菌株分离自血液、尿液和呼吸道标本等.采用PCR检测质粒介导的多粘菌素耐药基因 mcr-1、β-内酰胺酶和碳青霉烯类耐药基因;微量肉汤稀释法测定抗生素对mcr-1阳性菌株的低抑菌浓度;采用接合试验检测 mcr-1基因是否位于可转移质粒上;通过多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)对mcr-1阳性菌株进行分子分型.结果 在315株大肠埃希菌中,共5株检测出mcr-1,阳性率为1.6%.5株mcr-1阳性大肠埃希菌中,2株同时检测到β-内酰胺酶耐药基因,均为blaTEM-1和blaCTX-M-14,此2株大肠埃希菌对一、二、三代头孢菌素均耐药,仅1株对头孢吡肟耐药.所有5株mcr-1阳性大肠埃希菌对环丙沙星及左氧氟沙星均敏感,对替卡西林/克拉维酸均耐药.未检测到碳青霉烯类耐药基因.5株 mcr-1阳性大肠埃希菌接合成功1株.MLST分型结果显示有4种 ST型,其中ST131型有2株,ST43、ST69、ST349各1株.结论 多粘菌素耐药基因 mcr-1在浙江省东阳地区临床分离的大肠埃希菌中检测率较低,仅为1.6%,说明该基因在东阳地区还没有形成流行趋势,只是零星散发式存在.但已经发现mcr-1基因与β-内酰胺酶耐药基因共存的现象,提示临床应加强对抗生素使用的控制,防止多重耐药菌株的扩散.
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mcr-1及pmrAB介导临床分离大肠埃希菌对粘菌素耐药的机制研究
目的 探究临床分离大肠埃希菌对粘菌素的耐药机制.方法 收集商丘市第一人民医院2010—2017年临床分离的1988株大肠埃希菌,通过琼脂稀释法筛选粘菌素耐药大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法检测包括粘菌素在内的9种临床常用抗菌药物的低抑菌浓度(MIC).PCR检测和测序分析与粘菌素耐药相关基因mcr-1和pmrAB.接合转移试验验证携带mcr-1耐药基因质粒的转移性.S1-PFGE及Southern blot对携带mcr-1耐药基因质粒的菌株进行定位分析.多位点序列分型(MLST)检测粘菌素耐药大肠埃希菌的序列型(ST).结果 通过琼脂稀释法筛选共计获得6株粘菌素耐药大肠埃希菌.药敏试验分析显示,6株菌均表现为多重耐药表型.通过PCR检测与测序分析显示,6株菌中有4株菌携带mcr-1,其余两株菌中存在pmrB基因突变导致的氨基酸替换(L167P).接合转移试验、S1-PFGE及Southern blot杂交分析显示,4株mcr-1阳性大肠埃希菌的质粒位于大小约为60 kb可接合性质粒上.MLST分析显示6株菌间存在6种不同的ST型.结论 本研究中mcr-1及pmrAB基因的突变是介导大肠埃希菌对粘菌素耐药性产生的主要机制.临床中须进一步监测粘菌素耐药大肠埃希菌的产生与传播,合理使用抗菌药物,防止粘菌素耐药菌株的扩散.
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质粒介导的多黏菌素耐药基因mcr-1研究进展
多黏菌素作为治疗多重耐药革兰阴性菌感染的"后一道防线",得到广泛关注.2015年国际首次报道质粒介导的多黏菌素耐药基因mcr-1,刷新了既往人们对多黏菌素耐药机制的认知,对临床耐药菌感染的治疗带来了巨大冲击.自mcr-1发现以来,已在全球30多个国家和地区检测到mcr-1,遍布世界五大洲.世界各国对此高度重视,纷纷加强多黏菌素的管控,采用措施遏制mcr-1的传播和扩散.本文主要从mcr-1的结构特征、流行情况、分子生物学特点、预防等方面进行综述,旨在加强对mcr-1的认识和防控.
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浙江省23家医院血流感染患者多粘菌素耐药基因mcr-1流行情况
目的 研究浙江省大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌引起的血流感染患者中多粘菌素耐药情况及mcr-1基因流行情况.方法 从2014年3月至2015年4月,收集来自浙江省11个市23家医院引起血流感染的大肠埃希菌(611株)和肺炎克雷伯菌(258株)共869株.微量肉汤稀释法和E-test法分别检测多粘菌素及其他抗菌药物的低抑菌浓度(MIC);PCR法检测多粘菌素耐药基因mcr-1及mcr-1阳性菌株的其他耐药基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)分析阳性菌株的亲缘关系;S1-PFGE联合Southern印迹杂交定位mcr-1基因.结果 共发现6株多粘菌素耐药大肠埃希菌(3株MIC为8 μg/ml,3株MIC为16 μg/ml),且6株菌株均为mcr-1阳性,耐药率及mcr-1检出率为0.69%;未发现多粘菌素耐药或mcr-1阳性肺炎克雷伯菌.PFGE结果显示6株菌株均为非同源性,MLST结果显示6株菌株均为不同的ST型.Southern印迹杂交表明mcr-1基因分别定位在约33 kb、61 kb和244.4 kb不同大小质粒上.结论 mcr-1在浙江省血流感染患者中流行率低,仅为0.69%,且介导低水平的多粘菌素耐药(MIC 为8 ~16 μg/ml).mcr-1阳性大肠埃希菌通常为非ST131型克隆,同时对其他多种类型抗生素敏感,且并不影响感染患者的预后.需要进行更深入的研究来探明mcr-1基因在临床上的地位.
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产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌合并多黏菌素耐药基因 mcr-1的研究
目的：分析碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae， CRE）碳青霉烯酶基因及黏菌素抗性基因 mcr-1，并分析 mcr-1的特性。方法连续收集2014年1月至2015年12月南京医科大学附属苏州医院分离的34株 CRE，采用聚合酶链反应（PCR）筛选 KPC、NDM、IMP、VIM和 mcr-1基因，对携带 mcr-1基因的 CRE 进行质粒接合转移试验、经 S1酶切后脉冲场凝胶电泳分析质粒大小，通过药敏试验分析 mcr-1和 NDM转移受体菌特点。结果34株临床分离的CRE 中，KPC 阳性16株、NDM阳性6株、IMP 2株、VIM1株，并鉴定到2株同时携带 NDM和 mcr-1基因的菌株，分别为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，通过质粒接合试验成功获得携带 mcr-1和 NDM质粒， NDM-5所在质粒为 IncX3，mcr-1所在质粒为 IncX4，药敏实验显示，mcr-1转移受体菌仅对黏菌素耐药，NDM转移受体菌对除氨曲南以外的所有β-内酰胺类耐药。结论我院分离菌株中检出同时携带mcr-1及 NDM基因的 CRE，提示需进一步加强临床多重耐药菌的监测。
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肠杆菌科细菌mcr-1基因筛查及其与多黏菌素耐药表型的相关性
目的 筛查沈阳地区肠杆菌科细菌mcr-1基因并进行分析,明确本地区mcr-1基因在肠杆菌科细菌中的携带率,携带mcr-1基因菌株的流行情况以及对多黏菌素的耐药情况.方法收集沈阳地区5家三甲医院2013年至2015年临床分离的肠杆菌科细菌共计2 680株,采用PCR方法筛查mcr-1基因,结果阳性菌株用Sanger测序方法进行验证;用脉冲场凝胶电泳检测携带mcr-1基因的肠杆菌科细菌的同源性.采用微量肉汤稀释法进行多黏菌素的药敏试验.结果 沈阳地区2 680株肠杆菌科细菌携带mcr-1基因者共26株(0.97％),其中大肠埃希菌20株(1.4％)、肺炎克雷伯菌6株(0.8％).携带mcr-1基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对多黏菌素的耐药率分别为65％ (13/20)和83.3％ (5/6),不敏感率为95％ (19/20)和100％ (20/20);对照组的40株大肠埃希菌和12株肺炎克雷伯菌均对多黏菌素敏感.中国医科大学附属第一医院携带mcr-1基因的19株大肠埃希菌的脉冲场凝胶电泳结果为无关,不具有同源性.结论 沈阳地区发现了少量携带mcr-1基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌;携带mcr1基因与多黏菌素耐药密切相关;本地区携带mcr-1基因的肠杆菌科细菌未出现医院感染的爆发流行.
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多黏菌素E耐药基因mcr-1在我国养殖场的流行及其传播扩散
多黏菌素E是临床上用来治疗多重耐药革兰阴性菌的重要药物之一,特别是用于治疗产超广谱β-内酰胺酶或碳青霉烯酶的多重耐药菌.多黏菌素耐药基因mcr-1的出现,使得细菌对多黏菌素E的耐药性有了水平传播的可能.养殖场被认为是MCR-1阳性菌株传播的源头.食物链和环境是mcr-1基因传播的主要途径.本篇综述重点阐述了mcr-1在我国养殖场的流行情况以及其可能的传播扩散途径,并提出了当下需要解决的一些问题,以期能为今后同行的相关研究提供参考.
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mcr-1介导多黏菌素耐药性的研究进展
随着细菌耐药问题越来越严重,多黏菌素作为多重耐药革兰阴性菌治疗的后防线而被重新重视.然而,近来发现质粒上存在的多黏菌素耐药基因mcr-1可介导耐药性在菌株间的水平转移.mcr-1发现后,有越来越多关于mcr-1的研究和报道.本文对mcr-1的结构、全球流行情况、耐药机制、传播机制及临床意义等方面进行综述.希望通过对该基因的了解为相关科研人员和临床工作者提供理论参考,为应对日益严峻的抗菌药物耐药性提供策略.
