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茶叶等农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法的研究
目的 研制快速检测茶叶等农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药残留的装置及检测方法.方法 试样中的二硫代氨基甲酸酯类农药被分解成易挥发的二硫化碳后,通入氮气将二硫化碳从基体中带出,导入吸收-显色液中,进行显色测定.结果 平均回收率范围为83.5%～115.5%,相对标准偏差在4.00%～7.70%之间,当称取干样为5.0 g时,定量检出限为0.6μg/g;当称取湿样为20.0 g时,定量检出限为0.15μg/g.结论 该比色测定方法简便、低成本,适用于农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药残留的快速检测.在此基础上研制的比色卡,可用于农产品中二硫代氨基甲酸酯类农药残留的快速、简便测定.
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DDC递增法诱导大鼠胰腺纤维化动物模型的研究
目的建立DDC剂量递增腹腔内注射诱发大鼠胰腺纤维化动物模型方法,并与常规恒量DDC腹腔内注射方法比较.方法 70只Wistar大鼠随机分为4组:生理盐水注射组、低剂量DDC恒量注射组(600 mg/kg/次,每周2次,共8次)、高剂量DDC恒量注射组(1 000 mg/kg/次,每周2次,共8次)及DDC剂量递增注射组(首次400 mg/kg/次,以10%浓度连续递增,每周2次,共8次).每周于注射后24 h、48 h、1周、2周、3周、4周6个时间点分别随机处死3只大鼠,并对胰、肝、肾组织进行病理学诊断与胶原纤维测定.实验中观察动物并发症(鼻出血,尿失禁,震颤)的发生率及死亡率.结果 DDC递增组大鼠并发症较少,但成模时间及纤维化程度与恒量注射组无显著性差异,纤维化程度增加过程较为渐进,提示更为接近胰腺纤维化的发展过程.结论 DDC注射递增法可以建立大鼠胰腺纤维化动物模型,此模型较常规恒定DDC腹腔注射法更为优越.
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4(3H)-喹唑啉酮衍生物的合成及体外抗肿瘤活性
将6-溴甲基-2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮在无水磷酸钾存在下与二硫化碳以及不同的胺反应,合成了一系列具有二硫代氨基甲酸酯侧链的4(3H)-喹唑啉酮衍生物,其结构经ESI-MS,1H NMR,元素分析或HRMS所证实.采用MTT法测定了目标化合物8a～8q对人慢性髓性白血病K562细胞和人宫颈癌Hela细胞的体外抗肿瘤活性,结果表明化合物8q对K562和Hela细胞的体外生长具有显著的抑制作用,IC50值分别为0.5和12.0 μmol·L-1,因而可作为抗肿瘤药物研究的先导化合物.
关键词： 4(3H)-喹唑啉酮 二硫代氨基甲酸酯 抗肿瘤活性 -
吡咯二硫氨基甲酸酯对体外循环犬炎性反应及心肌能量代谢的影响
目的观察核转录因子抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)对体外循环犬炎性细胞因子及心肌能量代谢的影响.方法12只犬随机分为对照组(C组)和PDTC组(P组),每组6只.P组于CPB前静脉注射PDTC 30mg/kg,C组静脉注入等量生理盐水.全心缺血60min,灌注60min.分别于阻断升主动脉前(基础值)、阻断升主动脉后30、60min及开放升主动脉后30、60min测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)浓度;于阻断升主动脉前、阻断升主动脉后60min及开放升主动脉后60min取心肌组织,测定ICAM-1表达及腺苷酸(ATP、ADP、AMP、TAN、EC)含量.结果1.TNF-α浓度:两组在阻断升主动脉后各时点TNF-α浓度均高于基础值(P＜0.01),P组低于C组(P＜0.01).2.IL-1β浓度:C组在阻断后各时点高于基础值(P＜0.01),P组在阻断升动脉后各时点均未见升高;P组低于C组(P＜0.01).3.心肌ICAM-1表达:阻断前两组均未见ICAM-1表达,随着CPB时间的延长,两组ICAM-1表达均增强(P＜0.01),但P组弱于C组(P＜0.05).4.心肌腺苷酸含量:与基础值比较,两组阻断升主动脉后ATP、TAN及EC含量均降低,开放升主动脉后C组ATP、TAN及EC降低,P组ATP降低(P＜0.05或0.01),TAN和EC差异无统计学意义(P＞0.05);P组高于C组(P＜0.05或0.01).结论PDTC可抑制CPB所致的炎性反应,减缓心肌高能磷酸盐的降解.
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吡咯二硫氨基甲酸酯联合超极化停搏液对兔离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用
目的观察吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)联合超极化停搏液对兔离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法日本大耳白兔112只,其中96只随机分为6组,分别为:空白对照组(K组);St.ThomasⅡ组(S组);吡那地尔组(P组);PDTC联合K-H液组(PK组);PDTC联合St.ThomasⅡ组(PS组);PDTC联合含吡那地尔的停搏液组(PP组),后三组在取兔心脏前10 min静脉注射PDTC 15mg·kg-1,而前三组注射等量生理盐水,每组16只.剩余16只作为正常组,在灌注K-H液平衡10 min后取心肌组织,进行免疫组化检测.各组离体心脏Langendorff模型平衡灌注充氧K-H液10min后(平衡10min),按分组灌注停跳液.全心缺血40min,每组中8只复灌60 min,8只复灌120min.记录从复灌开始至心脏开始跳动的时间(TR);分别于平衡10 min、复灌15、30、60、120 min时记录心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室内压大上升速率(+dp/dtmax)的恢复率及左室舒张末压(LVEDP);于平衡10min、复灌60 min时测定冠状静脉流出液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度;于平衡10 min、复灌60、120min时测定心肌NF-κB p65阳性率;于平衡10min、复灌120min时测定心肌细胞粘附分子-1(ICAM-1)表达.结果与其它各组比较,P、PS、PP组心脏TR均缩短,PP组在复灌15～120 min时HR、LVSP、+dp/dtmax时恢复率升高,LVEDP降低(P＜0.05或0.01);与K、S、P组比较,PK、PS、PP组在复灌60min时冠状静脉流出液TNF-α浓度降低(P＜0.01);PK、PS、PP组复灌60、120 min时心肌NF-κBp65阳性率、复灌120 min时心肌ICAM-1表达均低于K、S、P组(P＜0.05或0.01).结论超极化停搏液联合PDTC能较好地保护心肌缺血再灌注损伤,其保护作用强于单纯用超极化停液、去极化停搏液、去极化停搏液联合PDTC.
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自动顶空气相色谱法测定番茄酱中二硫代氨基甲酸酯的残留量
目的:建立了番茄酱中二硫代氨基甲酸酯残留量的自动顶空气相色谱方法.方法:将番茄酱样品加入顶空样品瓶中,加入氯化亚锡盐酸溶液,并在80℃的条件下恒温加热,用电子捕获检测器检测产生的二硫化碳的量,外标法定量.结果:3个添加水平的平均回收率在83.1%～112.4%之间,相对标准偏差在0.54%～3.70%之间.结论:该法简便、快速、灵敏、准确,各项技术指标均满足农药残留检测的要求.
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008 抗氧化剂和NFκB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响
目的: 探讨NFκB以及抗氧化剂在大鼠肺微血管内皮细胞中对TNF-α加LPS诱导的iNOS基因表达的作用及其机制. 方法: 通过免疫组化染色ABC法用抗内皮细胞抗体CD31对培养的大鼠肺微血管内皮细胞进行鉴定. Griess法测定细胞培养上清液中的亚硝酸盐浓度以反映NO的生成. Northernblot结合RT-PCR分析iNOS mRNA水平. EMSA法测定细胞核内NFκB的结合活性. 结果: TNFα(100 U/ml)加LPS(1 ug/ml)处理内皮细胞2 h后iNOS mRNA水平明显上升(P<0.05), 24 h后能明显增加NO的生成(P<0.01). 用放线菌酮(10 mg/ml)或抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate, PDTC, 0.1 mmol/L)或氮乙酰基半胱氨酸(N-acetylcystenine, NAC, 20 mmol/L)处理内皮细胞能降低TNF-α和LPS诱导的亚硝酸盐(NO)生成和iNOS mRNA表达(P<0.05). 抗氧化剂PDTC和NAC对NO诱导生成的抑制作用呈现剂量-效应关系. TNF-α(100 U/ml)加LPS(1 μg/ml)能刺激内皮细胞中NFκB的激活和转位. 当内皮细胞培养体系中加入PDTC(0.1 mmol/L)或NAC(20 mmol/L)1.5 h后这种激活作用被阻滞. 结论: ① TNF-α加LPS能够在转录或转录后水平诱导iNOS基因表达. ② TNF-α加LPS诱导的iNOS基因表达依赖于NFκB的激活. ③抗氧化剂能够通过抑制NFκB的激活来抑制iNOS基因的诱导表达.
